HDAC6在炭黑顆粒致人支氣管上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用
發(fā)布時(shí)間:2020-12-02 11:37
目的:探討組蛋白去乙酰化酶6在炭黑顆粒誘導(dǎo)支氣管上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用。方法:體外培養(yǎng)人支氣管上皮細(xì)胞(16HBE),以細(xì)胞空白為對(duì)照組,分別用12.5、25、50、100μg/ml濃度的炭黑顆粒(Printex90)染毒細(xì)胞12、24、36、48 h后,采用Cell Counting Kit-8法(CCK-8)檢測(cè)細(xì)胞活力確定染毒時(shí)間。采用HDAC6siRNA預(yù)處理16HBE細(xì)胞,將實(shí)驗(yàn)分為六組,細(xì)胞空白對(duì)照組、25μg/ml炭黑顆粒組、50μg/ml炭黑顆粒組、HDAC6 siRNA干擾空白組、25μg/ml炭黑顆粒+HDAC6 siRNA干擾組、50μg/ml炭黑顆粒+HDAC6 siRNA干擾組,染毒24 h后,收集染毒細(xì)胞和上清液,采用RT-PCR檢測(cè)HDAC6基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平,WB檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HDAC6、纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白IFT88和自噬體蛋白LC3-Ⅱ等蛋白表達(dá)水平,ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液中IL-8、IL-1β、TNF-α、IL-6、TGF-β1和IL-17A等炎性細(xì)胞因子的釋放量。結(jié)果:(1)在染毒各個(gè)時(shí)間點(diǎn),炭黑顆粒染毒16HBE細(xì)胞后可導(dǎo)致細(xì)胞活力明顯下降,隨...
【文章來(lái)源】:武漢科技大學(xué)湖北省
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮寫(xiě)
摘要
Abstract
第1章 前言
第2章 炭黑顆粒對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞HDAC6、自噬水平及炎癥反應(yīng)的影響
2.1 材料與方法
2.1.1 主要儀器
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要試劑配制
2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
2.2 結(jié)果
2.2.l 不同濃度和時(shí)間的炭黑顆粒對(duì)16HBE細(xì)胞存活率的影響
2.2.2 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE細(xì)胞內(nèi)HDAC6mRNA表達(dá)的影響
2.2.3 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE細(xì)胞內(nèi)HDAC6蛋白表達(dá)的影響
2.2.4 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE細(xì)胞內(nèi)IFT88蛋白表達(dá)的影響
2.2.5 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE內(nèi)細(xì)胞自噬體蛋白LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)的影響
2.2.6 炭黑顆粒染毒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞表達(dá)炎性細(xì)胞因子的水平
2.3 討論
第3章 HDAC6在炭黑顆粒致人支氣管上皮細(xì)胞自噬及炎癥反應(yīng)中的調(diào)控作用
3.1 材料與方法
3.1.1 主要儀器
3.1.2 主要試劑配制
3.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放HDAC6mRNA表達(dá)的影響
3.2.2 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放HDAC6蛋白表達(dá)的影響
3.2.3 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放IFT88蛋白表達(dá)的影響
3.2.4 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)的影響
3.2.5 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放各因子水平的影響
3.3 討論
第4章 結(jié)論
第5章 結(jié)語(yǔ)與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述:纖毛異常在呼吸道疾病發(fā)生過(guò)程中的作用
參考文獻(xiàn)
附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]組蛋白去乙;6及其選擇性抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 劉婷,亓云鵬,宋云龍. 藥學(xué)進(jìn)展. 2016(11)
[2]氧化應(yīng)激與自噬[J]. 吳艷萍,王陽(yáng),李雅麗,曹雪芳,李衛(wèi)芬. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(09)
[3]吸入染毒納米級(jí)炭黑氣溶膠致小鼠肺炎性損傷的研究[J]. 李園園,高峰,解秋艷,牛勇,孟濤,張榮,陳雯,鄭玉新. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2014 (12)
[4]Role of the tissue microenvironment as a therapeutic target in hepatocellular carcinoma[J]. Bhavna Rani,Yuan Cao,Andrea Malfettone,Ciprian Tomuleasa,Isabel Fabregat,Gianluigi Giannelli. World Journal of Gastroenterology. 2014(15)
[5]IL-17和TGF-β1在支氣管哮喘患兒血清及支氣管肺泡灌洗液中的變化及臨床意義[J]. 蔣鯤,陳和斌,王瑩,林家惠,胡艷,方玉蓉. 中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2013(08)
[6]TGF-β對(duì)創(chuàng)傷愈合與瘢痕形成的影響及中藥的干預(yù)作用[J]. 張愛(ài)軍,閆志勇. 西北藥學(xué)雜志. 2013(01)
[7]衣藻、纖毛與“纖毛相關(guān)疾病”[J]. 潘俊敏. 中國(guó)科學(xué)(C輯:生命科學(xué)). 2008(05)
碩士論文
[1]28天吸入染毒納米級(jí)炭黑氣溶膠致小鼠肺組織損傷及細(xì)胞凋亡損傷機(jī)制研究[D]. 楊墨.山西醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]PM2.5對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞毒性作用的初步研究[D]. 丁曉潔.南京醫(yī)科大學(xué) 2014
[3]HDAC6 mRNA在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[D]. 張峰.泰山醫(yī)學(xué)院 2013
本文編號(hào):2895238
【文章來(lái)源】:武漢科技大學(xué)湖北省
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮寫(xiě)
摘要
Abstract
第1章 前言
第2章 炭黑顆粒對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞HDAC6、自噬水平及炎癥反應(yīng)的影響
2.1 材料與方法
2.1.1 主要儀器
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要試劑配制
2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
2.2 結(jié)果
2.2.l 不同濃度和時(shí)間的炭黑顆粒對(duì)16HBE細(xì)胞存活率的影響
2.2.2 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE細(xì)胞內(nèi)HDAC6mRNA表達(dá)的影響
2.2.3 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE細(xì)胞內(nèi)HDAC6蛋白表達(dá)的影響
2.2.4 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE細(xì)胞內(nèi)IFT88蛋白表達(dá)的影響
2.2.5 炭黑顆粒染毒對(duì)16HBE內(nèi)細(xì)胞自噬體蛋白LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)的影響
2.2.6 炭黑顆粒染毒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞表達(dá)炎性細(xì)胞因子的水平
2.3 討論
第3章 HDAC6在炭黑顆粒致人支氣管上皮細(xì)胞自噬及炎癥反應(yīng)中的調(diào)控作用
3.1 材料與方法
3.1.1 主要儀器
3.1.2 主要試劑配制
3.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
3.2 結(jié)果
3.2.1 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放HDAC6mRNA表達(dá)的影響
3.2.2 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放HDAC6蛋白表達(dá)的影響
3.2.3 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放IFT88蛋白表達(dá)的影響
3.2.4 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放LC3-Ⅱ蛋白表達(dá)的影響
3.2.5 HDAC6siRNA對(duì)炭黑顆粒誘導(dǎo)16HBE細(xì)胞釋放各因子水平的影響
3.3 討論
第4章 結(jié)論
第5章 結(jié)語(yǔ)與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述:纖毛異常在呼吸道疾病發(fā)生過(guò)程中的作用
參考文獻(xiàn)
附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]組蛋白去乙;6及其選擇性抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 劉婷,亓云鵬,宋云龍. 藥學(xué)進(jìn)展. 2016(11)
[2]氧化應(yīng)激與自噬[J]. 吳艷萍,王陽(yáng),李雅麗,曹雪芳,李衛(wèi)芬. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(09)
[3]吸入染毒納米級(jí)炭黑氣溶膠致小鼠肺炎性損傷的研究[J]. 李園園,高峰,解秋艷,牛勇,孟濤,張榮,陳雯,鄭玉新. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2014 (12)
[4]Role of the tissue microenvironment as a therapeutic target in hepatocellular carcinoma[J]. Bhavna Rani,Yuan Cao,Andrea Malfettone,Ciprian Tomuleasa,Isabel Fabregat,Gianluigi Giannelli. World Journal of Gastroenterology. 2014(15)
[5]IL-17和TGF-β1在支氣管哮喘患兒血清及支氣管肺泡灌洗液中的變化及臨床意義[J]. 蔣鯤,陳和斌,王瑩,林家惠,胡艷,方玉蓉. 中國(guó)當(dāng)代兒科雜志. 2013(08)
[6]TGF-β對(duì)創(chuàng)傷愈合與瘢痕形成的影響及中藥的干預(yù)作用[J]. 張愛(ài)軍,閆志勇. 西北藥學(xué)雜志. 2013(01)
[7]衣藻、纖毛與“纖毛相關(guān)疾病”[J]. 潘俊敏. 中國(guó)科學(xué)(C輯:生命科學(xué)). 2008(05)
碩士論文
[1]28天吸入染毒納米級(jí)炭黑氣溶膠致小鼠肺組織損傷及細(xì)胞凋亡損傷機(jī)制研究[D]. 楊墨.山西醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]PM2.5對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞毒性作用的初步研究[D]. 丁曉潔.南京醫(yī)科大學(xué) 2014
[3]HDAC6 mRNA在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[D]. 張峰.泰山醫(yī)學(xué)院 2013
本文編號(hào):2895238
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