發(fā)布時(shí)間：2018-01-31 00:30

  本文關(guān)鍵詞： ZNF545 啟動(dòng)子區(qū)甲基化 肝癌 5-氮雜-2’-脫氧胞苷　出處：《中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景肝癌是世界上常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率在男性中居第五位,在女性中居第九位,2012年新增肝癌患者782000人。肝癌是僅次于肺癌的第二大腫瘤相關(guān)的致死原因,2012年約有746000人死于肝癌。肝癌的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)的累積性改變?cè)诟伟┑陌l(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮主要作用。許多抑癌基因的啟動(dòng)子區(qū)高甲基化促使其在肝癌中表達(dá)沉默。約有1/3的鋅指蛋白(Zinc Finger Proteins, ZFPs)中含有KRAB (Kruppel-associated box)結(jié)構(gòu)域,稱為KRAB-ZFPs,其在細(xì)胞增殖、分化、凋亡及腫瘤形成過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。ZNF545是KRAB-ZFPs家族的一員,位于19q13.1,該區(qū)域在多個(gè)腫瘤中頻繁出現(xiàn)雜合性缺失。ZNF545基因在多種腫瘤中頻發(fā)甲基化。已有研究發(fā)現(xiàn)ZNF545在胃癌及乳腺癌中的表達(dá)沉默與其啟動(dòng)子區(qū)甲基化相關(guān),但在肝癌中ZNF545的表達(dá)調(diào)控及功能尚不清楚。目的探究ZNF545在肝癌中的表觀遺傳學(xué)改變及其生物學(xué)功能,為其在臨床的應(yīng)用和明確肝癌發(fā)病機(jī)制提供新的線索。方法九株肝癌細(xì)胞系(HBX344, SNU449, SMMC-7721, SNU182, SNU387, Huh7,HepG2, LM3 及 PLC-PRF-5)、一株永生化細(xì)胞系L02和62例原發(fā)性肝癌組織標(biāo)本被用于本實(shí)驗(yàn)的研究。MSP技術(shù)、MTT實(shí)驗(yàn)、克隆形成、侵襲遷移實(shí)驗(yàn)、western-blot及流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)被應(yīng)用于本研究中。結(jié)果ZNF545在肝癌細(xì)胞系SNU449、SMMC7721、L02、Huh7、HepG2以及LM3中表達(dá)缺失,其啟動(dòng)子區(qū)在這六株細(xì)胞系中呈完全甲基化;在細(xì)胞系SNU182和PLC-PRF-5中有少量表達(dá),啟動(dòng)子區(qū)呈部分甲基化;在ZNF545高表達(dá)的細(xì)胞系HBX344和SNU387中,ZNF545的啟動(dòng)子區(qū)為非甲基化。在去甲基化藥物5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5-AZA)誘導(dǎo)下,ZNF545在細(xì)胞系SNU449、SMMC7721、L02、Huh7、 HepG2和LM3中恢復(fù)表達(dá),在SNU182和PLC-PRF-5細(xì)胞系中表達(dá)量增加。而在HBXF344和SNU387中,加藥前后ZNF545的表達(dá)量無明顯改變。在肝癌細(xì)胞系中ZNF545的表達(dá)缺失或下降受到其啟動(dòng)子區(qū)甲基化的調(diào)控。ZNF545的啟動(dòng)子區(qū)在肝癌組織中頻發(fā)甲基化,甲基化率為53.2%(33/62)。恢復(fù)表達(dá)ZNF545可明顯抑制SNU449和Huh7細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力,并促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。結(jié)論ZNF545在肝癌中頻發(fā)甲基化。在肝癌細(xì)胞系中,ZNF545的表達(dá)受到啟動(dòng)子區(qū)甲基化的調(diào)控。ZNF545能夠抑制肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力并促進(jìn)細(xì)胞凋亡,在肝癌的發(fā)生和發(fā)展中可能發(fā)揮抑制作用。
[Abstract]:ZNF545 is one of the most common malignant tumors in the world . The incidence rate of ZNF545 is the fifth most common malignant tumor in the world . The expression of ZNF545 plays an important role in the genesis and development of liver cancer . Conclusion ZNF545 can inhibit the proliferation , migration and invasion ability of SNU449 and Huh7 cells and promote the apoptosis of cells . ZNF545 can inhibit the proliferation , migration and invasion ability of SNU449 and Huh7 cells and promote apoptosis .

【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7

【共引文獻(xiàn)】

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1 劉偉軍;5-氮雜-2'-脫氧胞苷通過誘導(dǎo)MAT1A、S-腺苷甲硫氨酸的表達(dá)而促肝癌細(xì)胞Huh7凋亡[D];武漢大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：1477668