目的槲皮素是一種廣泛應用于傳統(tǒng)中藥的植物類黃酮,被證實具有抗炎、抑癌、神經(jīng)保護及心肌保護等作用,在動物實驗中也被證實能夠抑制卵巢摘除引起的骨量丟失,但目前槲皮素骨保護的分子機制尚不清楚。本研究旨在分析中藥單體槲皮素對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖、分化的影響,并進一步探討其分子機制。材料及方法自賽業(yè)生物公司購買已鑒定的C57BL/6小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,使用完全培養(yǎng)基復蘇、培養(yǎng)。1.使用含不同濃度槲皮素的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞6天,使用CCK-8法檢測不同時間不同濃度作用下細胞活性;2.使用完全培養(yǎng)基及含不同濃度槲皮素、雌激素的成骨誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞7天或21天,ALP試劑盒檢測細胞ALP活性,茜素紅S染色（ARS）觀察細胞外基質(zhì)形成及礦化;3.使用含不同濃度槲皮素的成骨誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞7天,定量實時PCR（QPCR）檢測Osterix（OSX）、runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（RUNX 2）和骨橋蛋白（OPN）的表達;4.使用雌激素受體拮抗劑阻斷雌激素信號通路,QPCR檢測槲皮素處理后OSX、RUNX 2和OPN的表達;5.使用雌激素受體拮抗劑阻斷雌激素信號通路,檢測槲皮素處理后骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（B... 

【文章來源】：東南大學江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

部分信號通路交聯(lián)位點

酮類化合物后骨髓內(nèi)骨祖細胞數(shù)量增加，骨量下降情況好轉(zhuǎn)。槲皮素是主要的黃酮類化合物之一，由于其有益的藥理作用和保健作用，同時也成圖 1-2 常見黃酮類化合物化學結(jié)構(gòu)式（圖片來自 Swioklo S, Watson K A, Williamson E M, et al. Defining Key StructuralDeterminants for the Pro-osteogenic Activity of Flavonoids[J]. J Nat Prod. 2015, 78(11):2598-2608）


本文編號：2896202