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ClC-3氯通道參與TGF-β/Smads通路調(diào)控甲狀旁腺激素對MC3T3-E1細(xì)胞成骨分化的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2025-01-14 08:26
  研究背景:骨質(zhì)疏松是臨床上最常見的骨代謝疾病之一,主要表現(xiàn)為疼痛、易骨折,嚴(yán)重者可致呼吸功能下降,顯著影響病患的生活質(zhì)量,因而骨質(zhì)疏松的治療越來越受到人們的關(guān)注。甲狀旁腺的主細(xì)胞能夠分泌PTH,從而來調(diào)控骨組織代謝以及來維持機(jī)體的鈣平衡。然而,PTH能夠雙向地調(diào)節(jié)骨組織的代謝。具體言之,間斷PTH刺激下,小劑量時(shí)能夠促進(jìn)骨組織的形成;持續(xù)PTH刺激下,大劑量則可以促進(jìn)骨組織的吸收。但其具體的作用機(jī)制尚未探明,因而未能應(yīng)用于臨床上骨質(zhì)疏松患者的治療,因此進(jìn)一步闡明PTH促進(jìn)骨形成的機(jī)制將為其應(yīng)用于臨床提供更多的理論依據(jù)。ClC-3電壓門控氯通道存在于成骨譜系細(xì)胞中,在對成骨細(xì)胞的作用上與PTH有許多共同點(diǎn)。前期研究發(fā)現(xiàn),PTH刺激能顯著上調(diào)成骨細(xì)胞中ClC-3的表達(dá)。并且PTH能通過ClC-3調(diào)節(jié)下游成、破骨相關(guān)基因的表達(dá),但其分子機(jī)制并不十分明確。有研究認(rèn)為,pth與tgf-β1在膜受體水平上可相互影響,共同調(diào)節(jié)骨吸收和骨形成,但其作用機(jī)制非常復(fù)雜還不清楚。在前期研究中我們發(fā)現(xiàn)clc-3也參與了成骨細(xì)胞中tgf-β1信號(hào)的調(diào)控,tgf-β可以調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的增殖與分化,其中tgf-β1通過...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1MC3T3-E1細(xì)胞中Tgfb1基因轉(zhuǎn)染結(jié)果*P<0.05

圖1MC3T3-E1細(xì)胞中Tgfb1基因轉(zhuǎn)染結(jié)果*P<0.05

-27-A:亮視野下MC3T3-E1細(xì)胞;B:熒光顯微鏡下細(xì)胞內(nèi)見FAM綠色熒光;C:實(shí)定量RT-PCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染TGF-β1-87714后,TGF-β1基因表達(dá)量最低,與陰性照組比較。*P<0.05圖1MC3T3-E1細(xì)胞中Tgfb1基因轉(zhuǎn)染結(jié)果....


圖3PTH刺激下不同Clcn3基因表達(dá)水平對Tgfb1基因和TGF-β1蛋白表達(dá)情況的

圖3PTH刺激下不同Clcn3基因表達(dá)水平對Tgfb1基因和TGF-β1蛋白表達(dá)情況的

-28-圖3PTH刺激下不同Clcn3基因表達(dá)水平對Tgfb1基因和TGF-β1蛋白表達(dá)情況的影響*P<0.053.3各組MC3T3-E1細(xì)胞中CLC-3氯通道蛋白的表達(dá)水平由免疫熒光結(jié)果可以看出,在PTH濃度為10-9M、間斷刺激條件下,未轉(zhuǎn)染....


圖5PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達(dá)水平對Runx2mRNA、AlpmRNA、BspmRNA、OcmRNA表達(dá)的影響

圖5PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達(dá)水平對Runx2mRNA、AlpmRNA、BspmRNA、OcmRNA表達(dá)的影響

5PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達(dá)水平對Runx2mRNA、AlpNA、BspmRNA、OcmRNA表達(dá)的影響。*P<0.05干擾TGF-β1和ClC-3基因表達(dá)對成骨相關(guān)基因的表達(dá)的影響實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果顯示,PTH....


圖6PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達(dá)水平對RanklmRNA、OpgmRNA表達(dá)的影響

圖6PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達(dá)水平對RanklmRNA、OpgmRNA表達(dá)的影響

圖6PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達(dá)水平對RanklmRNA、OpmRNA表達(dá)的影響。*P<0.053.3干擾TGF-β1和ClC-3基因表達(dá)對其下游Smad2/3因子表達(dá)的影響實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果顯示,PTH間斷刺激....



本文編號(hào):4026669

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