第一部分 麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬SIRT1蛋白表達(dá)降低、中樞神經(jīng)炎癥反應(yīng)和tau蛋白表達(dá)異常目的:探討麻醉手術(shù)對(duì)老齡大鼠海馬SIRT1蛋白表達(dá),中樞神經(jīng)炎癥反應(yīng)和tau蛋白表達(dá)的作用。方法:7日齡,14日齡,57日齡,21月齡SD大鼠,取海馬組織,蛋白印記雜交（Western Blot）檢測(cè)四組不同年齡大鼠海馬組織中SIRT1蛋白表達(dá)的變化（n=6）。21月齡SD雄性大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組:空白對(duì)照組（CON組）和麻醉手術(shù)組（ISO+SUR組）。麻醉手術(shù)組（ISO+SUR組）在2%異氟烷麻醉下行切脾手術(shù),麻醉和手術(shù)總時(shí)長(zhǎng)2 h;空白對(duì)照組（CON組）吸入對(duì)照氣體2 h。麻醉手術(shù)結(jié)束后24 h,取海馬組織,蛋白印記雜交（Western Blot）檢測(cè)SIRT1,DNMT1,ac-NF-κB,IL-6,ac-tau（k280）,ac-tau（k686）,p-tau（AT8）蛋白表達(dá)（n=6）;麻醉手術(shù)結(jié)束24小時(shí)后,灌注多聚甲醛取全腦,免疫熒光IF檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞激活情況。結(jié)果:（1）Western Blot結(jié)果顯示,在四組不同年齡段SD大鼠海馬組織中,21月齡大鼠海馬SIRT1蛋白表... 

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麻醉手術(shù)加劇了衰老所致的大鼠海馬SIRT1表達(dá)下調(diào)

圖 2. 麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)度激活。對(duì) CON 組和 ISO+SUR組大鼠進(jìn)行 Iba1（綠色熒光）和 DAPI（藍(lán)色熒光）的免疫熒光標(biāo)記。與 CON 組相比，ISO+SUR 組的 Iba1 陽(yáng)性細(xì)胞顯著增多。比例尺 = 50 μm。3. 麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬 DNMT1 表達(dá)減少，ac-NF-κB 和 IL-6 的表達(dá)升高DNA 甲基化是被廣泛研究的表觀遺傳過(guò)程之一。DNMT1 是常見(jiàn)的 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶之一。有研究表明 SIRT1 可以通過(guò)使 DNMT1 去乙酰化，調(diào)控 DNMT1活性，從而影響促炎細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平。因此我們進(jìn)一步檢測(cè)了海馬中 DNMT1的表達(dá)變化。研究結(jié)果表明，與 CON 組老齡大鼠相比，麻醉手術(shù)組老齡大鼠海馬中 DNMT1 的表達(dá)水平顯著降低（P < 0.05）。NF-κB 是一種核轉(zhuǎn)錄因子，在細(xì)胞損傷，應(yīng)激中被激活。有研究表明 NF-κB 的激活與衰老和衰老相關(guān)的慢性疾病有關(guān)。另一方面，SIRT1 可以通過(guò)使 NF-κB 去乙酰化，抑制其轉(zhuǎn)錄活性，從

圖 3. 麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬炎癥反應(yīng)增強(qiáng)。（A, B）麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬 DNMT1 表達(dá)降低（*P < 0.05）。（A, C）麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬 ac-NF-κB 表達(dá)升高（*P < 0.05）。（A, D）麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬 IL-6 表達(dá)升高（**P < 0.001）。（n = 6）4. 麻醉手術(shù)引起老齡大鼠海馬乙酰化 tau 蛋白和磷酸化 tau 蛋白表達(dá)升高Tau 蛋白是一種微管相關(guān)蛋白，在維持軸突微管的穩(wěn)定性中有重要作用。有研究表明，乙�；� tau 蛋白出現(xiàn)早于磷酸化 tau 蛋白，且乙�；� tau 蛋白會(huì)促進(jìn)磷酸化 tau 蛋白積聚，從而加重 tau 蛋白介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。在這一部分中，我們檢測(cè)了老齡大鼠在接受麻醉手術(shù)后，海馬組織內(nèi) tau 蛋白的乙�；土姿峄�。研究結(jié)果表明，麻醉手術(shù)引起了老齡大鼠海馬 ac-tau(k280)，ac-tau (k686)和 p-tau (AT8)蛋白表達(dá)上調(diào)（P < 0.001）。


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