發(fā)布時(shí)間：2019-07-26 16:08

【摘要】：目的:探討窒息對(duì)新生小鼠β受體的影響及β_2受體激動(dòng)劑對(duì)未成熟心肌細(xì)胞是否具有保護(hù)性。方法:第一部分取出生3天的ICR小鼠36只,隨機(jī)數(shù)字表法編號(hào),分別于小鼠生后3、5、7、14、21、28天隨機(jī)從中各取6只,開胸取出心肌組織,分別進(jìn)行免疫組化及western蛋白印跡法檢測(cè)心肌β_1、β_2受體表達(dá)。第二部分取出生3天的ICR小鼠12只,采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為2組,對(duì)照(Control,CTL)組(n=6只)僅置于廣口瓶中,不做窒息處理。窒息(Asphyxia,AS)組(n=6只)參照新生鼠常壓窒息模型進(jìn)行窒息處理,各組小鼠均開胸取出心肌組織,分別進(jìn)行免疫組化及western蛋白印跡法檢測(cè)心肌β_1、β_2受體表達(dá)。第三部分取出生3天的小鼠36只,采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組,CTL組(n=12只)僅置于廣口瓶中,不做窒息處理。AS組(n=12只)參照新生鼠常壓窒息模型進(jìn)行窒息處理。非諾特羅(Fenoterol,FEN)組(n=12只)在窒息處理前2小時(shí)予以非諾特羅前期給予1次,余處理同AS組。分別在各組小鼠出生3天、28天行心臟超聲檢測(cè)小鼠心率及左心室射血分?jǐn)?shù),開胸取心臟組織,免疫組化及western蛋白印跡法檢測(cè)心肌β_1、β_2受體表達(dá)。結(jié)果:1.CTL組出生第3、5、7、14、21、28天各組小鼠β_1受體表達(dá)隨著鼠齡增長(zhǎng)逐漸增加,28天小鼠β_1受體表達(dá)明顯高于3天小鼠(P0.05);2.CTL組出生第3、5、7、14、21、28天各組小鼠β_2受體表達(dá)隨著鼠齡增長(zhǎng)逐漸減少,28天小鼠β_2受體表達(dá)明顯低于3天小鼠(P0.05);3.與CTL組相比,AS組3天小鼠心肌β_1、β_2受體均出現(xiàn)明顯下調(diào)(P0.05);4.CTL組3天正常小鼠心肌細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞核清晰,細(xì)胞膜完整,無炎性細(xì)胞滲出、心肌細(xì)胞水腫及壞死。AS組3天小鼠進(jìn)行窒息處理后,心肌細(xì)胞排列紊亂,有少許炎性細(xì)胞滲出。AS組3天小鼠相比于CTL組,心率上升(P0.05),LVEF%明顯降低(P0.05),HB/WB比對(duì)比無明顯差異(P0.05),提示心肌損傷;5.與CTL組28天小鼠相比,AS組HW/BW比升高,FEN組HW/BW比降低,FEN組較AS組HW/BW降低(P0.05);6.與CTL組28天小鼠相比,AS組心率降低,FEN組心率升高,但三組組間互無明顯差異(P0.05);7.與CTL組28天小鼠相比,FEN組及AS組LVEF%均降低,FEN組對(duì)比AS組LVEF%升高(P0.05);8.與CTL組28天小鼠相比,FEN組及AS組β_1、β_2受體表達(dá)均降低,FEN組β_1受體相比于AS組有升高趨勢(shì),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),FEN組β_2受體相比于AS組有升高趨勢(shì)(P0.05)。結(jié)論:1.正常小鼠心肌β_1、β_2受體表達(dá)在一定的時(shí)間段內(nèi)可以隨著鼠齡變化而發(fā)生改變,主要表現(xiàn)為β_1受體表達(dá)上調(diào),β_2受體下調(diào);2.窒息3天小鼠出現(xiàn)心率增快、LVEF%下降,提示窒息可以引起心肌損傷;3.窒息所致新生3天小鼠心肌損傷后,心肌β_1、β_2受體均出現(xiàn)大量下調(diào);4.特異性β_2受體激動(dòng)劑非諾特羅處理后的窒息小鼠相比于單純窒息小鼠,HW/BW更低,LVEF%升高,β_2受體增加,提示非諾特羅可以改善心肌功能,可能是通過提高β_2受體活性來發(fā)揮作用。
【圖文】：

18圖 2 3d 小鼠窒息心肌細(xì)胞 β 受體表達(dá)變化（A）3d 小鼠窒息損傷后心肌細(xì)胞 β 受體免疫組化結(jié)果,可見窒息后小鼠心肌 β1、β2受體染色均變淺，，表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)的趨勢(shì)；（B）3d 小鼠窒息損傷后心肌細(xì)胞 β 受體 western blot 表達(dá)結(jié)果；（C）3d 小鼠窒息后心肌細(xì)胞 β1受體蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)圖，n=6，P<0.05，CTL3d vs.AS 3d；（D）3d 小鼠窒息后心肌細(xì)胞 β2受體蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)圖，n=6，P<0.05，CTL3d vs.AS 3d。

25圖 3 窒息 3d 和 28d 小鼠各組 β 受體蛋白表達(dá)及心功能指標(biāo)變化（A）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細(xì)胞 β1受體免疫組化結(jié)果；（B）3d、28d 小鼠CTL、AS、FEN 各組心肌細(xì)胞 β2受體免疫組化結(jié)果；（C）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細(xì)胞 β 受體蛋白 western blot 表達(dá)變化；（D）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細(xì)胞 β1受體蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)圖，n=6，P>0.05，F(xiàn)EN 28d vs.AS 28d；（E）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細(xì)胞 β2受體蛋白表達(dá)統(tǒng)計(jì)圖，n=6，P<0.05，F(xiàn)EN 28d vs. AS 28d；(F) 3d、28d小鼠 CTL、AS、FEN 各組心率統(tǒng)計(jì)圖，n=6，P>0.05，F(xiàn)EN 28d vs.AS 28d；(G) 3d、28d 小鼠CTL、AS、FEN 各組 HW/BW 統(tǒng)計(jì)圖，n=6，P<0.05，F(xiàn)EN 28d vs. AS 28d；（H）3d、28d 小
【學(xué)位授予單位】：湖北醫(yī)藥學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R722.12

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2519654