盡管大量研究顯示出腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細胞(AMCC)移植在疼痛治療中的顯著效果,但將其作為基本治療方法用于臨床還存在許多困難,其中有限的細胞來源是AMCC 移植廣泛應用的最大障礙。牛的腎上腺由于髓質(zhì)細胞產(chǎn)量大、易分離獲取而成為首選的供體來源。但利用目前通常采用的分離純化方法得到的AMCC,不僅細胞產(chǎn)率、純度低,而且工藝成本高,很難滿足臨床大量移植的需要。 為此,本文在現(xiàn)有AMCC 分離純化工藝基礎上,結合本實驗室的研究基礎和實驗條件,建立了牛腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細胞(BCC)的分離純化方法,并通過體外生物學特性及體內(nèi)移植止痛的實驗研究對BCC 功能進行了評價。 采用膠原酶灌注、機械分離及Percoll 非連續(xù)密度梯度離心的方法獲得純化的BCC,平均每個腎上腺可得到0.7～3.1×10～8個BCC,而且存活率在99%以上,純度大于95%。 隨著體外培養(yǎng)時間的延長,BCC 胞漿變暗、胞膜皺縮,細胞存活率及兒茶酚胺含量也逐漸下降,但葡萄糖和乳酸濃度無明顯變化。說明BCC 在體外培養(yǎng)具有分泌兒茶酚胺功能活性,但代謝速率極低。 通過對大鼠蛛網(wǎng)膜...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1腎上腺組織化學示意圖

圖1.1腎上腺組織化學示意圖Fig1.1Adrenalhistochemicalschematic

圖2.1機械解離法得到的BCC×200Fig2.1BCCisolatedbymechanicaldissociation×200

圖2.1機械解離法得到的BCC×200Fig2.1BCCisolatedbymechanicaldissociation×200

圖2.2膠原酶灌注消化分離得到的BCC×200Fig2.2BCCisolatedbycollagenaseperfusiondigestion×200

圖2.1機械解離法得到的BCC×200Fig2.1BCCisolatedbymechanicaldissociation×200

圖2.3Dextran非連續(xù)密度梯度離心純化得到的BCC×200Fig2.3BCCpurifiedbyDextrandiscontinuousdensitygradientcentrifugation×200

2.3Dextran非連續(xù)密度梯度離心純化得到的BCC×Fig2.3BCCpurifiedbyDextrandiscontinuousdensitygradiecentrifugation×200

本文編號：4036605