發(fā)布時(shí)間：2018-03-09 17:57

  本文選題：卵形巴貝斯蟲　切入點(diǎn)：熒光定量PCR　出處：《中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為建立一種檢測(cè)感染牛的卵形巴貝斯蟲的敏感、快速方法,本研究根據(jù)GenBank中登錄的卵形巴貝斯蟲18S rRNA保守區(qū)設(shè)計(jì)1對(duì)特異引物,通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了檢測(cè)卵形巴貝斯蟲熒光定量PCR方法。結(jié)果顯示,該方法可以特異地檢測(cè)出卵形巴貝斯蟲DNA,對(duì)瑟氏泰勒蟲、牛巴貝斯蟲和雙芽巴貝斯蟲DNA的檢測(cè)均為陰性;該方法的靈敏度可達(dá)1.26 copies/μL,比普通PCR靈敏度高100倍。組內(nèi)及組間重復(fù)試驗(yàn)的變異系數(shù)均小于3%。對(duì)60份臨床牛血液DNA樣本進(jìn)行檢測(cè),熒光定量PCR和常規(guī)PCR的陽(yáng)性檢出率分別為41.67%和33.33%。結(jié)果表明,本試驗(yàn)建立的熒光定量PCR方法可用于對(duì)卵形巴貝斯蟲定量分析和卵形巴貝斯蟲病的分子流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a sensitive and rapid method for the detection of Babes ovale in infected cattle, a pair of specific primers were designed according to the 18s rRNA conservative region of Babes ovum registered in GenBank, and the reaction conditions were optimized. A fluorescent quantitative PCR method was established for the detection of Babes ovale. The results showed that the method could specifically detect the DNA of Babes ovum, but the detection of DNA of Taylor serovar, Babes and Babes was negative. The sensitivity of this method can reach 1.26 copies/ 渭 L, which is 100 times higher than that of ordinary PCR. The coefficient of variation of repeated tests within and between groups is less than 3. 60 clinical bovine blood DNA samples were detected. The positive rates of fluorescent quantitative PCR and routine PCR were 41.67% and 33.33, respectively. The results showed that the fluorescent quantitative PCR method established in this study could be used for quantitative analysis of Babes ovale and molecular epidemiological investigation of oval Babes's disease.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院;預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】：吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20150623004TC) 吉林省重點(diǎn)學(xué)科培育項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字[2015]第x030號(hào)) 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院種子基金項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字[2014]第Z07號(hào))
【分類號(hào)】：S858.23

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本文編號(hào)：1589628