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紅花化學(xué)成分的提取分離及其在大鼠體內(nèi)分布的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-03 21:19
【摘要】:紅花(Carthamus tinctorius L)為菊科植物,其花作為傳統(tǒng)藥物在蒙藥中具有重要應(yīng)用。大多數(shù)研究集中于對(duì)紅花化學(xué)成分的提取分離,本文在提取分離的基礎(chǔ)上,對(duì)紅花經(jīng)口服給藥后其多種化學(xué)成分在大鼠體內(nèi)的分布進(jìn)行了探究,主要內(nèi)容如下:1.提取分離:采用乙醇超聲的方法提取紅花,粗提物經(jīng)柱層析色譜(ODS、Sephadex LH20等)及半制備高效液相色譜進(jìn)行分離純化,經(jīng)分析UPLC-MS和NMR數(shù)據(jù)鑒定出8個(gè)化合物的結(jié)構(gòu):羥基紅花黃色素A、異槲皮素、綠原酸、山柰酚3-O-蕓香糖苷、6-羥基山柰酚-3,6,7-三葡萄糖苷、Saffloquinoside E、Safflospermidine B、6-羥基山柰酚-3-蘆丁糖苷-6-葡萄糖苷。2.分布研究:將提取分離得到的化合物建立UPLC-MS檢測(cè)方法,并優(yōu)化其在大鼠組織內(nèi)的定性定量方法。采用單獨(dú)給藥及與訶子復(fù)合給藥兩種方式,分別于0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h五個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)心、肝、脾、肺、腎及腦這六個(gè)組織中紅花成分的含量,重點(diǎn)分析了紅花的主要成分羥基紅花黃色素A及6-羥基山柰酚-3-蘆丁糖苷-6-葡萄糖苷。大鼠灌胃紅花粉末后,這兩個(gè)成分在各組織中分布廣泛,且訶子有助于羥基紅花黃色素A在較短時(shí)間內(nèi)進(jìn)入心臟和肝臟,并在心、肝、脾、肺及腎中可保持較為穩(wěn)定持久的濃度。3.細(xì)胞毒性試驗(yàn):紅花及訶子粗提物對(duì)人正常肝細(xì)胞及腎表皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞毒性評(píng)估,結(jié)果表明,紅花粗提物在200μg/ml及以下濃度對(duì)兩細(xì)胞無毒性,訶子粗提物在最高濃度(200μg/ml)下有輕微毒性。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R284.2;R285.5
【圖文】:

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內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文確定好最佳的乙醇提取條件后,我們?nèi)「稍锏募t花 5 kg,根據(jù)前期研究[97]碾榨后的紅花提取率高的特點(diǎn),用 80 %乙醇進(jìn)行超聲提取三次,提取時(shí)間為 2 h、1 h、30 min。將提取液減壓濃縮,得到浸膏 1192g,將浸膏經(jīng)大孔樹脂,依次用水,30 %乙醇,60 %乙醇,90 %乙醇進(jìn)行洗脫。濃縮后得到 Fr1-Fr4 四個(gè)部分。Fr1 部分通過過 ODS C18 柱,以 10%甲醇洗脫,得到 Fr5,過 ODS 柱用水洗脫得到化合物 1(53 mg)。Fr2 過 ODS 柱分別以 10%,20%甲醇洗脫,得到 Fr6 和 Fr7。Fr6 一部分通過制備液相得到化合物 2(9.8 mg),另一部分通過 ODS C18、Sephadex LH20 柱層析,得到化合物 3(115.5 mg)、化合物 4(12.3mg)和化合物 5(10.7 mg)。Fr7 通過 MCI、ODS C18 得到化合物 6(15 mg)和化合物7(23 mg)。Fr3 通過 ODS C18 用水洗脫,再通過 Sephadex LH20 60%甲醇洗脫、ODS C1850%甲醇洗脫得到化合物 8 (67 mg)。具體提取分離流程圖見圖 2-1

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內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文化合物 8. 白色粉末 ESI-MS: 583(M-H)-:;C34H38N3O6;1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)1.32/1.46 (2H, m, H8);1.36/1.54 (2H, m, H-7);1.63/1.79 (2H, m, H-3);3.06/3.20 (2H, m,H-9), 3.13/3.30 (2H, m, H-2), 3.27/3.30 (2H, m, H-6), 3.35/3.39 (2H, m, H-4), 5.86/5.88 (J =12.5 Hz) (H-8'');5.72/5.78 ( J = 12.5 Hz) (H-8'''), 6.30/6.36 (J = 15.5 Hz) (H-8' ), 6.47/ 6.50 ( J= 12.5 Hz) (H-7'');6.53/6.56 ( J = 12.5 Hz) (H-7''');6.67 (J = 8 Hz) (3''' ,5''');6.67 ( J = 8 Hz)(3''',5''');6.74 ( J = 8 Hz) (H-3' , 5' );7.16 (J = 8 Hz) (H-2'', 6'');7.31 ( J = 8 Hz) (H-2''', 6''');7.34 ( J = 8 Hz) (H-2' , 6' ); 7.37/7.39 (J = 15.5 Hz) (H-7' );通過與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對(duì)比基本一致,故確定該化合物 Safflospermidine B[33]。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2740187

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