本文關(guān)鍵詞：盆腔炎顆粒對慢性盆腔炎大鼠局部組織病理學(xué)及子宮TNF-α、ICAM-1表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河北醫(yī)科大學(xué)》 2010年

轉(zhuǎn)染Megsin基因?qū)μ悄虿⌒∈竽I組織中P38MAPK、MCP-1和ICAM-1的影響

任廣偉  

【摘要】： 目的:糖尿病(diabetes mellitus,DM)及其并發(fā)癥已經(jīng)成為一個(gè)公眾的健康問題。糖尿病腎病(diabetic nephropathy, DN)是糖尿病最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一,是導(dǎo)致終末期腎衰竭(end-stage renal failure,ESRF)的主要原因。盡管我們對糖尿病腎病做了大量的研究,但腎臟損傷發(fā)生和發(fā)展的確切機(jī)制目前尚不清楚。如何早期有效的防治糖尿病腎病是目前國內(nèi)外學(xué)者高度關(guān)注的課題。 最近的研究報(bào)道糖尿病腎病的發(fā)生與眾多的炎癥因子和前炎癥細(xì)胞因子的參與關(guān)系密切,如急性期反應(yīng)蛋白、趨化因子和粘附分子等。Megsin是一種系膜細(xì)胞優(yōu)勢表達(dá)基因,定位于18q21.3,與絲氨酸蛋白酶結(jié)合,發(fā)揮絲氨酸蛋白酶抑制劑(serine protease inhibitor,serpin)的活性。Serpin的作用包括凝血、纖維蛋白溶解、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞外基質(zhì)代謝、細(xì)胞分化、增殖和凋亡等。推測megsin作為serpin的成員之一,可能參與了各種腎小球疾病中的多種紊亂進(jìn)程。探討megsin在糖尿病小鼠腎組織中的作用對于揭示糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制具有重要意義。 本課題擬通過鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)建立糖尿病小鼠模型,并通過尾靜脈質(zhì)粒注射法,將megsin質(zhì)粒、megsin-siRNA質(zhì)粒及空質(zhì)粒經(jīng)由尾靜脈注入糖尿病小鼠體內(nèi),以此分成三組,采用單側(cè)腎切除組為正常對照組,觀察不同組腎臟病變的程度,并采用免疫組化和western- blot方法檢測不同組megsin、MCP-1、ICAM-1、磷酸化P38MAPK和P38之間的關(guān)系,研究megsin參與DN發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制,可能為臨床治療糖尿病腎病提供新的干預(yù)途徑。 方法:選取清潔級健康雄性12周齡CD-1小鼠,共60只,行單側(cè)腎切除,隨機(jī)抽取45只腹腔注射STZ(溶于0.1mol/L檸檬酸緩沖液,濃度2%,pH值4.5,注射劑量150mg/kg)方法制備糖尿病小鼠模型,48小時(shí)后測定血糖、尿糖,血糖≥16.7mmol/L且尿糖持續(xù)陽性確定為糖尿病小鼠模型,隨機(jī)將檢測成模的45只糖尿病小鼠分為糖尿病+空質(zhì)粒導(dǎo)入組(B組)、糖尿病+megsin質(zhì)粒組(C組)和糖尿病+siRNAmegsin質(zhì)粒組(D組),每組15只,將只做單側(cè)腎切除的15只小鼠作為正常對照組(A組),采用尾靜脈注射導(dǎo)入質(zhì)粒載體,每周注射1次,整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由飲食,不使用胰島素及其它降糖藥物。于實(shí)驗(yàn)開始后12周末收集血、尿及腎組織標(biāo)本,檢測血肌酐、24h尿蛋白定量及腎重/體重比值;石蠟切片行HE、PAS和MASSON染色觀察腎小球病理改變,免疫組織化學(xué)染色和Western-bloting檢測megsin、MCP-1、ICAM-1、磷酸化P38MAPK和P38表達(dá)情況,結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間差異性比較采用單因素方差分析和q檢驗(yàn),顯著性水平等于0.05,應(yīng)用SPSS13.0軟件包對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果:1 B組、C組、D組小鼠注射STZ 4～5天后即出現(xiàn)多飲、多食、多尿表現(xiàn),三組無明顯差異,而A組則無上述情況出現(xiàn)。12周末B組小鼠尿蛋白定量、血肌酐和腎重/體重比值升高(P0.01),C組升高更為明顯(P0.01),D組尿蛋白和腎重/體重比值較B組降低(P0.01)。 2光鏡HE顯示2周和4周末B組腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)目較A組增多(P0.01),C組增多更顯著(P0.01),12周末B組和C組小鼠腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)目減少,但仍高于A組(p0.01),D組腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)目少于同期B組,有顯著差異性(p0.01);光鏡HE、PAS、MASSON染色顯示,第12周末B組腎小球體積增大,基底膜增厚,細(xì)胞外基質(zhì)積聚,D組較B組病變減輕,C組病變最嚴(yán)重 3免疫組化和western blot結(jié)果顯示2周末B組Megsin、MCP-1、ICAM-1和磷酸化P38MAPK表達(dá)增強(qiáng),C組變化更顯著,D組較B組表達(dá)減弱,組間差異有顯著性意義(p0.01,p0.05);4周末上述各指標(biāo)變化更為明顯,組間比較有顯著性差異(p0.01,p0.05);12周末B組P38MAPK表達(dá)水平下降但仍高于A組和D組,弱于C組(p0.01,p0.05),其他指標(biāo)如Megsin、MCP-1和ICAM-1表達(dá)進(jìn)一步增強(qiáng),C組增多更明顯,D組表達(dá)較B減少(p0.01,p0.05)。 結(jié)論:1 megsin在糖尿病小鼠腎組織中表達(dá)增強(qiáng),可能與細(xì)胞外基質(zhì)積聚、系膜細(xì)胞增殖、炎癥細(xì)胞浸潤、腎臟肥大及腎功能受損等相關(guān),推測megsin在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。 2過表達(dá)megsin糖尿病小鼠腎組織中MCP-1、ICAM-1和P38MAPK表達(dá)明顯增強(qiáng),提示megsin可能與上述因子發(fā)揮協(xié)同效應(yīng),促進(jìn)了早期糖尿病腎損害的發(fā)生與發(fā)展,但其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究闡明。 3通過megsin siRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,megsin表達(dá)抑制后,MCP-1、ICAM-1和P38MAPK的表達(dá)減少,腎功能受損和腎組織病變減輕,顯示抑制megsin的表達(dá)可以減輕糖尿病小鼠腎臟損害,為早期干預(yù)提供了一條新途徑。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R587.2
【目錄】：

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6 張衛(wèi)華;劉華東;劉舟;黃仕文;;黃連溫膽湯對2型糖尿病小鼠血糖的影響[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2011年08期

7 徐毅;;中西醫(yī)結(jié)合治療病毒性心肌炎臨床研究[J];中國中醫(yī)急癥;2011年08期

8 郭沛艷;于德民;劉德敏;;α-硫辛酸對糖尿病小鼠骨骼肌谷氨酰胺6磷酸果糖轉(zhuǎn)氨酶1表達(dá)的影響[J];中國糖尿病雜志;2007年10期

9 宗惠;劉瑞芬;于源源;;盆腔炎顆粒對慢性盆腔炎大鼠局部組織病理學(xué)及子宮TNF-α、ICAM-1表達(dá)的影響[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2011年08期

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3 鄔曉婧;張愛珍;;低分子柑桔果膠粉對糖尿病小鼠血糖血脂調(diào)節(jié)作用研究[A];2005年浙江省內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

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6 吳貽松;陸紅麗;韓燕飛;郭新;黃旭;許文燮;;NPs信號通路在糖尿病小鼠胃動(dòng)力學(xué)障礙中的作用及其機(jī)制[A];中國生理學(xué)會第23屆全國會員代表大會暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文摘要文集[C];2010年

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1 沈會　譯;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年

2 編譯 傳說;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

3 車今智；傅德賢；歐陽藩;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

4 由廣旭;周琴;李衛(wèi)平等;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

5 陶春祥;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

6 記者 王丹;[N];健康報(bào);2009年

7 何屹;[N];科技日報(bào);2011年

8 孫明瑜；謝鳴；張娜;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

9 董飛俠 浙江省溫州市中醫(yī)院;[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2009年

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1 呂琳;黃芪甲苷對高脂加鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的降血糖作用及其作用機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

2 高曉東;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對糖尿病小鼠胰島功能的影響及作用機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 唐忠海;桑葉功能成分的分離及其水提物對Ⅰ-糖尿病小鼠治療作用的研究[D];中南大學(xué);2012年

4 李沁;脈沖射頻能量（PRFE）加快糖尿病小鼠傷口愈合的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

5 胡強(qiáng);乳化異氟醚對離體心肌、大隱靜脈橋及ICAM-1影響作用的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

6 歐陽建;同基因造血干細(xì)胞移植治療1型糖尿病小鼠的療效及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

7 吳鳳林;細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）靶向超聲分子成像評價(jià)大鼠移植腎急性排斥反應(yīng)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

8 李月紅;抗ICAM-1單克隆抗體與單鏈抗體的制備及其生物學(xué)特性研究[D];吉林大學(xué);2005年

9 李航;Nrf2-ARE信號通路對Ⅰ型糖尿病小鼠腎臟氧化應(yīng)激的影響及其作用機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

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