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犬骨髓間充質(zhì)干細胞向瓣膜間質(zhì)細胞誘導分化的實驗研究

發(fā)布時間:2018-02-26 21:36

  本文關(guān)鍵詞: 組織工程 心臟瓣膜 去細胞瓣膜 骨髓間充質(zhì)干細胞 誘導分化 間質(zhì)細胞 出處:《第四軍醫(yī)大學》2005年碩士論文 論文類型:學位論文


【摘要】:瓣膜置換術(shù)是治療瓣膜疾病的有效方法,但現(xiàn)有的人工心臟瓣膜都有不容忽視的缺點:機械瓣需要終生抗凝;生物瓣膜易鈣化衰敗有的仍需抗凝;同種異體瓣膜來源有限。組織工程心臟瓣膜(TEHV)按照組織工程學方法,利用可降解材料構(gòu)建瓣膜支架,種植的自體細胞在支架上生長并產(chǎn)生細胞外基質(zhì)(ECM),逐漸形成活的瓣膜組織。它有良好的組織相容性,可避免血栓栓塞及鈣化衰敗等問題,有自我修復能力,隨機體生長,因此被認為是一種理想的瓣膜替代物。種子細胞是組織工程瓣膜的上游問題,血管間質(zhì)細胞因與瓣膜間質(zhì)細胞同處于血流環(huán)境而首先被考慮作為組織工程瓣膜間質(zhì)的種子細胞,但是其原代培養(yǎng)相對繁瑣且要犧牲一根完整血管,為有創(chuàng)性,和此相比,骨髓間充質(zhì)干細胞獲取相對容易,創(chuàng)傷小、易擴增、無免疫原性且具多分化潛能而引起關(guān)注。在本研究中,我們就骨髓間充質(zhì)干細胞誘導分化,并將誘導后骨髓間充質(zhì)細胞與血管間質(zhì)細胞作為組織工程瓣膜種子細胞進行了對比研究工作。本研究分為三部分: 第一部分:用Percoll密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞并經(jīng)貼壁培養(yǎng)純化而得犬骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)、對其進行鑒定、觀察其生物學特性,并對犬BMSCs進行誘導分化,對誘導而來的細胞,同樣也觀察了其生物學性能,然后作進一步的鑒定。并對誘導細胞進行凍存復蘇,觀察其復蘇率。結(jié)果:經(jīng)Percoll液分離的骨髓單核細胞,經(jīng)貼壁
[Abstract]:Valvular replacement is an effective method for the treatment of valvular diseases, but the existing artificial heart valves have some shortcomings that can not be ignored: mechanical valves need lifetime anticoagulant, biological valves are prone to calcification decay and still need anticoagulant. The tissue engineering heart valve (TEHVV) uses biodegradable materials to construct the valve scaffold according to the tissue engineering method. The implanted autologous cells grow on the scaffold and produce extracellular matrix (ECM), which gradually form live valve tissue. It has good histocompatibility, can avoid thromboembolism and calcification decay, and has the ability to repair itself and grow at random. Seed cells are the upstream problem of tissue engineering valves. Vascular interstitial cells are considered as seed cells of tissue engineering valves because they are in the same blood flow environment as valve interstitial cells. But its primary culture is relatively cumbersome and requires the sacrifice of a complete blood vessel to be invasive. Compared with this, bone marrow mesenchymal stem cells are relatively easy to obtain, have less trauma, and are easy to expand. In this study, we induced differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). The mesenchymal cells and vascular mesenchymal cells were used as seed cells of tissue engineering valve. The first part: bone marrow mononuclear cells were isolated by Percoll density gradient centrifugation and purified by adherent culture. BMSCs were identified, their biological characteristics were observed, and canine BMSCs was induced to differentiate. The biological properties of induced cells were also observed and further identified. The induced cells were resuscitated by cryopreservation and the rate of resuscitation was observed. Results: bone marrow monocytes isolated from Percoll solution were adherent to the wall.
【學位授予單位】:第四軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R329.2

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本文編號:1539764

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