發(fā)布時(shí)間：2020-11-03 04:13

　　 前言: 甘露糖受體(mannose receptor,MR),作為一個(gè)固有的模式識(shí)別受體,在巨噬細(xì)胞、未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞及一部分內(nèi)皮細(xì)胞中都有表達(dá),是一種重要的抗原提呈分子和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體。 急性肺損傷(acute lung injury,ALI),是呼吸系統(tǒng)疾病中的危重癥,其定義是:心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素引起的急性,進(jìn)行性缺氧性呼吸衰竭,是肺部炎癥和通透性增加的綜合征。對(duì)慢性鼻竇炎和鼻息肉病人的研究發(fā)現(xiàn),鼻息肉患者的鼻竇粘膜處巨噬細(xì)胞MR的mRNA有明顯的升高。Marzolo MP亦發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)巨噬細(xì)胞—腦小膠質(zhì)細(xì)胞表面的MR能被地塞米松上調(diào)。但是甘露糖受體在急性肺損傷中的表達(dá)情況及其在急性肺損傷中的作用機(jī)制,目前國(guó)內(nèi)外還未有報(bào)道。 目的: 研究甘露糖受體在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的急性肺損傷中的表達(dá)情況,并探討其可能的作用機(jī)制,為臨床藥物治療找尋新的靶點(diǎn)。 方法: 雄性SD小鼠,隨機(jī)分為3組:1.對(duì)照組;2.模型組;3.地塞米松(dexameathone,DXM)(0.5 mg/kg)組。通過(guò)氣管內(nèi)滴注LPS(3 mg/kg)建立ALI模型,地塞米松組在滴注前5分和滴注后3小時(shí),尾靜脈注射地塞米松(dexameathone,DXM)(0.5mg/kg),對(duì)照組注射相應(yīng)劑量0.9%生理鹽水。滴注LPS 6小時(shí)后處死動(dòng)物,行肺濕/干重比,肺滲透指數(shù)(pulmonary permeability index,PPI),支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù),肺和BALF中髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase,MPO),單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotacticprotein 1,MCP-1)活性,腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-10檢測(cè),并觀察光學(xué)顯微鏡下肺損傷的程度。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)實(shí)時(shí)定量RT-PCR測(cè)定各組中甘露糖受體(MR)的含量,并用Western Blot檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)的蛋白表達(dá)水平,觀察急性肺損傷中甘露糖受體的表達(dá)情況及其與核轉(zhuǎn)錄因子-κB的關(guān)系,探討甘露糖受體在急性肺損傷中的作用及其可能的機(jī)制。 結(jié)果: 1.甘露糖受體在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷中表達(dá)下調(diào):本實(shí)驗(yàn)以氣管內(nèi)滴入LPS誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生ALI,動(dòng)物模型表現(xiàn)出肺泡內(nèi)PMN的大量滲出,肺泡壁對(duì)液體和蛋白的滲透性升高,肺濕/干重比、PPI、BALF中白細(xì)胞和PMN計(jì)數(shù)、肺勻漿中和BALF中MPO、TNF-α和IL-1b水平顯著增高,以及肺部的ALI的病理?yè)p傷改變。以上均為小鼠ALI的基本特征,提示本實(shí)驗(yàn)小鼠ALI模型建立成功。實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)急性肺損傷模型中甘露糖受體mRNA的量下降,比正常對(duì)照組下降了約20.1%(P＜0.05)。 2.地塞米松拮抗LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷炎癥并上調(diào)MR:LPS組的肺濕/干重比(4.67±0.37)與正常組(4.07±0.31)比較明顯升高(P＜0.05),DXM(0.5 mg/kg)靜脈注射明顯抑制LPS誘導(dǎo)的肺部水腫(P＜0.05)。LPS組肺勻漿中MPO水平升高,與對(duì)照組比較上升了58.8%(P＜0.05),地塞米松減少LPS誘導(dǎo)的肺勻漿中MPO活性的上升(P＜0.05)。LPS組的BALF中的TNF-α、IL-1b和MCP-1水平顯著上升,分別達(dá)到對(duì)照組的24倍、12倍和16倍(P＜0.01),DXM(0.5mg/kg)靜脈注射明顯抑制TNF-α、IL-1和MCP-1(p＜0.05)的活性。實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)地塞米松組中甘露糖受體mRNA的量上調(diào),比LPS組增加了約66.3%(P＜0.05)。 3.上調(diào)甘露糖受體能抑制LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷中NF—κB/p65的表達(dá):WesternBlot檢測(cè)顯示,在正常肺組織中有低水平的NF—κB/p65表達(dá),經(jīng)LPS(3 mg/kg)刺激6h后肺組織中NF—κB/p65表達(dá)明顯增高,達(dá)到正常對(duì)照組的4.5倍。預(yù)先給予DXM(0.5mg/kg)靜脈注射,能明顯抑制LPS所誘導(dǎo)的急性肺損傷中NF—κB/p65高水平表達(dá)。 結(jié)論: 甘露糖受體在脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷中表達(dá)下調(diào),通過(guò)上調(diào)其水平能抑制急性肺損傷肺組織中NF—κB/p65蛋白的表達(dá),提示甘露糖受體可能與NF-κB信號(hào)通路有關(guān),進(jìn)而在mRNA水平上抑制LPS所致的急性肺損傷中TNF-α、IL-1β等炎癥因子的表達(dá),減輕急性肺損傷中的炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R563.8
【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文摘要
縮略詞表
正文
    引言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
作者簡(jiǎn)介

【共引文獻(xiàn)】

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1 夏長(zhǎng)江;孟革;趙建;丁日高;;中性粒細(xì)胞在急性肺損傷中的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];國(guó)際藥學(xué)研究雜志;2009年06期

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本文編號(hào)：2868076