發(fā)布時(shí)間：2020-07-01 14:54

【摘要】：本論文以大花還亮草、毛序船苞翠雀花、多根烏頭和林地烏頭中二萜生物堿為研究對(duì)象,通過(guò)正、反相硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠柱色譜以及重結(jié)晶等分離技術(shù),對(duì)上述四種植物中的二萜生物堿成分進(jìn)行分離和純化,并對(duì)分離得到的化合物采用1D和2DNMR、UPLC-MS、IR、X-ray等多種分析技術(shù)進(jìn)行表征。從4種植物中共得到77個(gè)化合物,其中有17個(gè)為新化合物,并有1個(gè)為C20的新骨架化合物。為系統(tǒng)研究具有不同結(jié)構(gòu)單元的二萜生物堿與生物活性之間的關(guān)系,進(jìn)一步評(píng)價(jià)上述4種植物的藥用價(jià)值,根據(jù)結(jié)構(gòu)相似性的原則,對(duì)其中的一些潛在的具有生物活性的二萜生物堿,采用MTT法研究了其體外抗腫瘤活性。(1)大花還亮草中二蔽生物堿及生物活性研究大花還亮草(Delphinium anthriscifolium var.majus Pamp.)為毛茛科(Rannculaceae)翠雀屬植物,主要分布于我國(guó)貴州、陜西、四川、安徽、湖北等地方,全草可供藥用,有清熱解毒、祛痰止咳的作用。本文首次對(duì)其二萜生物堿成分進(jìn)行系統(tǒng)研究,從中分離并鑒定了 29個(gè)化合物,其中有16個(gè)新化合物:Anthriscifolsine A為Hetisine型C20二萜生物堿的C-11,C-12鍵斷裂異構(gòu)化而形成新骨架化合物;其他15個(gè)新化合物包括 2 個(gè) Hetisine 型 C20 二蔽生物堿:Anthriscifolsine B,Anthriscifolsine C;6 個(gè) lycoctonine型 C19 二蔽生物堿:Anthriscifolrine A,Anthriscifolrine B,Anthriscifolrine C,Anthriscifolrine D,Anthriscifolrine E,Anthriscifolrine F;7 個(gè) ranaconine 型 C18 二蔽生物堿:Anthriscifoltine A,Anthriscifoltine B,Anthriscifoltine C,Anthriscifoltine D,Anthriscifoltine E,Anthriscifoltine F,Anthriscifoltine G。13 個(gè)已知化合物分別為:Nudicaulamine,AnthriscifolmineC,AnthriscifolmineD,Anthriscifolmine I,Hetisine 13-O-acetate,Deoxydelcorine,Anthriscifolcine A,Anthriscifolcine G,Anthriscifolcine C,Anthriscifolcine D,Anthriscifolcine E,Anthriscifolcine F 和 Anthriscifolcine B。結(jié)構(gòu)類型涉及 Hetisine 型及 Hetidine 型 C20 二萜生物堿,lycoctonine型C19二蔽生物堿以及ranaconine型C18二萜生物堿。(新化合物結(jié)構(gòu)附后)為對(duì)大花還亮草所含二萜生物堿的生物活性進(jìn)行評(píng)價(jià),進(jìn)而系統(tǒng)研究具有不同結(jié)構(gòu)單元的二萜生物堿與生物活性之間的關(guān)系,根據(jù)結(jié)構(gòu)相似性的原則,從上述29個(gè)二萜生物堿中選擇了 Anthriscifolrine A,Anthriscifolrine B,Anthriscifolrine C,Anthriscifoltine C,Anthriscifoltine D,Anthriscifoltine E,Anthriscifoltine F,Anthriscifoltine G 8個(gè)生物堿,采用MTT法考察了它們對(duì)體外人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人肺癌H460細(xì)胞和肝癌HepG2細(xì)胞增殖率的影響。結(jié)果表明這8個(gè)二萜生物堿對(duì)3種腫瘤細(xì)胞均無(wú)生物活性。(2)毛果船苞翠雀花中二萜生物堿及生物活性研究毛果船苞翠雀花(Delphiniumnavicular.lasiocarpum)為毛茛科(Rannculaceae)翠雀屬植物,主要分布于我國(guó)新疆鞏留至托里一帶,海拔1600-1700米間的山地云杉林下、灌叢或河岸邊。本文首次對(duì)其所含二萜生物堿進(jìn)行了系統(tǒng)研究,從中分離并鑒定出23個(gè)化合物,其中有1個(gè)新化合物,命名為Navicularine。22個(gè)已知化合物分別為:Delcorine,Deoxydelcorine,Hypaconitine,Elasine,Deltaline,Delcoridine,6-dehydrodelcorine,Iliensine B,Aconitine,Nudicaulamine,DelavaineA,DelavaineB,Lappaconitine,Uraphine,lycoctonine,Dictyocarpine,Methyllycaconitine,Swatinine B,Delsemine A,Delsemine B,Shawurensine,Iliensine A。涉及 3 種結(jié)構(gòu)類型,其中Lappaconitine 為 lappaconine 型 C18 二萜生物堿,Hypaconitine 和 Aconitine 為 aconitine型C19二萜生物堿,其他均為lycoctonine型C19二萜生物堿。(新化合物結(jié)構(gòu)附后)為對(duì)船苞翠雀花所含二萜生物堿的生物活性進(jìn)行評(píng)價(jià),進(jìn)而系統(tǒng)研究具有不同結(jié)構(gòu)單元的二萜生物堿與生物活性之間的關(guān)系,根據(jù)結(jié)構(gòu)相似性的原則,從上述23個(gè)二蔽生物堿中選擇了 Delcorine,Deltaline,Delcoridine,Delavaine A,Delavaine B,Dictyocarpine,Delsemine A和Delsemine B等8個(gè)生物堿,采用MTT法考察了它們對(duì)體外人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人肺癌H460細(xì)胞和肝癌HepG2細(xì)胞增殖率的影響。結(jié)果表明8個(gè)二萜生物堿對(duì)這3種腫瘤細(xì)胞均無(wú)生物活性。(3)多根烏頭中二萜生物堿及生物活性研究多根烏頭(Aconitum karakolicum Rapaics)為毛茛科(Rannculaceae)烏頭屬烏頭亞屬準(zhǔn)噶爾烏頭系植物,在中國(guó)新疆、哈薩克斯坦均有分布,且資源豐富。據(jù)新疆中草藥手冊(cè)記載其塊根有劇毒,炮制可供藥用,廣泛應(yīng)用于散風(fēng)寒、除濕、止痛等方面,在治療風(fēng)濕類疾病方面具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。本文對(duì)其二萜生物堿成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究,從中分離并鑒定了 15個(gè)化合物,均為已知化合物,分別為:Aconitine,3-Deoxyaconitine,Neoline,16-Epipyroaconine,Indaconitine,8-Omethylpicraconitine,Spicatine A,15-a-Hydroxyneoline,Taurenine,Benzoylaconine,14-Benzoylaconine-8-palmitate,Lappaconitine,Beiwudine,13-Hydroxyfranchetine,8-O-linoleoyl-14-benzoylaconine。運(yùn)用 MTT 法,考察 6 個(gè)二蔽生物堿:Spicatine A,Benzoylaconine,14-Benzoylaconine-8-palmitate,Lappaconitine,Talatisamine 和 14-O-acetyltalasamine 對(duì)體外人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人肺癌H460細(xì)胞和肝癌HepG2細(xì)胞增殖的影響,研究結(jié)果表明,上述6種二蔽生物堿中,僅14-Benzoylaconine-8-palmitate(11)對(duì)三種腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出一定的生物活性,IC50值分別為11.9,27.6以及31.8μM(IC50100μM,n=3)。(4)林地烏頭中二蔽生物堿及生物活性研究林地烏頭(AconitumnemorumPopov)為毛茛科(Rannculaceae)烏頭屬烏頭亞屬準(zhǔn)噶爾烏頭系植物,在我國(guó)新疆及哈薩克斯坦均有分布。本研究首次對(duì)其所含二萜生物堿展開系統(tǒng)的研究,從中分離并鑒定了 10個(gè)化合物,均為已知化合物,分別為:Talatisamine,14-O-acetyltalasamine,Cammaconine,16-epipyroaconine,Aconitine,3-Deoxyaconitine,Lycoctonine,Methyllycaconitine,Delsemine A,DelsemineB。結(jié)構(gòu)類型包括aconitine型二蔽生物堿以及l(fā)ycoctonine型二蔽生物堿。該研究不但豐富了該植物的化學(xué)成分庫(kù),還為植物分類學(xué)提供了化學(xué)成分依據(jù),對(duì)于指導(dǎo)植物分類具有重要意義。運(yùn)用MTT法,以Docetaxel為對(duì)照,考察了 5個(gè)生物堿:Cammaconine,Aconitine,3-deoxyaconitine,Spicatine A,Lappaconitine對(duì)體外培養(yǎng)的人前列腺癌細(xì)胞CP-3細(xì)胞增殖的影響,研究結(jié)果表明:只有Spicatine A(IC50=270uM)在有效范圍以內(nèi),其他均無(wú)效(IC50500uM)。但與Docetaxel(IC50 10-50 uM)相比,并沒(méi)有表現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)。
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：O652.6;R284.1
【圖文】：

在ＮＯＥＳＹ圖譜中，山Ｈ－１／ｙ邋和邋Ｈ—３，邐Ｈ－３邋和邋Ｈ－５，Ｈ＿ｌｃ（和邋Ｈ＿１１，Ｈ－ｌ？邋和逡逑Ｈ－２０，Ｈ－丨９和Ｈ－２０等相關(guān)，可以證明Ｈ－３是ｐ－構(gòu)型，而Ｈ—１９是ａ－構(gòu)型（圖２－５）。逡逑

第２２頁(yè)邐西南交通大學(xué)博士研究生學(xué)位論文邐逡逑而Ｈ－２的ＮＯＥＳＹ相關(guān)表明其處于ｅ鍵狀態(tài)，同樣為（３－構(gòu)型。此外，通過(guò)Ｘ－射線單晶逡逑衍射實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步確證了其絕對(duì)構(gòu)型為Ｈ－２ｐ，Ｈ－３Ｐ，Ｈ－ｌｌａ，Ｈ＿１９ｃｔ（１９－ｓ）（圖２－６），逡逑這一結(jié)果與通過(guò)ＮＯＥＳＹ相關(guān)看到的一致，從而確定了化合物１的結(jié)構(gòu)如圖２－４所示。逡逑Ａｎｔｈｒｉｓｃｉｆｏｌｓｉｎｅ邋Ａ邋（１）的生源衍化途徑可能如圖２－８所示。醛Ａ是由己知化合物逡逑ＡｎｔｈｒｉｓｃｉｆｏｌｍｉｎｅＣ（１８）通過(guò)一步關(guān)鍵的ｒｅｔｒｏ－ａｌｄｏｌ反應(yīng)使Ｃ１１－Ｃ１２鍵發(fā)生斷裂，然后中逡逑間體Ａ通過(guò)質(zhì)子轉(zhuǎn)移并在Ｃ－９上發(fā)生差向異構(gòu)化，從而最終形成Ａｎｔｈｒｉｓｃｉｆｏｌｓｉｎｅ邋Ａ邋（１）。逡逑ＡｎｔｈｒｉｓｃｉｆｏｌｍｉｎｅＣ也同樣從本植物當(dāng)中分禹得到，并且其結(jié)構(gòu)已通過(guò)Ｘ－射線衍射技術(shù)逡逑進(jìn)行了確認(rèn)（圖２－７）。逡逑

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 何雋;邵倩;付茂潔;艾洪蓮;;大花還亮草中的黃酮類化合物[J];中南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2018年02期

2 黃明江;鄭敬剛;董東平;王云;;王屋山南坡青岡(Cyclobalanopsis glauca)分布特征[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年24期

3 八子;;春季尋花[J];人與自然;2018年07期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 單連海;四種國(guó)產(chǎn)草烏大花還亮草、毛果船苞翠雀花、多根烏頭、林地烏頭生物堿成分研究[D];西南交通大學(xué);2017年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 朱秀;抗禽傳染性支氣管炎病毒活性植物的篩選及其作用機(jī)制初探[D];長(zhǎng)江大學(xué);2016年

2 吳曉莉;人工濕地植物篩選及其對(duì)畜禽養(yǎng)殖廢水的凈化研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2736909