發(fā)布時(shí)間：2020-11-04 15:37

　　 目的:探討ANXA5、KDR基因啟動子單核苷酸多態(tài)性在重慶地區(qū)原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的作用機(jī)制,期望闡明候選基因高危突變誘發(fā)臍帶內(nèi)皮損傷、引起血栓形成而導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的分子過程。建立并完善遺傳性血栓風(fēng)險(xiǎn)致原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)發(fā)生的臨床模型,為患者制定完善的診療指南和安全可靠的臨床干預(yù)方案。方法:在本研究中納入非孕期原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者142例、健康體檢女性107例,檢測基因啟動子單核苷酸多態(tài)性與原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)遺傳風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)性。構(gòu)建不同基因型的重組質(zhì)粒進(jìn)行雙熒光素酶檢測驗(yàn)證基因啟動子單核苷酸多態(tài)性對基因轉(zhuǎn)錄活性的影響。運(yùn)用生物信息學(xué)方法預(yù)測分子二維結(jié)構(gòu)是否發(fā)生改變及結(jié)合的具體的轉(zhuǎn)錄因子。結(jié)果:病例組ANXA5(rs1050606)、KDR(rs55713360)突變純合型等位基因頻率均明顯增高,rs1050606位點(diǎn)中G等位基因是原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)發(fā)病的危險(xiǎn)因素,T等位基因降低了患病風(fēng)險(xiǎn)。rs55713360位點(diǎn)中C等位基因是原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)發(fā)病的危險(xiǎn)因素,T等位基因降低了患病風(fēng)險(xiǎn)。ANXA5、KDR野生型之間存在相互作用。不同基因型(6個(gè)位點(diǎn)全野生純合、全突變純合、單個(gè)位點(diǎn)突變純合其余位點(diǎn)野生純合)共6個(gè)重組質(zhì)粒構(gòu)建成功。ANXA5、KDR基因雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)顯示突變基因型相比野生型啟動子上游調(diào)控序列轉(zhuǎn)錄活性明顯降低。預(yù)測出ZBTB33、RELA、INSM1、REL這4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子可能與ANXA5(rs1050606)結(jié)合,TEAD4、NOTO、VSX1可能與KDR(rs55713360)結(jié)合,分子二維結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變。結(jié)論:ANXA5(rs1050606)、KDR(rs55713360)突變基因型顯著增加原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)遺傳風(fēng)險(xiǎn),為其危險(xiǎn)因素。ANXA5、KDR基因啟動子單核苷酸多態(tài)性對基因轉(zhuǎn)錄活性有抑制作用,可能是由于基因高級結(jié)構(gòu)的改變。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R714.21
【部分圖文】：

26 1.1 ANXA5-pGL3-Basic 重組質(zhì)粒酶切驗(yàn)證圖 digestion figure of recombinant plasmid ANXarker；ic 重組質(zhì)粒（SNP1-SNP6 全野生純合）；ic 重組質(zhì)粒（SNP1-SNP6 全突變純合）；ic 重組質(zhì)粒（SNP5 突變純合其余位點(diǎn)野生純合）；GL3-Basic 質(zhì)粒，短片段為目的片段。

1.2 KDR-pGL3-Basic 重組質(zhì)粒酶切驗(yàn)證e digestion figure of recombinant plasmarker；組質(zhì)粒（SNP1-SNP6 全野生純合）；組質(zhì)粒（SNP1-SNP6 全突變純合）；組質(zhì)粒（SNP1 突變純合其余位點(diǎn)野生純合GL3-Basic 質(zhì)粒，短片段為目的片段。果

圖 2.4 KDR1-pGL3-Basic 重組質(zhì)粒（SNP1-SNP6 全野生純合）Fig 2.4 The sequencing results of recombinant plasmid KDR1-pGL3-Basic (SNP1-SNP6major)SNP1: T>CSNP6: TT
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1 劉桂岑;ANXA5、KDR基因啟動子單核苷酸多態(tài)性與原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)關(guān)聯(lián)性的分子機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2018年

本文編號：2870279