發(fā)布時間：2020-07-07 05:56

【摘要】：大葉蛇葡萄Ampelopsis megalophylla Diels et.Gilg為葡萄科蛇葡萄屬植物,其藥用部位是葉及嫩莖。味酸澀、性平,具有清熱涼血等功效。主要分布于我國湖北、陜西、云南等地,是湖北恩施地區(qū)的民間藥用植物,曾收載于《湖北中草藥志》。課題組前期經(jīng)滲漉法得到了大葉蛇葡萄總黃酮提取物。本實驗采用MTT法對大葉蛇葡萄總黃酮提取物進行了體外抗腫瘤活性的研究。結(jié)果表明其對人宮頸癌Hela、肺癌A549、乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2、卵巢癌A2780及結(jié)腸癌SW620六種腫瘤細胞均有一定的增殖抑制作用,并呈現(xiàn)一定的濃度、時間依賴性。其中較為敏感的細胞株有MCF-7、A2780、和SW620,IC50分別為28.47、18.41和21.85μg·mL-1。在此基礎(chǔ)上,以人乳腺癌MCF-7細胞為模型,運用Hoechst33258熒光染色法、PI單染法及Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)記法進一步研究大葉蛇葡萄總黃酮提取物體外抗腫瘤作用,同時運用Rh-123染色法及蛋白免疫印跡法對其誘導(dǎo)MCF-7細胞凋亡的機制進行了探討。實驗結(jié)果表明,大葉蛇葡萄總黃酮提取物可誘導(dǎo)MCF-7細胞凋亡,33258染色可在熒光倒置顯微鏡下觀察到凋亡小體,雙染法顯示細胞凋亡率呈現(xiàn)一定的濃度依賴性,這二者分別從定性和定量兩個方面說明藥物誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生凋亡;PI法顯示藥物使MCF-7細胞阻滯在G2/M期。線粒體檢測顯示細胞線粒體膜電位降低,WB結(jié)果顯示caspase8、Bax、cytc、Apaf-1、caspase9和caspase3的表達量整體上隨著藥物作用濃度的增高而上調(diào),而抗凋亡蛋白Bcl-2的表達量則顯著下調(diào),且Bcl-2/Bax的比率下降。綜合以上結(jié)果分析可知,大葉蛇葡萄總黃酮提取物可以抑制MCF-7細胞增殖,其機制可能是通過線粒體途徑誘導(dǎo)細胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285
【圖文】：

圖 1.1 總黃酮提取物對 Hela 圖 1.2 總黃酮提取物對 A549細胞作用的抑制率 細胞作用的抑制率圖 1.3 總黃酮提取物對 MCF-7 圖 1.4 總黃酮提取物對 HepG2細胞作用的抑制率 細胞作用的抑制率

圖 1.1 總黃酮提取物對 Hela 圖 1.2 總黃酮提取物對 A549細胞作用的抑制率 細胞作用的抑制率圖 1.3 總黃酮提取物對 MCF-7 圖 1.4 總黃酮提取物對 HepG2細胞作用的抑制率 細胞作用的抑制率

圖 1.3 總黃酮提取物對 MCF-7 圖 1.4 總黃酮提取物對 HepG2細胞作用的抑制率 細胞作用的抑制率圖 1.5 總黃酮提取物對 A2780 圖 1.6 總黃酮提取物對 SW620細胞作用的抑制率 細胞作用的抑制率

【參考文獻】

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2 劉小}

本文編號：2744740