發(fā)布時間：2024-11-30 11:53

　　 目的觀察白藜蘆醇對鈦顆粒誘導小鼠巨噬細胞株RAW264. 7形成的破骨細胞數(shù)量及F-actin環(huán)面積影響,并探討其機制。方法將小鼠巨噬細胞株RAW264. 7分為Sham組、Vehicle組、Low-Res組、Mid-Res組、HighRes組,Sham組加入完全培養(yǎng)基,Vehicle組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基,Low-Res組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基+白藜蘆醇(1μmol/L),Mid-Res組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基+白藜蘆醇(10μmol/L),High-Res組加入鈦顆粒+完全培養(yǎng)基+白藜蘆醇(15μmol/L)。各組細胞培養(yǎng)5天后,采用TRAP染色法檢測各組破骨細胞數(shù),采用鬼筆環(huán)鈦染色法檢測各組破骨細胞F-actin環(huán)面積,采用Realtime-PCR法檢測各組細胞中TNF-α、IL-1βmRNA,采用ELISA法檢測各組細胞中TNF-α、IL-1β蛋白,采用Western blotting法檢測各組細胞p-p65、p-IκB蛋白。結果 Vehicle組可觀察到較多體積較大、酒紅色、內含多個細胞核的破骨細胞,而應用不同濃度白藜蘆醇干預后,破骨細胞數(shù)隨著藥物濃度的增加而減少; Sha...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 白藜蘆醇、鈦顆粒、細胞及試劑
    1.2 實驗材料處理及濃度確定
        1.2.1 鈦顆粒去除內毒素
        1.2.2 白藜蘆醇細胞毒性檢測及實驗濃度的確定
    1.3 細胞培養(yǎng)及分組
    1.4 各組破骨細胞數(shù)與F-actin環(huán)面積測算
    1.5 各組細胞中TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白檢測
    1.6 各組細胞p-p65、p-IκB蛋白檢測
    1.7 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 各組破骨細胞數(shù)與F-actin環(huán)面積比較
    2.2 各組細胞中TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白相對表達量比較
    2.3 各組細胞中p-p65、p-IκB蛋白相對表達量比較
3 討論



本文編號：4013013