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雞胚肽及其鋅螯合物的制備與應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2020-07-03 19:47
【摘要】:目的:本研究以雞胚蛋為原料,通過酶解制備雞胚肽并考察其抗氧化活性;制備雞胚肽與微量元素鋅的螯合物并考察其抗疲勞及提高免疫力的功能。方法:通過單因素試驗法和正交試驗法優(yōu)選雞胚蛋最佳酶解工藝。使用活性炭對酶解工藝制備出的雞胚肽進(jìn)行脫腥脫色處理并采用超濾對其進(jìn)行分段。通過對雞胚肽與微量元素鋅螯合工藝的單因素試驗法以及正交試驗法得出最佳的螯合工藝。最后通過初步的抗疲勞及免疫調(diào)節(jié)藥效學(xué)試驗驗證制得的富鋅雞胚肽的作用。結(jié)果:雞胚蛋的最優(yōu)酶解方法為先用堿性蛋白酶再用胰蛋白酶,最佳酶解工藝:底物濃度為10%,調(diào)節(jié)溫度至55℃,pH值為8.0,加入3.0%的堿性蛋白酶酶解3h,待溫度下降至40℃,加入2.0%胰蛋白酶酶解2h,此酶解工藝的水解度為31.96%。最佳的脫腥脫色工藝為在底物濃度為10%的情況下,加入0.5%的粉末活性炭,調(diào)節(jié)pH為5.0,于65℃水浴中加熱攪拌40min,其脫色率為88.57%,肽回收率為82.63%,腥味小。雞胚肽分段及抗氧化活性測定結(jié)果為分子量1KDa的雞胚小肽抗氧化活性最好,IC_(50)為0.25mg/ml。富鋅雞胚肽中鋅的螯合工藝最佳方法如下:螯合溫度選定在70℃,鋅離子與雞胚肽的濃度之比為1:2,pH為8.0,螯合的時間為2h,在此反應(yīng)條件下,螯合率為52.63%,采用火焰原子吸收光譜法測出鋅在此螯合物的含量約為0.0937%。經(jīng)過初步藥效學(xué)研究可知富鋅雞胚肽具有較好的抗疲勞、提高免疫力的作用。結(jié)論:通過雙酶酶解制備出的雞胚肽具有較好的抗氧化活性;雞胚肽經(jīng)過與鋅螯合之后制得的富鋅雞胚肽具有較好的抗疲勞和提高免疫的能力。
【學(xué)位授予單位】:山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R283;R285.5
【圖文】:

蛋白酶,種類,酶解,底物濃度


表 2-3 雞胚蛋中蛋白質(zhì)含量測定試驗結(jié)果樣品 蛋白質(zhì)含量(%)平均值(%) 水分含量(%) 平均值(%)1 14.5 72.32 14.8 14.6 73.1 73.33 14.6 74.6 底物濃度的選擇結(jié)果依據(jù)前期原材料的處理以及勻漿的預(yù)試驗可知,當(dāng)雞胚底物濃度高于 20%,物濃稠,容易酶解不徹底,不適合酶解的進(jìn)行;當(dāng)?shù)孜餄舛冗^低時 5%,物料特與底物碰撞、接觸少,若要充分酶解所需時間比較長,酶解效果不理想,故濃度為 10%時,酶解效果比較好,所以綜合考慮最佳的底物濃度為 10%。 蛋白酶種類的選擇結(jié)果。

酶解時間,水解度,適宜時間,酶解反應(yīng)


圖 2-2 不同酶解時間對水解度的影響圖 2-2 數(shù)據(jù)可以得知,隨著反應(yīng)時間的延長,水解度不斷增大。但再繼續(xù)間,水解度的變化不大;可能原因是酶的專一性較強(qiáng),在酶解反應(yīng)的初始階物的濃度都比較大,酶與底物能夠充分接觸從而使酶解反應(yīng)迅速,隨著反物逐漸被消耗,酶的特異性催化位點逐漸減少,考慮到生產(chǎn)的需要和經(jīng)定胰蛋白酶酶解適宜時間為 2h、堿性蛋白酶酶解適宜時間為 3h。2)酶底比對水解度的影響

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2740096

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