棉粕作為一種重要的蛋白原料，由于棉酚這一有毒物質(zhì)的存在限制了其在飼料生產(chǎn)上的應(yīng)用。本課題旨在研究棉酚對(duì)蛋雞肝臟脂質(zhì)代謝、氧化功能和肝臟解毒等作用的影響，探討了其影響途徑與機(jī)制，為生產(chǎn)提供一定的指導(dǎo)意義。 試驗(yàn)以體外培養(yǎng)原代肝細(xì)胞為試驗(yàn)對(duì)象，3日齡的海蘭褐蛋雞，取肝臟分離培養(yǎng)原代肝細(xì)胞，培養(yǎng)至48h后用于正式試驗(yàn)處理。原代培養(yǎng)的肝細(xì)胞不受體內(nèi)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的復(fù)雜影響，且能保持肝細(xì)胞的特異性功能以及對(duì)一些激素的反應(yīng)性能，因此選擇原代培養(yǎng)的肝細(xì)胞是研究肝臟脂質(zhì)代謝及其他調(diào)控機(jī)制的極好模型。 試驗(yàn)一：原代培養(yǎng)的蛋雞肝細(xì)胞，分成4組，按0，2.5，5，10mg/L添加棉酚的培養(yǎng)基處理24h。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與對(duì)照組相比，棉酚處理AST、ALT活性增強(qiáng)，細(xì)胞活性降低，VLDL分泌減少，MDA濃度增加；在棉酚處理中，隨著棉酚濃度的增加，AST活性和MDA濃度顯著增加，VLDL和細(xì)胞活性顯著降低。以上結(jié)果表明：棉酚能夠損傷肝細(xì)胞，影響肝臟脂質(zhì)代謝，并且呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性。 試驗(yàn)二：原代培養(yǎng)的蛋雞肝細(xì)胞，分成3組，按0，2.5，5mg/L添加棉酚的培養(yǎng)基處理。分別在處理后12、24、36、48h收集樣品，進(jìn)行樣品...

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1棉酚化學(xué)結(jié)構(gòu)（Nagalakshmietal.,2007）

圖1棉酚化學(xué)結(jié)構(gòu)（Nagalakshmietal.,2007）igure1chemicalstructureofgossypol（Nagalakshmietal.,2007）的代謝物消化道內(nèi)大部分不被吸收而直接排出，小部分的毒性主要由活性醛基和羥基產(chǎn)....

圖2總RNA電泳圖

每個(gè)孔中加Trizol1mL，反復(fù)吹打10min。氯仿200μL，漩渦混勻，靜止5mi加入500μL預(yù)冷異丙醇，混勻，靜清。mL預(yù)冷75%乙醇（DEPC水配制）在超凈臺(tái)中晾干，但不要讓RNANA。NA完整性，三條帶均清晰可見(jiàn)（

圖3β-actin標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

量=2-△△Ct”法來(lái)計(jì)算該基因的相對(duì)表達(dá)量（LivakandSchmittgen，2001增時(shí)，均按上述試驗(yàn)方法進(jìn)行，每次擴(kuò)增目的基因與持家基因同時(shí)擴(kuò)增，基因以及持家基因兩個(gè)Ct值，為保證試驗(yàn)嚴(yán)謹(jǐn)性每個(gè)樣品做兩個(gè)重復(fù)，值作為最終Ct值用于數(shù)據(jù)分析，使用“平均相對(duì)含....

圖4β-actin擴(kuò)增曲線(xiàn)

圖3β-actin標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)Figure3Standardcurveofβ-actin

本文編號(hào)：3992418