發(fā)布時間：2020-11-20 05:24

　　 瘧疾是世界上最重要的感染性疾病之一。近年來，由于瘧原蟲對抗瘧藥， 特別是氯喹，產(chǎn)生抗藥性并且迅速的擴散，到九十年代，有惡性瘧原蟲分布的 地區(qū)幾乎都有抗氯喹惡性瘧原蟲株的存在。另一方面，由于瘧原蟲抗原的多態(tài) 性和變異以及宿主遺傳背景的限制性，使瘧疾疫苗的研究進(jìn)展很慢。為此，人 們除了繼續(xù)從事瘧疾疫苗的研究外，逐漸把目光轉(zhuǎn)移到尋找預(yù)防發(fā)生重癥瘧 疾、減緩瘧疾病癥、降低瘧疾死亡率的新途徑。伯氏瘧原蟲氯喹抗性（RC） 株是藥物敏感（N）株經(jīng)藥物篩選獲得，N株是致死性蟲株，RC株感染后能自 愈康復(fù)。因此，本研究以該對蟲株作為對象，探索兩者致病力的差異及其機 制。 1．致病力差異： 1）原蟲血癥與體溫和體重的關(guān)系：N株瘧原蟲以1×10_6個感染瘧原蟲紅細(xì)胞／鼠 腹腔接種小鼠后第9天開始出現(xiàn)死亡，第11天全部小鼠死亡，死亡率為100％。 體重（體重／原始體重×％）在感染后的前6天呈上升趨勢，隨后逐漸減輕；體 溫在感染后的前7天維持在37℃左右，隨后逐漸下降，直到死亡。RC株瘧原 蟲以1×10_6個感染瘧原蟲紅細(xì)胞／鼠腹腔接種小鼠后第24天出現(xiàn)死亡，死亡 率為25％，第36天時，絕大多數(shù)感染小鼠原蟲血癥消失。體重（體重／原始體 重×％）在感染后最初16天呈上升趨勢，隨后逐漸減輕。體溫在感染后的前16 天維持在36.5℃左右。在第26～28天時，感染鼠體重降至92.60％± 4.59％（n＝6），體溫也降至29.90±0.58℃（n＝6）。第36天時，體重恢復(fù)至105.00 ±5.80（n＝6），體溫升至36.70±0.24℃（n＝6）。 2）紅細(xì)胞數(shù)、脾重和肝重的差異：N株和RC株瘧原蟲感染后，原蟲血癥分別 達(dá)到64.82±6.65％和63.35±9.66％時，紅細(xì)胞計數(shù)、脾重和肝重占體重的百 分比分別為2.45×10_6／mm_3±1.19×10_6／mm_3，1.71％±0.51％，7.20％±0.49％和 2.01×10_6／mm_3±0.79×10_6／mm_3，4.08％±1.12％，8.68％±1.18％。與正常組的紅 細(xì)胞計數(shù)仿．64 X 10‘／inln3士0．75 X 10fyIYUn勺、脾重占體重的百分比O．53Ol 0刀6叨和肝重占體重的百分比（．23％土0．29叨比較，差異非常顯著（P＜0刀1人 N株感染小鼠與RC株感染小鼠相比，紅細(xì)胞計數(shù)的差異不顯著（P＞0刀5）， 脾重占體重的百分比差異非常顯著o吻刀1），肝重占體重的百分比差異顯著 （＜0刀5）。 3）病理組織學(xué)的動態(tài)變化：N株感染小鼠肝、脾有較多的瘧色素沉著，肺臟 呈郁血性水腫。腦微血管充血和阻塞。感染瘧原蟲紅細(xì)胞在腦、心、肺等器官 小靜脈和毛細(xì)血管內(nèi)滯留，各臟器呈急性炎癥的病理變化特點。RC株感染小 鼠肝、脾臟的病理組織學(xué)改變與原蟲血癥的變化有關(guān)。肺臟呈間質(zhì)性肺炎，各 臟器呈慢性增生性炎癥的病理變化特點。 4）超微結(jié)構(gòu)的病理變化：N株感染后期小鼠腦部微血管含有較多的感染瘧原蟲 紅細(xì)胞和紅細(xì)胞，呈堵塞狀態(tài)，肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有多個突起與感染瘧原蟲 紅細(xì)胞相接觸。較多的肝、腎、肺實質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)膜破潰，胞質(zhì)流失，線粒體腫 脹等不可逆的壞死性病變。RC株感染后期鼠肝、腎實質(zhì)細(xì)胞的病變以線粒體 腫脹為主的變性�？梢姼闻K部分變性肝細(xì)胞出現(xiàn)恢復(fù)狀態(tài)，腎小球毛細(xì)血管內(nèi) 皮細(xì)胞下、基膜、系膜區(qū)可見電子致密物沉著，肺臟的肺泡隔內(nèi)可見較多的淋 巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜中性白細(xì)胞。 2．伯氏瘧原蟲氯喳抗性株和敏感株感染鼠細(xì)胞因子mRNA表達(dá)、 血清細(xì)胞因子濃度、DC細(xì)胞活化及免疫應(yīng)答反應(yīng)的差異 1）伯氏瘧原蟲氯喳抗性株紅內(nèi)期蟲體的凋亡：在光鏡和電鏡下，原蟲血癥上 升期的RC株和N株蟲體，結(jié)構(gòu)無異常�；�因組DNA電泳為單一條帶。而 RC株感染小鼠自愈期蟲體密度下降，大部分蟲體固縮，周圍呈空泡狀。在 電鏡下呈球形或長圓形，胞膜完整，核固縮，胞質(zhì)濃縮，線粒體和膜狀結(jié)構(gòu) 消失，未見代謝窗結(jié)構(gòu)�；�因組DNA電泳呈典型的梯形條帶。 2）腦、肝、脾組織細(xì)胞因子mRNA動態(tài)變化：應(yīng)用 RTICR技術(shù)，比較伯氏 二 ‘瘧原蟲 RC株和 N株感染 ICR小鼠后，不同原蟲血癥時，腦、肝、脾組 織細(xì)胞mRNA的差異。結(jié)果顯示N株和RC株感染小鼠后的腦組織中始終未 檢出IFNInRNA和hFmRNA的表達(dá)。RC株感染小鼠肝、脾一直有IFNallA 和TNTInRNA的表達(dá)。原蟲血癥為10～20％和30～60％時，肝臟表達(dá)高于脾 臟。原蟲血癥達(dá)高峰時，僅有脾IFNmmA和hF刪A和肝臟I剛側(cè)A 的表達(dá)。原蟲血癥下降為 10～20％時，肝、脾 IFNInRNA和 TNFmRNA表
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2001
【中圖分類】：R382.31
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 伯氏瘧原蟲氯喹抗性株和敏感株的致病力差異
    材料和方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 伯氏瘧原蟲氯喹抗性株和敏感株誘導(dǎo)感染鼠細(xì)胞因子、DC細(xì)胞活化及免疫應(yīng)答反應(yīng)的差異
    實驗材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 伯氏瘧原蟲氯喹抗性株和敏感株紅內(nèi)期蟲體超微結(jié)構(gòu)和基因組DNA的差異
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述： TNF-α在瘧原蟲感染中的作用
致謝

【引證文獻(xiàn)】

本文編號：2891014