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不同時間點霧化吸入STAT1反義寡核苷酸對肺纖維化大鼠的影響

發(fā)布時間:2020-11-10 00:26
   目的:觀察博萊霉素(bleomycin,BLM)致肺纖維化大鼠不同時間點霧化吸入信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄活化子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)反義寡核苷酸(antisense oligonucleotides, ASON)對支氣管肺泡灌洗液(BALF)中的細胞因子:血小板源性生長因子(PDGF)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)及肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA表達的影響,探討最佳給藥時機。方法:成年Wistar雌性大鼠25只隨機平均分為BLM組、ASON 0 d組、ASON 7 d組、ASON 14 d組和生理鹽水(NS)組,前4組氣管內(nèi)灌注BLM建立肺纖維化模型,NS組氣管內(nèi)灌注NS。ASON 0、7、14 d組分別于氣管內(nèi)灌注BLM后立即、第7和14天開始霧化吸入STAT1 ASON;NS組和BLM組霧化吸入NS。氣管內(nèi)灌注BLM后第28天處死各組大鼠,取肺組織分別行HE和Masson染色,觀察肺泡炎和纖維化情況并評分;酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定BALF中PDGF、TNF-α與TGF-β1的濃度;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)測定肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA表達。結(jié)果:(1)、肺組織病理學(xué)觀察顯示:NS組動物大鼠未發(fā)現(xiàn)肺泡間隔水腫、炎性細胞浸潤和纖維化形成。BLM組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)破壞、間質(zhì)增生,形成廣泛纖維化,同時存在肺泡炎。ASON 0 d組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)尚存,可見炎性細胞浸潤和膠原纖維增生,但肺泡炎及肺纖維化程度明顯輕于BLM組和ASON 14 d組;肺泡炎評分(1.80±0.84)和肺纖維化評分(2.60±0.55)均明顯低于BLM組(2.40±0.55、4.40±0.55)、ASON7 d組(2.20±0.45、3.00±0.71)和ASON 14 d組(2.20±0.84、4.00±1.00,均P0.05)。ASON 7 d組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)尚存,可見炎性細胞浸潤和膠原纖維增生,其肺泡炎程度與BLM組類似,而肺纖維化程度輕于BLM組和ASON 14 d組;肺纖維化評分也明顯低于BLM組和ASON 14 d組(均P0.05)。ASON 14 d組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)破壞,肺泡腔融合,其肺泡炎和肺纖維化程度均與BLM組類似。(2)、ASON 0 d組BALF中PDGF、TGF-β1與TNF-α濃度[(42.52±4.37)pg/ml、(48.11±3.46)pg/ml、(1.93±0.14)ng/ml]均明顯低于BLM組[(56.26±6.85)pg/ml、(57.67±2.46)pg/ml、(2.45±0.25)ng/ml,均P0.05],TGF-β1濃度明顯低于ASON 7 d組([51.42±3.57)pg/ml]和ASON 14 d組[(55.83±1.79)pg/ml,均P0.05];ASON 7 d組BALF中TGF-β1濃度[(51.42±3.57) pg/ml]也明顯低于BLM組和ASON 14 d組(均P0.05);ASON 14 d組BALF中PDGF濃度[(45.85±2.08) pg/ml]明顯低于BLM組(P0.05)。(3)、ASON 0 d組Ⅰ型和Ⅲ型膠原mRNA的相對表達量(1.23±0.11、0.71±0.05)明顯低于BLM組和ASON 14 d組[(1.95±0.42、1.25±0.12)、(1.91±0.20、1.12±0.21),均P0.05]。結(jié)論:早期霧化吸入STAT1 ASON對BLM致肺纖維化大鼠的肺纖維化形成有明顯阻抑作用,用藥越早效果越好,提示霧化吸入STAT1 ASON有可能成為肺纖維化的早期干預(yù)手段。
【學(xué)位單位】:瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2009
【中圖分類】:R563.9
【部分圖文】:

肺纖維化


分組 例數(shù)(只) 肺纖維化(分)NS 組 51.00±0.00BLM 組 54.40±0.55*ASON 0 天組 52.60±0.55*ΔASON 7 天組 53.00±0.71*Δ▲ASON 14 天組 54.00±1.00*▲#注:與 NS 組比較*P<0.05;與 BLM 組比較ΔP<0.05;與 ASON 0 d 組比較▲P<0.05 ASON 7 d 組比較#P<0.05。Compared with NS group *P<0.05; Compared with BLM groupΔP<0.05; Compareith ASON 0 d group▲P<0.05; Compared with ASON 7 d group#P<0.05.

肺纖維化,大鼠,濃度,霧化吸入


圖 12 各組大鼠肺纖維化評分比較Fig 12 The scores of fibrosis in lung tissue. ELISA 測定 BALF 中 TGF-β1、PDGF 和 TNF-α濃度.1 各組大鼠 BALF 中 TGF-β1 濃度的比較肺纖維化建模的 4 組大鼠 BALF 中 TGF-β1 濃度明顯高于 NS 組(均<0.05)。ASON 0 d 組 BALF 中 TGF-β1 濃度明顯低于 ASON 7 d 組、ASON4 d 組和 BLM 組(均 P<0.05)。ASON 7 d 組 BALF 中 TGF-β1 濃度明顯于 ASON 14 d 組和 BLM 組(均 P<0.05)。ASON 14 d 組 BALF 中 TGF-β1度與 BLM 組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表 3、圖 13。 3 不同時間點霧化吸入 STAT1ASON 對肺纖維化大鼠 BALF 中 TGF-β1 濃度的影響

大鼠


ASON 7 天組 551.42±3.57*Δ▲ASON 14 天組 555.83±1.79*▲#注:與 NS 組比較*P<0.05;與 BLM 組比較ΔP<0.05;與 ASON 0 d 組比較▲P<0.05 ASON 7 d 組比較#P<0.05。Compared with NS group *P<0.05; Compared with BLM groupΔP<0.05; Compareith ASON 0 d group▲P<0.05; Compared with ASON 7 d group#P<0.05.
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