發(fā)布時(shí)間：2020-07-02 23:35

【摘要】：目的:觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-凋亡途徑在大鼠跟腱腱病中的作用,通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78、eIF2α、CHOP在大鼠跟腱腱病中的表達(dá),探討大鼠跟腱腱病發(fā)生的可能機(jī)制及鄭氏一號(hào)新傷藥對(duì)大鼠跟腱腱病的預(yù)防效果。方法:將8周齡SPF級(jí)SD大鼠96只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(C組)、單純跳躍組(J組)、單純敷藥組(M組)和跳躍敷藥組(JM組),每一組又根據(jù)取材時(shí)間不同分為4W、6W、8W組,每組8只。將J組與JM組進(jìn)行電刺激跳躍法造模,M組與JM組第4周開(kāi)始外敷鄭氏一號(hào)新傷藥干預(yù),觀察大鼠生命體征變化,記錄大鼠有效跳躍次數(shù)。HE染色觀察跟腱組織形態(tài)學(xué)變化,Tunel法檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù),Western Blot檢測(cè)大鼠跟腱組織GRP78、eIF2α、CHOP蛋白表達(dá)。結(jié)果:(1)有效跳躍次數(shù)結(jié)果:J組與JM組大鼠有效跳躍次數(shù)均呈下降趨勢(shì),前5周J組與JM組大鼠有效跳躍次數(shù)基本一致,無(wú)顯著差異(P0.05);第6周開(kāi)始JM組大鼠有效跳躍次數(shù)明顯優(yōu)于J組,存在顯著性差異(P0.05)。(2)HE染色結(jié)果:C組、M組大鼠在第4、6、8周時(shí)跟腱組織形態(tài)結(jié)構(gòu)基本一致,膠原纖維未見(jiàn)紊亂,軟骨細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常;J組大鼠第4周時(shí)可見(jiàn)跟腱膠原纖維排列稍欠規(guī)則,結(jié)構(gòu)稍顯松散;第6周時(shí)出現(xiàn)明顯的病理改變,可見(jiàn)部分膠原纖維斷裂、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及新生毛細(xì)血管長(zhǎng)入;第8周時(shí)腱纖維排列稀疏,出現(xiàn)大面積纖維斷裂情況;外敷鄭氏一號(hào)新傷藥干預(yù)后,JM組大鼠跟腱組織形態(tài)結(jié)構(gòu)與J組存在顯著差別,跟腱組織病理變化明顯改善。(3)TUNEL細(xì)胞凋亡學(xué)結(jié)果:C組與M組大鼠跟腱組織細(xì)胞凋亡指數(shù)不同時(shí)間段無(wú)顯著差異,J組細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯升高,在第4、6、8周與C組、M組、JM組均存在顯著性或非常顯著性差異;外敷鄭氏一號(hào)新傷藥干預(yù)后,JM組細(xì)胞凋亡指數(shù)較J組明顯降低,與C組、M組間無(wú)顯著性差異。(4)Western Blot結(jié)果:J組大鼠跟腱組織GRP78蛋白的表達(dá)在第4周后顯著升高,6周時(shí)達(dá)最高峰,后呈緩慢下降趨勢(shì);eIF2α第4周后呈急劇升高趨勢(shì),且與C組存在非常顯著性差異(P0.01),6周后呈緩慢下降趨勢(shì);CHOP蛋白的表達(dá)自第4周開(kāi)始呈持續(xù)上升趨勢(shì),8周后其表達(dá)量與C組存在顯著性差異(P0.05);外敷鄭氏一號(hào)新傷藥干預(yù)后,JM組大鼠跟腱組織GRP78、eIF2α、CHOP蛋白的表達(dá)相應(yīng)下調(diào),與J組相比各時(shí)間段均有所下降,與C組、M組均無(wú)顯著差異。結(jié)論:(1)鄭氏一號(hào)新傷藥干預(yù)對(duì)大鼠跟腱腱病的形成具有一定的預(yù)防作用。(2)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及其介導(dǎo)的凋亡反應(yīng)參與了大鼠跟腱腱病的過(guò)程,ERS介導(dǎo)了大鼠跟腱腱病的細(xì)胞凋亡,可能是跟腱腱病的發(fā)病機(jī)制之一。(3)外敷鄭氏一號(hào)新傷藥可明顯下調(diào)大鼠跟腱組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78、eIF2α、CHOP的表達(dá),有效調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-凋亡反應(yīng),抑制腱細(xì)胞凋亡,從而發(fā)揮了預(yù)防跟腱腱病的作用。
【學(xué)位授予單位】：成都體育學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

UPR信號(hào)通路介導(dǎo)的ERS［87］

圖 2 ERS 誘導(dǎo)的促凋亡途徑[101]（1）CHOP 介導(dǎo)的凋亡通路轉(zhuǎn) 錄 因 子 CHOP ， 又 被 稱 為 生 長(zhǎng) 停 滯 及 DNA 損 傷 誘 導(dǎo) 基 因 153（growth-arrest-and DNA-damage-inducibie gene 153，GADD153），是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

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7 喻堅(jiān)，袁s

本文編號(hào)：2738834