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基于mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的補(bǔ)陽(yáng)還五湯拮抗肺纖維化機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-03-20 20:17
【摘要】:目的:基于促纖維化生成的重要通路蛋白mTOR探討補(bǔ)陽(yáng)還五湯拮抗博來(lái)霉素致大鼠肺纖維化的作用機(jī)制。方法:1.采用體重200±20g的SD雄性大鼠144只隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、強(qiáng)的松組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯高、中、低劑量組,每組24只。除空白組外其余各組均采用一次性氣管注射博來(lái)霉素法誘導(dǎo)肺纖維化模型。造模后24h給予相應(yīng)藥物,各組分別于第7、28天隨機(jī)抽取8只大鼠進(jìn)行股動(dòng)脈放血處死,收集支氣管肺泡灌洗液(Broncho alveolar fluid,BALF)和肺組織,采用HE、Masson染色法觀察肺組織肺泡炎、纖維化程度,免疫組化染色法(鏈霉素親和素一過(guò)氧化物酶,SABC法)檢測(cè)肺組織切片mTOR蛋白的分布及表達(dá)。結(jié)果:1.一般情況:空白組大鼠外形肥碩,反應(yīng)靈敏,毛發(fā)柔順有光澤,食欲食量正常。模型組大鼠表現(xiàn)出精神不振,目光呆滯,反應(yīng)敏捷度下降,呼吸急促,部分小鼠倦臥少動(dòng)甚至不動(dòng),毛發(fā)粗糙枯萎,食量減少較明顯,形體消瘦。其余各給藥組大鼠精神較好,反應(yīng)靈敏,呼吸節(jié)奏、頻率正常,毛發(fā)光澤潤(rùn)滑。其活動(dòng)能力、進(jìn)食量下降等程度隨著時(shí)間均有一定的改善。2.病理形態(tài)學(xué):(1)HE染色:空白對(duì)照組大鼠肺組織正常未見有明顯的病變形態(tài),;與空白對(duì)照組比較,模型組大鼠的肺泡結(jié)構(gòu)有破壞,發(fā)現(xiàn)大量炎性細(xì)胞及增殖的膠原纖維;同模型組對(duì)照,在不同時(shí)間點(diǎn)各給藥組的肺泡炎癥及肺纖維化程度都出現(xiàn)一定程度的改善。(2)Masson染色空白組組大鼠在支氣管壁發(fā)現(xiàn)的膠原層較稀薄,肺泡區(qū)僅發(fā)現(xiàn)較少藍(lán)色膠原纖維。模型組大鼠第7d肺泡出現(xiàn)明顯增厚,在支氣管壁、肺泡間隔均都發(fā)現(xiàn)有藍(lán)色的膠原纖維;第28d在細(xì)支氣管、纖維化實(shí)變區(qū)發(fā)現(xiàn)大量藍(lán)色膠原纖維,出現(xiàn)彌漫性的肺纖維化。強(qiáng)的松組同補(bǔ)陽(yáng)還五湯各劑量組都使肺纖維化程度得到改善。3.mTOR的含量:空白組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)之間比較無(wú)明顯差異(P0.05),說(shuō)明空白組大鼠肺組織內(nèi)有一定量的mTOR蛋白的表達(dá)。各時(shí)間點(diǎn)模型組肺組織中mTOR的表達(dá)較空白組明顯增多(P0.05),說(shuō)明博來(lái)霉素氣管滴注誘導(dǎo)的肺損傷具有引起mTOR在肺組織內(nèi)過(guò)度表達(dá)的作用;與模型組相比,各時(shí)間點(diǎn)強(qiáng)的松組和補(bǔ)陽(yáng)還五湯各劑量組大鼠肺組織中mTOR的表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05);說(shuō)明補(bǔ)陽(yáng)還五湯與強(qiáng)的松均有抑制mTOR蛋白表達(dá)的作用;與強(qiáng)的松組比較,補(bǔ)陽(yáng)還五湯高劑量組有明顯差異(P0.05),說(shuō)明補(bǔ)陽(yáng)還五湯高劑量組在抑制mTOR表達(dá)方面優(yōu)于強(qiáng)的松組;補(bǔ)陽(yáng)還五湯高劑量組分別與低中劑量組相比有明顯差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論:肺纖維化病程中成纖維細(xì)胞的增生伴隨著mTOR信號(hào)通路的過(guò)度活化。補(bǔ)陽(yáng)還五湯可以有效的抑制mTOR的過(guò)度活化,從而起到干預(yù)肺纖維化的作用。
【圖文】:

HE染色,低劑量,陽(yáng)性對(duì)照,空白


28d各組大鼠肺組織病理學(xué)改變(HE染色,100)

低劑量,陽(yáng)性對(duì)照,空白


7d各組大鼠肺組織病理學(xué)改變(Masson染色,100)
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2592141


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