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FADS基因簇與乳母膳食對乳汁中脂肪酸成分的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2020-11-01 08:48
   母乳又被譽為“白色血液”,由身體健康且營養(yǎng)狀態(tài)好的母親分泌的乳汁,富含各類營養(yǎng)素,是保障足月出生嬰兒健康生長及發(fā)育的最理想食物來源。脂肪和脂肪酸被認(rèn)為是提供嬰兒能量和營養(yǎng)的重要化合物,乳汁中的脂肪酸是促進(jìn)嬰兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的主要物質(zhì)來源,尤其是多不飽和脂肪酸,在嬰兒生長發(fā)育中發(fā)揮的作用已獲得廣泛認(rèn)可。母乳中脂肪酸成分的多寡可能受到乳母膳食與基因的共同影響,對于日常膳食攝入較少魚類的內(nèi)陸地區(qū)乳母,FADS基因編碼的Δ-5和Δ-6去飽和酶在體內(nèi)PUFA轉(zhuǎn)化中所發(fā)揮作用可能更為突出,但FADS基因變異對脂肪酸狀態(tài)的影響以及FADS基因簇中的很多功能性SNP均未被鑒定,且未有研究報道母乳中的FADS基因表達(dá)情況與脂肪酸間的關(guān)聯(lián)。關(guān)于膳食對母乳脂肪酸影響的研究目前主要集中于單一的膳食和補充劑攝入,但由于日常生活中人們不只攝取一種營養(yǎng)素或食物,而是從各種類型的食物中攝取大量營養(yǎng)素,并且已經(jīng)形成了固定習(xí)慣的飲食模式,但關(guān)于膳食模式與乳汁FA構(gòu)成譜的研究很少。本研究收集了長春地區(qū)的哺乳期女性的乳汁樣本,探討了FADS基因簇的SNP與母乳PUFA水平的關(guān)系;運用膳食模式來探索膳食攝入與母乳FA之間的關(guān)系;建立了檢測母乳FADS基因表達(dá)的體系,分析了母乳的PUFA水平在不同F(xiàn)ADS基因表達(dá)組的差異性。本研究包括了以下三個部分內(nèi)容:第一部分:FADS基因簇與乳汁脂肪酸目的:明確FADS基因簇的rs174547、rs174553、rs174602、rs3834458和rs1000778位點與母乳PUFA水平的關(guān)系。方法:收集2012年3月至2014年12月在長春市某產(chǎn)后護(hù)理中心的420名產(chǎn)后22-25天的哺乳期女性,均簽署了知情同意書,且提供完善的問卷和足夠的母乳。運用氣相色譜檢測母乳中的8種PUFA水平,提取母乳中的DNA并運用Sequenom MassArray系統(tǒng)進(jìn)行FADS基因簇上的5個SNP分型。使用SPSS24.0軟件分析研究對象的基本信息及母乳中的8種PUFA水平;使用SNPstats在線分析軟件分析FADS基因的5個SNP與乳汁PUFA水平間的關(guān)系。結(jié)果:1.母乳中的LA、ALA、DGLA、EPA、DTA和DHA水平與年齡呈正相關(guān)(P0.05),LA、ALA、DGLA和DTA與乳母產(chǎn)后BMI相關(guān)(P0.05),未發(fā)現(xiàn)母乳PUFA水平與膳食來源PUFA的相關(guān)性(P0.05)。2.研究納入的5個位點的檢出率最低的為rs174547(96.19%),其他位點的檢出率均位于97%以上;Hardy-Weinberg檢驗的P值最小的為0.30,均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡。3.母乳的LA、ALA和DHA水平和在各位點的不同遺傳模式組中無差異性(P0.05)。4.母乳GLA和AA水平與FADS1基因的rs174547位點、rs174553位點和FADS2基因的rs3834458位點、rs174602位點有關(guān);rs174547、rs174553和rs3834458位點的最優(yōu)模式為共顯性模式,rs174602位點最優(yōu)遺傳模式為顯性模式。5.母乳DGLA水平與FADS1基因的rs174547位點和FADS2基因的rs3834458位點有關(guān);前者的最優(yōu)遺傳模式為顯性模式,后者的最優(yōu)遺傳模式為隱性模式。6.母乳EPA水平與FADS1基因的rs174547位點、FADS2基因的rs3834458位點、rs174602位點有關(guān),最優(yōu)遺傳模式為顯性模式;與FADS3基因的rs1000778位點也有關(guān),最優(yōu)遺傳模式為隱性模式。7.母乳DTA水平與FADS1基因的rs174547位點、rs174553位點、FADS2基因的rs3834458位點有關(guān),這3個SNP位點的最優(yōu)模式均為隱性模式。結(jié)論:1.母乳PUFA水平與乳母的年齡和產(chǎn)后BMI相關(guān),與膳食中的PUFA無關(guān)。2.母乳中的GLA、DGLA、AA和DTA水平與FADS1和FADS2基因變異有關(guān),母乳中的EPA水平與FADS1、FADS2和FADS3基因的變異有關(guān)。第二部分:膳食模式與乳汁脂肪酸目的:研究膳食模式與哺乳期母親的母乳FA構(gòu)成譜之間的關(guān)系,為哺乳期女性的合理膳食和更好的哺育嬰兒提供科學(xué)依據(jù)。方法:采用橫斷面調(diào)查,從2015年1月開始至2017年6月,招募了長春市274名產(chǎn)后22天到6個月健康的漢族哺乳期女性,收集問卷和乳汁。檢測母乳中的FA構(gòu)成譜,使用主成分分析法將研究對象的膳食情況劃分為不同的膳食模式。運用SPSS24.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析不同膳食模式組乳母的膳食和乳汁FA的構(gòu)成差異。結(jié)果:1.本研究納入的哺乳期女性日常能量攝入的平均水平為1774.36 kcal,占推薦攝入量的77.15%;碳水化合物的平均攝入量為233.76 g/d,蛋白質(zhì)的平均攝入量為67.38 g/d,脂肪的平均攝入量為66.65 g/d,分別占推薦攝入量的70.70%、84.22%和104.31%。2.本研究共劃分為4種膳食模式:模式1是以菌藻類、肉類和水產(chǎn)品為主,模式2是以大豆及其制品、堅果和乳制品為主,模式3以水果和蔬菜為主,模式4是以谷薯類、豆制品和蛋類為主。3.在不同的膳食模式中,乳母日常的能量、碳水化合物、蛋白質(zhì)的平均攝入量以及它們分別與其參考攝入量的比值在四組膳食模式之間的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.014,P=0.004,P=0.002);而乳母的每日脂肪攝入量和比值在四組膳食模式之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.556)。4.乳母日常攝入的鈣、鐵、鋅、銅和鎂在四組膳食模式之間均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.001,P0.001,P=0.021,P0.001,P=0.012);維生素A、維生素B_1、維生素B_2、煙酸和葉酸的攝入量在四組膳食模式之間的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.011,P=0.045,P=0.004,P=0.003,P=0.029),而維生素C和維生素E未顯示差異。5.母乳中的SFA和PUFA的總比例在不同模式間有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.001,P=0.025),n-6 PUFA的比例也顯示有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.038);而乳汁中的MUFA,n-3 PUFA和n-6/n-3在4種膳食模式間的差異未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.母乳的SFA中,C6:0、C10:0、C11:0和C23:0的比例在不同模式間有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.038,P=0.008,P=0.003,P0.001);MUFA中,C15:1(P=0.048)、C18:1n9t(P0.001)和C18:1n9c(P=0.002)表現(xiàn)出差異性;母乳PUFA中,C18:2n6c、C20:2、C20:3n6、C20:4n6和C22:6n3這5種PUFA在不同的膳食模式間顯示有差異性(P=0.002,P=0.043,P0.001,P=0.018,P=0.020)。結(jié)論:1.274名乳母的日常能量攝入量以及碳水化合物和蛋白質(zhì)攝入量的平均水平均低于參考攝入量,而脂肪的平均攝入量高于參考攝入量。2.不同膳食模式間乳母的能量攝入、碳水化合物、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和微量元素攝入量均有所不同。3.膳食模式可影響母乳中的SFA、PUFA和n-6PUFA的含量。第三部分:FADS基因表達(dá)與乳汁脂肪酸目的:探索母乳的PUFA水平在不同F(xiàn)ADS基因表達(dá)組的差異性,為更準(zhǔn)確地研究母乳PUFA水平與FADS基因相關(guān)性提供科學(xué)依據(jù)。方法:研究對象為從2017年1月開始至2017年8月,在長春市某婦幼保健醫(yī)院招募的50名產(chǎn)后42-45天的健康漢族女性,調(diào)查基本信息問卷并收集母乳。檢測乳汁中的8種PUFA,采用Trizol法提取乳汁中的RNA,使用實時定量PCR實驗檢測母乳中的FADS基因mRNA表達(dá)水平;提取乳汁中蛋白并結(jié)合Western blot實驗技術(shù)檢測母乳中FADS基因的蛋白表達(dá)水平。運用SPSS24.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析母乳的PUFA水平在不同F(xiàn)ADS基因mRNA表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平組的差異。結(jié)果:1.本研究乳母的乳汁中AA占總FA的0.8616%,DHA含量為0.2952%。2.母乳中的GLA含量在FADS1基因mRNA表達(dá)水平分組中具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.009),且FADS1基因mRNA表達(dá)水平較高組的母乳GLA含量為0.3606%,高于FADS1基因mRNA表達(dá)水平較低組的0.2869%。3.母乳中的二十碳三烯酸(C20:3n6)含量在FADS1基因mRNA表達(dá)水平分組中具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.042),且FADS1基因mRNA表達(dá)水平較高組的母乳二十碳三烯酸(C20:3n6)含量(0.5088%)高于FADS1基因mRNA表達(dá)水平較低組(0.4363%)。4.母乳中的二十碳三烯酸(C20:3n3)含量在FADS1基因蛋白表達(dá)水平分組中具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.047),且FADS1基因蛋白表達(dá)水平較高組的母乳二十碳三烯酸含量(0.1132%)高于FADS1基因蛋白表達(dá)水平較低組(0.0888%)。5.母乳中EPA含量在FADS3基因蛋白表達(dá)水平分組中具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.040),且FADS3基因蛋白表達(dá)水平較高組的母乳EPA含量(0.1366%)高于FADS3基因蛋白表達(dá)水平較低組(0.1012%)。6.母乳中DHA含量在FADS1基因蛋白表達(dá)水平分組中具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.020),且FADS1基因蛋白表達(dá)水平較高組的母乳DHA含量(0.3228%)高于FADS1基因蛋白表達(dá)水平較低組(0.2526%)。結(jié)論:1.母乳n-6 PUFA中的GLA和二十碳三烯酸(C20:3n6)與FADS1基因的mRNA表達(dá)水平有關(guān)。2.母乳中n-3 PUFA中的二十碳三烯酸(C20:3n3)和DHA與FADS1基因的蛋白表達(dá)水平有關(guān),EPA與FADS3基因的蛋白表達(dá)水平有關(guān)。
【學(xué)位單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R174.4
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
第1章 前言
    1.1 母乳喂養(yǎng)概述
        1.1.1 母乳喂養(yǎng)的現(xiàn)況
        1.1.2 母乳喂養(yǎng)的優(yōu)點
    1.2 母乳的成分概述
        1.2.1 宏量營養(yǎng)素
        1.2.2 微量營養(yǎng)素
        1.2.3 生物活性物質(zhì)
    1.3 脂肪酸的作用
        1.3.1 飽和脂肪酸
        1.3.2 單不飽和脂肪酸
        1.3.3 多不飽和脂肪酸
    1.4 影響PUFAs水平的因素
        1.4.1 膳食攝入
        1.4.2 FADS基因多態(tài)性
    1.5 研究依據(jù)、內(nèi)容和創(chuàng)新點
        1.5.1 研究依據(jù)
        1.5.2 研究內(nèi)容
        1.5.3 創(chuàng)新點
第2章 FADS基因簇與乳汁脂肪酸
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 研究對象
        2.2.2 實驗試劑和儀器
        2.2.3 實驗方法
            2.2.3.1 乳汁收集
            2.2.3.2 基本信息調(diào)查
            2.2.3.3 3d24h膳食調(diào)查
            2.2.3.4 膳食頻率調(diào)查
            2.2.3.5 乳汁PUFA的檢測
            2.2.3.6 FADS基因簇的SNP分型
        2.2.4 數(shù)據(jù)庫建立
        2.2.5 數(shù)據(jù)分析
        2.2.6 技術(shù)路線
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 研究對象的基本情況
        2.3.2 研究對象的膳食營養(yǎng)素攝入量
        2.3.3 母乳PUFA與膳食PUFA
        2.3.4 母乳PUFA與 FADS基因簇的SNP
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第3章 膳食模式與乳汁脂肪酸
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 研究對象
        3.2.2 實驗試劑和儀器
        3.2.3 實驗方法
        3.2.4 數(shù)據(jù)庫建立
        3.2.5 數(shù)據(jù)分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 基本情況
        3.3.2 膳食模式
        3.3.3 乳汁脂肪酸
        3.3.4 膳食模式與乳汁脂肪酸
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第4章 FADS基因表達(dá)與乳汁脂肪酸
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 研究對象
        4.2.2 實驗試劑和儀器
        4.2.3 實驗方法
        4.2.4 數(shù)據(jù)庫建立
        4.2.5 數(shù)據(jù)分析
        4.2.6 技術(shù)路線
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 基本情況
        4.3.2 乳汁PUFA含量
        4.3.3 FADS基因簇表達(dá)情況
        4.3.4 FADS基因的m RNA表達(dá)與母乳PUFA
        4.3.5 FADS基因的蛋白表達(dá)與母乳PUFA
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝

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本文編號:2865303

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