攜帶miR-27a的外泌體介導(dǎo)的電離輻射旁效應(yīng)對(duì)皮膚傷口愈合的影響及其機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間：2020-12-03 07:00
目的:急性放射性皮膚損傷的癥狀包括紅斑、脫發(fā)、干燥脫屑和色素沉著,皮膚損傷嚴(yán)重程度與輻射劑量、劑量率、皮膚厚度以及射線品質(zhì)有關(guān)。換句話說(shuō),在同樣的物理照射劑量下,不同射線品質(zhì)的輻射對(duì)同一個(gè)體將造成不同程度的皮膚損傷。一般認(rèn)為自然發(fā)生的α粒子由于穿透力弱不能穿透人的皮膚表皮層,只有當(dāng)其照射劑量達(dá)幾百格瑞才可使皮膚出現(xiàn)紅斑等明顯的損傷,但是目前鮮少有文獻(xiàn)可以證明低劑量α粒子照射不會(huì)對(duì)皮膚造成任何損傷。正因?yàn)棣亮Ｗ由涑潭?根據(jù)放射生物學(xué)傳統(tǒng)的靶理論,低劑量外照射僅會(huì)傷及皮膚表面角質(zhì)層,而不會(huì)影響對(duì)皮膚損傷修復(fù)具有重要作用的真皮層成纖維細(xì)胞。然而由于可能存在電離輻射旁效應(yīng),低劑量α粒子照射也有可能通過(guò)旁效應(yīng)信號(hào)影響真皮層,從而對(duì)皮膚修復(fù)功能造成損傷。已有研究結(jié)果提示,電離輻射旁效應(yīng)可能在輻射的健康危害和腫瘤放療的效率及副作用中具有重要作用。因此明確電離輻射旁效應(yīng)在皮膚傷口愈合過(guò)程中的作用及其發(fā)生機(jī)制對(duì)降低輻射對(duì)正常細(xì)胞組織的危害具有重要現(xiàn)實(shí)意義。方法:本研究第一部分采用直接照射法和共培養(yǎng)法處理BALB/c小鼠背部皮膚,通過(guò)肉眼和皮膚石蠟切片HE染色觀察其表觀形態(tài)、通過(guò)游標(biāo)卡尺測(cè)量傷口大小反映其...
【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
電離輻射旁效應(yīng)大事記大量的研究提示[26,50,55]
圖 1.1 活體共培養(yǎng)模型。、Western Blot 檢測(cè)受照小鼠皮膚γH2AX表達(dá)水平射后 30 min 小鼠皮膚置于凍存管內(nèi)液氮速凍；適量強(qiáng)效裂解液（RIPA 強(qiáng)效裂解液、1% PMSF），冰上超聲至皮；00 g、4 ℃，離心 10 min，取上清，用 BCA 試劑盒測(cè)蛋白濃度，多（Synergy 2，美國(guó) BIO-TEK 公司）測(cè)量吸收光，波長(zhǎng) 562 nm；相應(yīng)體積的 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液，混合均勻，95 ℃變性 5 m12% SDS-PAGE 80 V 恒壓電泳分離蛋白，濕法穩(wěn)流（200 mA）轉(zhuǎn)膜60 min；TBST 清洗膜 4 次，每次 5 min，3% BSA 室溫封閉 1 h；（anti-γH2AX）孵育膜 4 ℃過(guò)夜，TBST 清洗膜 4 次，每次 10 m（HRP-anti-rabbit，碧云天，中國(guó)）室溫孵育膜 1 h，TBST 清洗膜
實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、α粒子直接照射對(duì)小鼠皮膚傷口愈合的影響γH2AX 被廣泛用作 DNA 損傷的生物標(biāo)記物。如圖 1.2 所示，小鼠皮膚在受到 0.56 Gy 的α粒子照射后 30 min，其γH2AX 表達(dá)水平與未照射組相比出現(xiàn)顯著增加，證實(shí)照射是成功的。然而受照小鼠皮膚直到第十天也并未出現(xiàn)肉眼可見的改變；這與文獻(xiàn)報(bào)道[1]的一致。那么這樣的α粒子劑量是否對(duì)皮膚沒(méi)有任何影響呢？本研究發(fā)現(xiàn)小鼠受照區(qū)域的傷口愈合速度相比對(duì)照組明顯減慢，如圖 1.3，傷口制造后第三天和第七天，照射組傷口面積顯著大于未照射組；到了第十天，照射組傷口愈合減慢趨勢(shì)依然存在，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外研究還發(fā)現(xiàn)，傷口制造后第十天，皮膚已基本愈合，但是照射組愈合皮膚表皮層明顯比未照射組厚，這也是照射組皮膚愈合更差的一個(gè)佐證。也就是說(shuō)，雖然照射后小鼠皮膚沒(méi)有出現(xiàn)肉眼可見的損傷，但實(shí)際上其生物學(xué)功能已經(jīng)發(fā)生了一定程度的改變。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外泌體—電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的另一種機(jī)制[J]. 陳纖,蔣友芹,尹曉明,田文倩,王敬東,楊紅英. 輻射研究與輻射工藝學(xué)報(bào). 2014(03)
[2]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2011(04)
本文編號(hào)：2896166
【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
電離輻射旁效應(yīng)大事記大量的研究提示[26,50,55]
圖 1.1 活體共培養(yǎng)模型。、Western Blot 檢測(cè)受照小鼠皮膚γH2AX表達(dá)水平射后 30 min 小鼠皮膚置于凍存管內(nèi)液氮速凍；適量強(qiáng)效裂解液（RIPA 強(qiáng)效裂解液、1% PMSF），冰上超聲至皮；00 g、4 ℃，離心 10 min，取上清，用 BCA 試劑盒測(cè)蛋白濃度，多（Synergy 2，美國(guó) BIO-TEK 公司）測(cè)量吸收光，波長(zhǎng) 562 nm；相應(yīng)體積的 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液，混合均勻，95 ℃變性 5 m12% SDS-PAGE 80 V 恒壓電泳分離蛋白，濕法穩(wěn)流（200 mA）轉(zhuǎn)膜60 min；TBST 清洗膜 4 次，每次 5 min，3% BSA 室溫封閉 1 h；（anti-γH2AX）孵育膜 4 ℃過(guò)夜，TBST 清洗膜 4 次，每次 10 m（HRP-anti-rabbit，碧云天，中國(guó)）室溫孵育膜 1 h，TBST 清洗膜
實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、α粒子直接照射對(duì)小鼠皮膚傷口愈合的影響γH2AX 被廣泛用作 DNA 損傷的生物標(biāo)記物。如圖 1.2 所示，小鼠皮膚在受到 0.56 Gy 的α粒子照射后 30 min，其γH2AX 表達(dá)水平與未照射組相比出現(xiàn)顯著增加，證實(shí)照射是成功的。然而受照小鼠皮膚直到第十天也并未出現(xiàn)肉眼可見的改變；這與文獻(xiàn)報(bào)道[1]的一致。那么這樣的α粒子劑量是否對(duì)皮膚沒(méi)有任何影響呢？本研究發(fā)現(xiàn)小鼠受照區(qū)域的傷口愈合速度相比對(duì)照組明顯減慢，如圖 1.3，傷口制造后第三天和第七天，照射組傷口面積顯著大于未照射組；到了第十天，照射組傷口愈合減慢趨勢(shì)依然存在，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外研究還發(fā)現(xiàn)，傷口制造后第十天，皮膚已基本愈合，但是照射組愈合皮膚表皮層明顯比未照射組厚，這也是照射組皮膚愈合更差的一個(gè)佐證。也就是說(shuō)，雖然照射后小鼠皮膚沒(méi)有出現(xiàn)肉眼可見的損傷，但實(shí)際上其生物學(xué)功能已經(jīng)發(fā)生了一定程度的改變。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外泌體—電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的另一種機(jī)制[J]. 陳纖,蔣友芹,尹曉明,田文倩,王敬東,楊紅英. 輻射研究與輻射工藝學(xué)報(bào). 2014(03)
[2]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2011(04)
本文編號(hào)：2896166
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