【摘要】：大葉蛇葡萄Ampelopsis megalophylla Diels et.Gilg為葡萄科蛇葡萄屬植物,其藥用部位是葉及嫩莖。味酸澀、性平,具有清熱涼血等功效。主要分布于我國湖北、陜西、云南等地,是湖北恩施地區(qū)的民間藥用植物,曾收載于《湖北中草藥志》。課題組前期經(jīng)滲漉法得到了大葉蛇葡萄總黃酮提取物。本實(shí)驗(yàn)采用MTT法對大葉蛇葡萄總黃酮提取物進(jìn)行了體外抗腫瘤活性的研究。結(jié)果表明其對人宮頸癌Hela、肺癌A549、乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2、卵巢癌A2780及結(jié)腸癌SW620六種腫瘤細(xì)胞均有一定的增殖抑制作用,并呈現(xiàn)一定的濃度、時(shí)間依賴性。其中較為敏感的細(xì)胞株有MCF-7、A2780、和SW620,IC50分別為28.47、18.41和21.85μg·mL-1。在此基礎(chǔ)上,以人乳腺癌MCF-7細(xì)胞為模型,運(yùn)用Hoechst33258熒光染色法、PI單染法及Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)記法進(jìn)一步研究大葉蛇葡萄總黃酮提取物體外抗腫瘤作用,同時(shí)運(yùn)用Rh-123染色法及蛋白免疫印跡法對其誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡的機(jī)制進(jìn)行了探討。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大葉蛇葡萄總黃酮提取物可誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡,33258染色可在熒光倒置顯微鏡下觀察到凋亡小體,雙染法顯示細(xì)胞凋亡率呈現(xiàn)一定的濃度依賴性,這二者分別從定性和定量兩個(gè)方面說明藥物誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生凋亡;PI法顯示藥物使MCF-7細(xì)胞阻滯在G2/M期。線粒體檢測顯示細(xì)胞線粒體膜電位降低,WB結(jié)果顯示caspase8、Bax、cytc、Apaf-1、caspase9和caspase3的表達(dá)量整體上隨著藥物作用濃度的增高而上調(diào),而抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)量則顯著下調(diào),且Bcl-2/Bax的比率下降。綜合以上結(jié)果分析可知,大葉蛇葡萄總黃酮提取物可以抑制MCF-7細(xì)胞增殖,其機(jī)制可能是通過線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285
【圖文】：

圖 1.1 總黃酮提取物對 Hela 圖 1.2 總黃酮提取物對 A549細(xì)胞作用的抑制率 細(xì)胞作用的抑制率圖 1.3 總黃酮提取物對 MCF-7 圖 1.4 總黃酮提取物對 HepG2細(xì)胞作用的抑制率 細(xì)胞作用的抑制率

圖 1.1 總黃酮提取物對 Hela 圖 1.2 總黃酮提取物對 A549細(xì)胞作用的抑制率 細(xì)胞作用的抑制率圖 1.3 總黃酮提取物對 MCF-7 圖 1.4 總黃酮提取物對 HepG2細(xì)胞作用的抑制率 細(xì)胞作用的抑制率

圖 1.3 總黃酮提取物對 MCF-7 圖 1.4 總黃酮提取物對 HepG2細(xì)胞作用的抑制率 細(xì)胞作用的抑制率圖 1.5 總黃酮提取物對 A2780 圖 1.6 總黃酮提取物對 SW620細(xì)胞作用的抑制率 細(xì)胞作用的抑制率

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 靳曉飛;張穎;李愛英;武密山;周曉紅;趙艷萌;高維娟;;缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖PC12細(xì)胞自噬的形態(tài)學(xué)變化與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J];中國病理生理雜志;2016年12期

2 張?zhí)鞁?韓森;張瑋;趙福建;李健;;雷公藤甲素通過誘導(dǎo)細(xì)胞自噬促進(jìn)結(jié)腸癌CT26細(xì)胞死亡[J];解剖學(xué)報(bào);2016年06期

3 趙林;吳鵬;章平貴;謝大澤;高典;周南進(jìn);;雷公藤甲素對人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞增殖、自噬和凋亡的影響[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2016年10期

4 谷仕艷;陳承志;蔣學(xué)君;張遵真;;白藜蘆醇與三氧化二砷聯(lián)合處理誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞凋亡及其機(jī)制探討[J];衛(wèi)生研究;2016年01期

5 趙巖;王志強(qiáng);;Survivin、Caspase-9的表達(dá)與大腸癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中華結(jié)直腸疾病電子雜志;2015年06期

6 方海雁;龔曉燕;洪星輝;華明柳;黃金玲;;重樓總皂苷對人胃癌MKN-45細(xì)胞凋亡及Fas/FasL信號通路的影響[J];中國中藥雜志;2015年07期

7 邱淑敏;陳濤;劉美玲;李龍飛;漢麗梅;;中藥誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年01期

8 郭海清;任鋒;陳亞利;張向穎;段鐘平;孫華;張晶;;楊梅素對HepG2細(xì)胞凋亡的影響[J];北京醫(yī)學(xué);2014年09期

9 佳娜提·達(dá)吾列提;姜楠;寇俊萍;余伯陽;;調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬的中藥有效成分研究進(jìn)展[J];中草藥;2014年16期

10 李敏;林俊;;細(xì)胞凋亡途徑及其機(jī)制[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2014年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前8條

1 施璐;參七抗癌散的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2016年

2 王叢叢;ATF6在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起的HepG2細(xì)胞自噬與凋亡中作用機(jī)制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 馬奔宇;Dpr1通過調(diào)控Vps34-Beclin1-Atg14L復(fù)合物促進(jìn)細(xì)胞自噬[D];清華大學(xué);2014年

4 易昌華;麻疹病毒血凝素蛋白H誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡及其分子作用機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2014年

5 龔克;紫草素誘導(dǎo)人肝細(xì)胞肝癌程序性死亡及其分子機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2013年

6 王耀先;大黃素激活Caspase-3等因子誘導(dǎo)人宮頸癌HELA細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2013年

7 張軍強(qiáng);苦參堿誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞自噬和凋亡的機(jī)制研究[D];蘭州大學(xué);2013年

8 王飛;腫瘤發(fā)生及治療過程中p53蛋白線粒體遷移及相關(guān)細(xì)胞凋亡途徑的研究[D];吉林大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前5條

1 范許許;自噬復(fù)合體ATG5-ATG12促進(jìn)Ⅰ型干擾素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)對口蹄疫病毒復(fù)制的影響[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

2 劉小}

本文編號：2744740