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HBV前C信號(hào)肽區(qū)熱點(diǎn)變異對(duì)HBeAg表達(dá)及對(duì)基因組復(fù)制的影響

發(fā)布時(shí)間:2025-03-18 03:25
  為研究HBV前C基因A1896,T1862,A1896+A1899及A1899變異對(duì) HBeAg表達(dá)及HBV基因組復(fù)制的影響,分別以EBO-plpp和P3.8Ⅱ質(zhì)粒為載體, 采用定點(diǎn)突變技術(shù)構(gòu)建了A1896,A1896+A1899,A1899及T1862點(diǎn)突變的HBV 前C/C區(qū)真核表達(dá)載體(EBO-preC/C)以及HBV全基因質(zhì)粒(P3.8Ⅱ),并轉(zhuǎn)染 HepG2細(xì)胞,其中以SEAP報(bào)告系統(tǒng)監(jiān)測(cè)P3.8Ⅱ的轉(zhuǎn)染效率。分別用ELISA和 western blot分析EBO-preC/C突變體對(duì)HBeAg及其前體表達(dá)的影響;用southern blot分析轉(zhuǎn)染P3.8Ⅱ突變體的細(xì)胞內(nèi)DNA,以檢測(cè)突變對(duì)HBV基因組復(fù)制的 影響。 結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染A1896,A1896+A1899,T1862點(diǎn)突變的EBO-preC/C突變 體細(xì)胞培養(yǎng)上清經(jīng)ELISA檢測(cè)HBeAg均為陰性,而A1899變異株及野株均為 陽(yáng)...

【文章頁(yè)數(shù)】:26 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

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本文編號(hào):4035931

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