本文關鍵詞： 流感病毒 疫苗 甲醛 毛細管氣相色譜法 -二硝基苯肼 衍生物　出處：《中國生物制品學雜志》2014年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的采用衍生毛細管氣相色譜法測定流感病毒裂解疫苗中游離甲醛含量,并進行驗證。方法應用2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine,DNPH)衍生流感病毒裂解疫苗中的游離甲醛,對其衍生化條件進行優(yōu)化后,采用毛細管氣相色譜法直接進樣測定。色譜條件:色譜柱為HP-5毛細管色譜柱,初始溫度為150℃,保持1 min,以20℃/min的速率升溫至250℃,保持10 min;檢測器為電子捕獲檢測器,溫度為350℃,尾吹60 ml/min;進樣口溫度為300℃,隔墊吹掃3 ml/min,分流比50∶1;載氣為氮氣,流量為2.5 ml/min;進樣量1μl。確定建立的方法的檢測限和定量限,進行線性、專屬性、準確度、精密度及穩(wěn)定性驗證,并用建立的方法檢測2個企業(yè)共11批樣品中游離甲醛含量。結果確定的最佳衍生化條件為:量取對照品溶液和供試品溶液各1 ml,分別置15 ml離心管中,加入DNPH鹽酸溶液1 ml,渦旋1 min;超聲5 min;60℃衍生45 min;冰浴冷卻,加入環(huán)己烷2 ml,渦旋萃取1 min;靜置分層,收集上層液1 ml,注入氣相色譜儀進行檢測。該方法的最低檢測限為0.1μg/ml,定量限為0.2μg/ml,游離甲醛含量在1~30μg/ml范圍內(nèi),與峰面積呈良好的線性關系(r2=0.999 8);該色譜分離條件對甲醛的衍生物甲醛2,4-二硝基苯腙有較好的專屬性;3個不同濃度樣品平均加樣回收率為107%,相對標準偏差(relative standard deviation,RSD)為2.11%;對照品溶液連續(xù)進樣6次的峰面積平均值為40 652.8,RSD為0.004%;甲醛衍生物溶液凍存7 h內(nèi)的峰面積平均值為40 257.35,RSD為1.57%。11批流感病毒裂解疫苗的游離甲醛含量均符合《中國藥典》三部(2010版)規(guī)定,均不高于50μg/ml。結論建立了衍生毛細管氣相色譜法檢測流感病毒裂解疫苗中游離甲醛含量,該方法操作簡單,精密度、穩(wěn)定性、準確度好,專屬性強,可用于流感病毒裂解疫苗中游離甲醛含量的測定。
[Abstract]:Objective to determine and verify the content of free formaldehyde in influenza virus lytic vaccine by derivative capillary gas chromatography. After optimizing the derivatization conditions, the capillary gas chromatography was used to determine the sample directly. The chromatographic conditions were as follows: the chromatographic column was HP-5 capillary column, the initial temperature was 150 鈩，

本文編號：1516911