生長分化因子9(GDF9)是綿羊多胎性狀的重要候選基因,探討GDF9在不同發(fā)育時期的母羊生殖器官的表達規(guī)律,對揭示其調(diào)控母羊生殖器官的發(fā)育具有重要的意義。以2月齡(性成熟前)、6月齡(性成熟)和12月齡(性成熟后)這3個不同生理階段的雌性綿羊卵巢、輸卵管、子宮內(nèi)膜為對象,采用RT-PCR技術分析GDF9蛋白在相應生殖器官中的表達,并分析其相對表達量;采用免疫組織化學法對GDF9基因在相應生殖器官中的表達進行定位分析。熒光定量PCR結果顯示,GDF9在2月齡與6月齡間、2月齡與12月齡間的卵巢上均表現(xiàn)出極顯著的差異性(P<0.01),而6月齡與12月齡則無顯著性差異(P>0.05);GDF9在2月齡與6月齡間的子宮內(nèi)膜上表達無顯著差異(P>0.05),而在2月齡與12月齡間、6月齡與12月齡間的子宮內(nèi)膜上的表達均差異顯著(P <0.05);GDF9在3個年齡間的輸卵管上的表達均無顯著性差異(P>0.05)。免疫組織化學試驗結果顯示,GDF9蛋白在2月齡、6月齡和12月齡綿羊子宮內(nèi)膜和輸卵管的上皮細胞及卵巢的顆粒細胞上均能表達,說明GDF9在不同生理階段的綿羊...

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圖1總RNA完整性檢測Figure1ElectrophoresisresultoftotalRNA

哉鍘＠??-△△Ct法計算GDF9基因在各個生殖器官的不同時期的相對表達量，β-actin為內(nèi)參基因校準。對獲得的數(shù)據(jù)利用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析。1.4GDF9基因表達定位的免疫組織化學檢測按常規(guī)法制作卵巢、輸卵管和子宮內(nèi)膜組織切片，按照UltraSensitiveS-....

圖2目的基因定量引物的PCR產(chǎn)物Figure2Thefragmentsizeoftargetgenes100bp

中國獸醫(yī)科學第50卷圖2目的基因定量引物的PCR產(chǎn)物Figure2ThefragmentsizeoftargetgenesA：β-actin；B：GDF9.GenBank上公布的綿羊GDF9（100217402）mRNA和β-actinmRNA的序列，設計特異性引物，其序列如下：....

圖3GDF9基因和β-actin基因的熔解曲線

等：綿羊生殖器官GDF9基因的表達研究ABCD圖4GDF9基因mRNA表達量及顯著性分析Figure4ExpressionandsignificanceanalysisofGDF9mRNA圖中標注相同小寫字母代表差異不顯著（P＞0.05），不同小寫字母代表差異顯著（0.05＞P＞....

圖4GDF9基因mRNA表達量及顯著性分析

第8期李佳蓉等：綿羊生殖器官GDF9基因的表達研究ABCD圖4GDF9基因mRNA表達量及顯著性分析Figure4ExpressionandsignificanceanalysisofGDF9mRNA圖中標注相同小寫字母代表差異不顯著（P＞0.05），不同小寫字母代表差異顯著（0....

本文編號：4001920