發(fā)布時間：2024-11-30 23:04

　　弓形蟲(Toxoplasma gondii)是嚴重危害人類健康的機會致病性寄生蟲。目前，弓形蟲病研究的兩大熱點仍然是尋找敏感性高、特異性強的診斷抗原和有效的候選疫苗分子，基因重組技術為該研究提供了可行之路。已知生物體進化過程中，14-3-3家族是一組真核細胞表達的保守蛋白，細胞內(nèi)五十多種信號蛋白是其配體，通過結合激酶、磷酸酶、跨膜受體等多種配體成為信號轉導和細胞周期調(diào)控介質(zhì)。本課題從弓形蟲分裂增殖生命活動重要環(huán)節(jié)——細胞信號轉導途徑尋找重組診斷和候選疫苗分子。根據(jù)GenBank收錄的弓形蟲Beverley株貓腸上皮細胞期信號蛋白14-3-3 mRNA序列，設計并合成引物，RT-PCR，擴增出RH株速殖子14-3-3(Toxo14-3-3)基因，克隆入pGEM-T載體，經(jīng)酶切和PCR法鑒定及DNA測序證實；Toxo14-3-3具有一個長度為798bp的完整開放閱讀框(ORF)，編碼265個氨基酸，理論分子量31KDa，與GenBank收錄(編號為ABO12775)的弓形蟲14-3-3基因完全一致；將目的基因亞克隆入雙表達質(zhì)粒pBK-CMV、轉化宿主菌E.coliXL-1 blue，獲得pB...

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學位級別】：碩士

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