目的觀察白藜蘆醇對(duì)鈦顆粒誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264. 7形成的破骨細(xì)胞數(shù)量及F-actin環(huán)面積影響,并探討其機(jī)制。方法將小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264. 7分為Sham組、Vehicle組、Low-Res組、Mid-Res組、HighRes組,Sham組加入完全培養(yǎng)基,Vehicle組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基,Low-Res組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基+白藜蘆醇(1μmol/L),Mid-Res組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基+白藜蘆醇(10μmol/L),High-Res組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基+白藜蘆醇(15μmol/L)。各組細(xì)胞培養(yǎng)5天后,采用TRAP染色法檢測(cè)各組破骨細(xì)胞數(shù),采用鬼筆環(huán)鈦染色法檢測(cè)各組破骨細(xì)胞F-actin環(huán)面積,采用Realtime-PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞中TNF-α、IL-1βmRNA,采用ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞中TNF-α、IL-1β蛋白,采用Western blotting法檢測(cè)各組細(xì)胞p-p65、p-IκB蛋白。結(jié)果 Vehicle組可觀察到較多體積較大、酒紅色、內(nèi)含多個(gè)細(xì)胞核的破骨細(xì)胞,而應(yīng)用不同濃度白藜蘆醇干預(yù)后,破骨細(xì)胞數(shù)隨著藥物濃度的增加而減少; Sha...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 白藜蘆醇、鈦顆粒、細(xì)胞及試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)材料處理及濃度確定
        1.2.1 鈦顆粒去除內(nèi)毒素
        1.2.2 白藜蘆醇細(xì)胞毒性檢測(cè)及實(shí)驗(yàn)濃度的確定
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
    1.4 各組破骨細(xì)胞數(shù)與F-actin環(huán)面積測(cè)算
    1.5 各組細(xì)胞中TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白檢測(cè)
    1.6 各組細(xì)胞p-p65、p-IκB蛋白檢測(cè)
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組破骨細(xì)胞數(shù)與F-actin環(huán)面積比較
    2.2 各組細(xì)胞中TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量比較
    2.3 各組細(xì)胞中p-p65、p-IκB蛋白相對(duì)表達(dá)量比較
3 討論



本文編號(hào)：4013013