發(fā)布時間：2018-02-27 23:08

  本文關(guān)鍵詞： Cx43 Cx40 N-cadherin α-catenin 縫隙連接 增齡 掃描電鏡 激光共聚焦顯微鏡　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2005年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:本研究應(yīng)用HE 染色、免疫組織化學(xué)技術(shù)、激光共聚焦顯微鏡技術(shù)及消化掃描電鏡技術(shù),對胚胎、新生、幼年、成年、中年及老年正常大鼠左心室心肌細(xì)胞閏盤的立體構(gòu)筑和連接蛋白Connexin43(Cx43)、Connexin(Cx40)、N-cadherin、α-catenin 含量、分布的增齡變化進(jìn)行了研究,以期為人類心臟發(fā)育相關(guān)研究提供生物學(xué)資料。 方法:本實驗選取SD 大鼠胎鼠5 只(孕20 天)和出生后雄性SD 大鼠,按年齡分為新生組(出生3～5 天),幼年組(出生20～25 天),體重25±4g;青年組(出生3～4 月),體重250±10g;中年組(出生6～8 月),體重350±10g和老年組(出生13～15 月),體重450±10g,每組各5 只。1、選取上述6 組動物的心臟經(jīng)主動脈灌流4%多聚甲醛后,常規(guī)石蠟包埋,橫斷面連續(xù)系列切片,片厚5μm。HE 染色、免疫組織化學(xué)技術(shù)結(jié)果結(jié)合圖像分析系統(tǒng)分別檢測大鼠心肌Cx43、Cx40、N-cadherin、α-catenin 的表達(dá)情況,并計量陽性表達(dá)的平均光密度值(OD/um~2)。2、激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)選取青年組動物,取材方法同前,采用Cx43 標(biāo)紅色熒光、Cx40 標(biāo)綠色熒光進(jìn)行熒光雙重標(biāo)記。3、掃描電鏡技術(shù)選取青年、中年和老年組,心臟樣品取心外膜側(cè)0.5×0.5×0.3 cm~3 大小,經(jīng)6N 氫氧化鈉水溶液620C 消化10min,超聲波處理1min,常規(guī)脫水、干燥、鍍膜后進(jìn)行掃
[Abstract]:Objective: to study the effects of HE staining, immunohistochemistry, laser confocal microscopy and digestive scanning electron microscopy on embryo, neonate, infancy and adulthood. The stereoarchitecture of intercalated disc of left ventricular cardiomyocytes in middle-aged and aged normal rats and the changes of Connexin43Cx43Cx43Cx40Cx40, N-cadherin, 偽 -catenin content and distribution were studied in order to provide biological data for the study of human heart development. Methods: in this experiment, 5 SD rats (20 days pregnant) and 5 postnatal male SD rats were selected. According to age, they were divided into newborn group (35 days old), young group (20 ~ 25 days old, weight 25 鹵4 g), youth group (3 ~ 4 months old, weight 250 鹵10 g), middle age group (68 months old, 350 鹵10 g) and elderly group (13 ~ 15 months old, 450 鹵10 g, 5 rats in each group). The hearts of the above 6 groups were perfused with 4% paraformaldehyde through aorta. The expression of Cx43 Cx40 N-cadherin and 偽 -catenin in rat myocardium was detected by immunohistochemical technique and image analysis system. The average optical density of the positive expression was measured. The young animals were selected by laser scanning confocal microscopy (LSCM). The method was the same as that before. The green fluorescence labeled with Cx43 was used to carry out the double labeling. 3, and the young people were selected by scanning electron microscopy. In the middle-aged and elderly groups, the epicardial side of the heart was taken as 0.5 脳 0. 5 脳 0. 3 cm~3, digested by 620C sodium hydroxide solution for 10 minutes, then treated with ultrasound for 1 min, then dehydrated, dried, and scanned after coating.
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R33

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本文編號：1544715