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  本文關(guān)鍵詞：小型豬七氟烷麻醉試驗(yàn)及其臨床麻醉效果評價(jià)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)科大學(xué)》 2015年

PAI-1在e-PTFE人造血管重建肺動(dòng)脈研究中的定位及表達(dá)

曹丕健  

【摘要】：目的：建立不同血管環(huán)境下人造血管置換的動(dòng)物模型,研究人造血管內(nèi)膜形成的組織形態(tài)學(xué)特點(diǎn)和超微結(jié)構(gòu),檢測PAI-1在術(shù)后人造血管內(nèi)膜中的mRNA及蛋白表達(dá)水平,從而探索不同血管環(huán)境下人造血管的自然內(nèi)皮化及抗血栓功能,為人造血管肺動(dòng)脈重建手術(shù)的安全性及可行性提供理論依據(jù)。方法：1、建立人造血管置換動(dòng)物模型：27只滇南小耳豬作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,雌雄不拘,體重25-30 kg。隨機(jī)分為三組,肺動(dòng)脈組9只,人造血管置換肺動(dòng)脈；胸主動(dòng)脈組9只,人造血管置換胸主動(dòng)脈；下腔靜脈組9只,人造血管置換下腔靜脈。根據(jù)標(biāo)本采集時(shí)間,再分別將3組動(dòng)物隨機(jī)平均分為2周組及3個(gè)月組和6個(gè)月組。2、分別于術(shù)后2周、3個(gè)月、6個(gè)月行經(jīng)皮彩色多普勒超聲檢查及人工血管取材時(shí)測量所置換血管通暢或狹窄程度,有無血栓形成等,統(tǒng)計(jì)各組血管暢通率。3、移植物行光鏡、掃描電鏡檢查觀察不同環(huán)境下人造血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)；計(jì)算內(nèi)膜增生的差異采用方差分析比較。4、采用免疫組化方法檢測各組人造血管內(nèi)皮覆蓋情況,采用方差分析比較各組差異；5、Western Blot檢測各組人造血管內(nèi)膜PAI-1蛋白表達(dá)水平；PCR檢測各組人造血管內(nèi)膜PAI-1mRNA表達(dá)水平。通過各組之間及自身正常血管內(nèi)膜PAI-1mRNA及蛋白表達(dá)水平的比較,分析其差異。結(jié)果：所有動(dòng)物術(shù)后均存活,除下腔靜脈組2例因移植物血栓形成引起腹水及1例出現(xiàn)刀口感染外,其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均未出現(xiàn)感染及出血性并發(fā)癥。掃描電鏡可見下腔靜脈中新生的內(nèi)皮細(xì)胞為類圓形,在肺動(dòng)脈中可見新生的內(nèi)皮細(xì)胞為橢圓形,在胸主脈中可以看到新生的內(nèi)皮細(xì)胞為長紡錘形；動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞排列較緊密而靜脈內(nèi)皮細(xì)胞排列相對疏松。血管彩超檢查結(jié)果顯示：肺動(dòng)脈、胸主動(dòng)脈各組無明顯狹窄,下腔靜脈組有5例明顯狹窄其中2例伴腹水形成。經(jīng)移植物取出后直接測量統(tǒng)計(jì)管徑狹窄不超過度50%的通暢率為：下腔靜脈組為(4/9)；肺動(dòng)脈組為(9/9)；胸主動(dòng)脈組為(9/9)。各組內(nèi)膜增生隨時(shí)間逐漸加重,在同一時(shí)間點(diǎn)：下腔靜脈組人造血管內(nèi)膜增生較胸主動(dòng)脈及肺動(dòng)脈組明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；胸主動(dòng)脈組和肺動(dòng)脈組內(nèi)膜增生差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。三種不同環(huán)境移植組于6個(gè)月時(shí)均基本完成人造血管內(nèi)皮化,其中各時(shí)間點(diǎn)肺動(dòng)脈組與胸主動(dòng)脈組比較均未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異護(hù)0.05)；下腔靜脈組較肺動(dòng)脈組及胸主動(dòng)脈組內(nèi)皮化進(jìn)程慢,在2周及3個(gè)月時(shí)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。正常血管內(nèi)膜的PAI-1基因及蛋白表達(dá)較低,然而在人造血管術(shù)后2周時(shí)表達(dá)明顯增高,術(shù)后2周、3個(gè)月與自身對照組比較PAI-1基因及蛋白表達(dá)明顯增高(P0.05)。但隨時(shí)間延長表達(dá)量逐漸降低并趨于正常。同一時(shí)間點(diǎn)胸主動(dòng)脈和肺動(dòng)脈兩組在PAI-1基因及蛋白表達(dá)上無明顯差異(P0.05)；但下腔靜脈組較肺動(dòng)脈組及胸主動(dòng)脈組PAI-1基因及蛋白的表達(dá)增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：我們的初步研究結(jié)果表明,e-PTFE人造血管在6個(gè)月可基本完成自然內(nèi)皮化；三種血管環(huán)境下比較,血管移植物易于在下腔靜脈中形成血栓；內(nèi)皮細(xì)胞PAI-1mRNA及蛋白表達(dá)與血管內(nèi)皮細(xì)胞抗血栓功能密切相關(guān)；肺動(dòng)脈、胸主動(dòng)脈置入的人工血管內(nèi)皮細(xì)胞在形態(tài)、功能及PAI-1表達(dá)上相接近,且較下腔靜脈組自然內(nèi)皮化快、內(nèi)膜增生輕、PAI-1mRNA及蛋白表達(dá)水平低。可見在肺動(dòng)脈及胸主動(dòng)脈環(huán)境下人造血管在減少內(nèi)膜增生、加快內(nèi)皮化進(jìn)程及抗血栓功能方面具備一定優(yōu)勢。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2
【目錄】：

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本文編號：125360