發(fā)布時(shí)間：2020-11-18 23:27

　　 目的:本課題采用煙熏的方法建立COPD大鼠模型,選用具有活血化瘀功效的中成藥-復(fù)方血栓通膠囊進(jìn)行干預(yù),通過(guò)觀察實(shí)驗(yàn)前后大鼠肺組織的形態(tài)學(xué)改變及CyclinD1、CyclinE在mRNA水平及蛋白水平表達(dá)的變化,研究CyclinD1、CyclinE在COPD氣道重塑中的作用機(jī)制及中醫(yī)活血化瘀法對(duì)COPD大鼠氣道重塑的干預(yù)作用,探討延緩甚至逆轉(zhuǎn)COPD氣道重塑進(jìn)程的有效機(jī)制,為復(fù)方血栓通膠囊預(yù)防、治療COPD氣道重塑的臨床應(yīng)用提供科學(xué)證據(jù)。方法:1.建立COPD大鼠模型:采用反復(fù)煙熏的方法,可成功制備大鼠COPD模型。2.通過(guò)灌胃的方式給藥對(duì)大鼠進(jìn)行干預(yù),制作大鼠肺組織石蠟切片,行HE染色后觀察支氣管、肺泡以及血管的相關(guān)變化,并進(jìn)行分析討論;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量(Real-time)PCR技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫組化法,檢測(cè)CyclinD1、CyclinE在mRNA水平及蛋白水平表達(dá)變化并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1.癥狀學(xué)改變COPD模型組大鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸加快、喘息、口鼻分泌物增多、煩躁不安、毛發(fā)干枯、神情倦怠、活動(dòng)明顯減少或俯伏不動(dòng),甚至腹肌抽搐、呼吸困難等表現(xiàn),表明造模成功。潑尼松組、復(fù)方血栓通高劑量組、復(fù)方血栓通中劑量組、復(fù)方血栓通低劑量組大鼠上述表現(xiàn)均有不同程度減輕,其中高劑量組減輕明顯,但仍比潑尼松組差,正常對(duì)照組未見(jiàn)異常變化。2.肺組織病理學(xué)改變分別取各組大鼠右上肺組織,行HE染色,可見(jiàn):COPD模型組大鼠支氣管黏膜上皮脫落,杯狀細(xì)胞增多,管壁及周圍可見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);肺泡結(jié)構(gòu)紊亂,肺泡壁斷裂,肺泡融合,形成肺大泡;膠原纖維顯著增多,平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖、細(xì)胞排列紊亂,平滑肌層增厚,管腔變窄,血管管壁增厚,以上均符合COPD的病理表現(xiàn),提示造模成功。潑尼松組、復(fù)方血栓通高、中、低劑量干預(yù)組大鼠病理結(jié)果有不同程度減輕,高劑量組減輕明顯但仍比潑尼松組差,正常對(duì)照組大鼠支氣管、肺泡及血管的結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn),膠原纖維無(wú)明顯增多。3.大鼠肺組織中CyclinD1、CyclinE的表達(dá)(1)與正常組相比,COPD模型組大鼠肺組織中CyclinD1、CyclinE表達(dá)明顯上調(diào);(2)潑尼松、復(fù)方血栓通膠囊均下調(diào)大鼠肺組織中CyclinD1、CyclinE表達(dá)水平,與模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),高劑量組下調(diào)明顯,但仍低于潑尼松組。結(jié)論:1.在COPD大鼠中CyclinD1、CyclinE表達(dá)明顯增多,與氣道重塑程度(支氣管平滑肌厚度)呈正相關(guān),從而推測(cè)在COPD氣道重塑的形成過(guò)程中,CyclinD1、CyclinE起著重要的調(diào)節(jié)作用。2.復(fù)方血栓通膠囊能在一定程度上改善COPD大鼠肺泡、支氣管及血管周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。3.復(fù)方血栓通膠囊可降低COPD大鼠氣道重塑中肺組織CyclinD1、CyclinE的表達(dá),降解膠原的合成,減少氣道平滑肌增殖,減緩COPD氣道重塑病理學(xué)改變。4.祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的活血化瘀法可使COPD大鼠氣道重塑中相關(guān)因子CyclinD1、CyclinE的表達(dá)量減少,從而阻止氣道平滑肌細(xì)胞及膠原的病理性增生,干預(yù)COPD氣道結(jié)構(gòu)重塑。
【學(xué)位單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

高劑量組癥狀減輕最顯著，但仍較潑尼松組略差（圖 4、5、6）。以 NTS-Elements F 圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)量并作出相關(guān)分析，適當(dāng)調(diào)整軟件參數(shù)，分別對(duì)支氣管壁內(nèi)周長(zhǎng)（Pi）、支氣管管壁面積（WAt）、氣道平滑肌肌層面積（WAm）進(jìn)行測(cè)量，用 Pi 對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，降低測(cè)量誤差。用 WAt/Pi 的比值代表支氣管管壁厚度、WAm/Pi 的比值代表平滑肌肌層厚度（表 3）。

高劑量組癥狀減輕最顯著，但仍較潑尼松組略差（圖 4、5、6）。以 NTS-Elements F 圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)量并作出相關(guān)分析，適當(dāng)調(diào)整軟件參數(shù)，分別對(duì)支氣管壁內(nèi)周長(zhǎng)（Pi）、支氣管管壁面積（WAt）、氣道平滑肌肌層面積（WAm）進(jìn)行測(cè)量，用 Pi 對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，降低測(cè)量誤差。用 WAt/Pi 的比值代表支氣管管壁厚度、WAm/Pi 的比值代表平滑肌肌層厚度（表 3）。

高劑量組癥狀減輕最顯著，但仍較潑尼松組略差（圖 4、5、6）。以 NTS-Elements F 圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)量并作出相關(guān)分析，適當(dāng)調(diào)整軟件參數(shù)，分別對(duì)支氣管壁內(nèi)周長(zhǎng)（Pi）、支氣管管壁面積（WAt）、氣道平滑肌肌層面積（WAm）進(jìn)行測(cè)量，用 Pi 對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，降低測(cè)量誤差。用 WAt/Pi 的比值代表支氣管管壁厚度、WAm/Pi 的比值代表平滑肌肌層厚度（表 3）。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2889361