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高鈣離子誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞自噬對(duì)炎癥因子生成的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-01-26 17:10
  目的觀察高鈣離子誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)發(fā)生細(xì)胞自噬對(duì)細(xì)胞炎癥因子單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-1)及高遷移率族蛋白1(HMGB1)生成的影響。方法體外培養(yǎng)HK-2細(xì)胞,分別用正常培養(yǎng)液(不含Ca2+溶液)、5 mmol/L Ca2+溶液、10 mmol/L Ca2+溶液進(jìn)行處理12 h,以及用10 mmol/L Ca2+液各處理0、6、12 h,采用Western blot檢測(cè)自噬標(biāo)記蛋白(LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值)和自噬相關(guān)因子Beclin1的表達(dá)水平,實(shí)時(shí)定量PCR(RT-PCR)方法檢測(cè)細(xì)胞炎癥因子HMGB1及MCP-1的表達(dá)水平。同時(shí),利用不同濃度的細(xì)胞自噬抑制劑3-甲基腺苷(3-MA)和氯喹(CQ)分別預(yù)處理HK-2細(xì)胞6 h,隨后再用上述3個(gè)濃度梯度的Ca2+溶液處理HK-2細(xì)胞12 h,采用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞自噬水平對(duì)炎癥因子HMGB1及MCP-1表達(dá)的影響。另外,HK-2細(xì)胞分別用4個(gè)濃度梯度(0、10、20、30μmol/L)CQ預(yù)處理6 h,再... 

【文章來源】:廣東醫(yī)學(xué). 2019,40(04)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

高鈣離子誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞自噬對(duì)炎癥因子生成的影響


高鈣溶液處理的HK-2細(xì)胞內(nèi)LC3B和Beclin1蛋白表達(dá)水平A:不同濃度高鈣離子溶液處理的HK-2細(xì)胞內(nèi)LC3B和Beclin1蛋白表達(dá)水平;B:10mmol/L高鈣離子溶液處理不同時(shí)間的HK-2細(xì)胞內(nèi)LC3B和Beclin1蛋白表達(dá)水平


本文編號(hào):3001505

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