目的:研究中藥熟地黃不同提取分離部位對體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)增殖活性的影響。方法:采用系統(tǒng)溶劑法以及柱色譜分離將熟地黃分成不同部位,采用CCK-8法測定熟地黃各部位對體外培養(yǎng)的海馬NSCs增殖活性的影響,并篩選出最佳作用濃度。結(jié)果:熟地黃正丁醇部位(0.8、0.4μg/mL,P<0.01)、乙酸乙酯部位(0.8μg/mL,P<0.01)和剩余水部位(0.8、0.4、0.2μg/mL,P<0.01)對NSCs增殖活性有明顯促進(jìn)作用,且乙酸乙酯部位的二氯甲烷-甲醇20∶1洗脫樣品(0.2μg/mL,P<0.01)及正丁醇部位的10%乙醇洗脫樣品(0.4μg/mL,P<0.01)對NSCs增殖的促進(jìn)效果最佳。結(jié)論:熟地黃乙酸乙酯部位、正丁醇部位和剩余水部位可能含有促NSCs增殖的潛在活性成分。

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【部分圖文】：

圖1熟地黃各部位的制備

見圖1。熟地黃經(jīng)75%乙醇回流提取，濃縮后制得熟地黃醇提物（SDE）。SDE部位依次經(jīng)石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取，濃縮后得石油醚部位（SDE-Pe）、乙酸乙酯部位（SDE-Ea）、正丁醇部位（SDE-nB）、剩余水部位（SDE-W）。其中，SDE-Ea以硅膠柱層....

圖2原代及傳代神經(jīng)干細(xì)胞狀態(tài)（×100)

NSCs取材第1天，鏡下觀察可見大量分布均勻的懸浮生長的中心透亮小圓球；48h后，可見大部分NSCs聚集成形狀不規(guī)則的小神經(jīng)球，背景出現(xiàn)小黑點狀的細(xì)胞碎片；72h后，可見NSCs聚集的神經(jīng)球增大，形狀規(guī)則呈圓形，折光性強(qiáng)；5～7d后，可見大量神經(jīng)球，且部分神經(jīng)球折光率降低，中心較....

本文編號：3993022