目的：研究人膀胱平滑肌細胞在短時間內(nèi)持續(xù)牽拉各收縮表型蛋白的改變及與Erk/MAPK信號通路的關(guān)系。方法：本實驗采用Real-time PCR、Western blot檢測mRNA水平和蛋白水平各收縮表型蛋白的改變,免疫細胞化學和免疫細胞熒光觀察α-SMA在MAPK阻斷劑影響下后的改變,分析短時間持續(xù)牽拉人膀胱平滑肌細胞后各表型蛋白的改變以及與MAPK信號通路的關(guān)系。結(jié)果：持續(xù)牽拉人膀胱平滑肌細胞α-SMA出現(xiàn)先先下降后上升的現(xiàn)象,與細胞收縮功能密切相關(guān)的形態(tài)學表現(xiàn)一致,解除牽拉后,α-SMA仍能進一步上升,牽拉過程中Erks出現(xiàn)顯著改變,而P38無明顯改變,抑制劑分別抑制Erk通路和P38通路后,前者致使收縮表型蛋白發(fā)生顯著改變。結(jié)論：α-SMA和細胞形態(tài)可反映人膀胱平滑肌細胞的收縮能力,短期牽拉人膀胱平滑肌細胞,其收縮功能先下降后回升,解除牽拉,其收縮功能也增加,這與Erk通路有關(guān),而與P38通路無關(guān)。

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?Ａ．?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀脫平滑肌細施ａ?－ＳＭＡ?ｍ民ＮＡ表達量與對照組相對量??柱狀圖統(tǒng)計

分為８沮：Ｏｓ組（Ｃｏｎｔｒｏｌ組即對照組）、３０ｓ沮、Ｉｍｉｎ組、５ｍｉｎ組、ｌＯｍｉｎ組、１５ｍｉｎ??組、３０ｍｉｎ組、：ｌｈ組。牽拉后２ｈ終止細胞培養(yǎng)。民ｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣ民和Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ的結(jié)??果顯不出現(xiàn)一波形改變，其中在ｌＯｍｉｎ組和１５ｍｉｎ組表型蜜白表達....

圖２Ｅ．?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀脫平滑肌細胞ｍＲＮＡ的溶解曲線，ａ；ＳＭ２２、ｂ：ａ－??ＳＭＡ、Ｃ；?Ｓｍｏｏｔ；ｈｅｌｉｎ、ｄ；?Ｃａｌｐｏｎｉｎ、ｅ：?ＧＡＰＤＨ

ｍＲＮＡ發(fā)生波形改變，出現(xiàn)先減少，后增加現(xiàn)象，波答位于ｌＯｍｉｎ組和??１５ｍｉｎ?姐。??圖２Ｃ？民ｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀騰平滑肌細胞Ｃａｌｐｏｎｉｎ?ｍ民ＮＡ表達量與對照組相對??量柱狀圖統(tǒng)計。＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ．對照組，提示在不同牽拉時間條件下，Ｃａｌｐｏｎｉｎ??....

圖２Ｆ．?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ條帶提示人膀腕平滑肌細胞ａ－ＳＭＡ在不同牽拉條件下也出現(xiàn)類??－似Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ波形改變，出現(xiàn)先減少，后增加現(xiàn)象，波谷位于ｌＯｍｉｎ組??

ｍＲＮＡ發(fā)生波形改變，出現(xiàn)先減少，后增加現(xiàn)象，波答位于ｌＯｍｉｎ組和??１５ｍｉｎ?姐。??圖２Ｃ？民ｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀騰平滑肌細胞Ｃａｌｐｏｎｉｎ?ｍ民ＮＡ表達量與對照組相對??量柱狀圖統(tǒng)計。＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ．對照組，提示在不同牽拉時間條件下，Ｃａｌｐｏｎｉｎ??....

圖２Ｇ：對圖２Ｆ的條帶用ｌｉｎａｇｅ?Ｊ軟件進行灰度分析，先與ＧＡＰＤＨ內(nèi)參進行比對后，??既而與Ｃｏｎｔｒｏｌ組進行比對，做一柱狀圖，＊Ｐ＜０．０５ｖｓ．對照組，結(jié)果更能直??

本文編號：3992900