目的在建立大鼠周圍神經(jīng)損傷模型的基礎(chǔ)上，研究Wallerian變性與干細(xì)胞歸巢之間的關(guān)系，周圍神經(jīng)損傷后干細(xì)胞向神經(jīng)斷端歸巢的現(xiàn)象及潛在機(jī)制，以及干細(xì)胞歸巢后的轉(zhuǎn)歸，為周圍神經(jīng)損傷的修復(fù)探索新的思路。利用蛋白組學(xué)技術(shù)建立感覺神經(jīng)和運(yùn)動神經(jīng)的雙向電泳（2-DE）圖，比較周圍感覺神經(jīng)和運(yùn)動神經(jīng)內(nèi)蛋白質(zhì)的表達(dá)差異，為周圍神經(jīng)損傷后趨化性再生的機(jī)制研究提供依據(jù)。 方法1.使用PCR，Western blot，免疫熒光等方法鑒定趨化因子SDF-1在Wallerian變性的損傷神經(jīng)遠(yuǎn)端及其特異性受體CXCR4在BMSCs中的表達(dá)情況。 2.用Transwell細(xì)胞遷移模型，檢驗離斷后發(fā)生Wallerian變性的遠(yuǎn)端神經(jīng)組織勻漿對BMSCs遷移的趨化作用，使用SDF-1/CXCR4軸特異性阻斷劑AMD3100檢驗SDF-1在其中扮演的角色。 3.通過向大鼠坐骨神經(jīng)切斷/吻合模型的尾靜脈注射移植表達(dá)RFP的BMSCs，模擬BMSCs向神經(jīng)組織歸巢的過程，使用熒光成像和病理學(xué)方法觀察BMSCs是否通過機(jī)體血液循環(huán)歸巢至損傷的神經(jīng)組織局部，并進(jìn)一步使用特異性阻斷劑AMD3100驗證SDF-...

【文章頁數(shù)】：199 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1周圍神經(jīng)損傷Wallerian變性示意圖

第一章引言的增殖等，并產(chǎn)生包括神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子等在內(nèi)的多種細(xì)胞因子，這些分子的濃度梯度可吸引神經(jīng)損傷后的再生的軸突向遠(yuǎn)端神經(jīng)或靶器官生長[4]，同時也可吸引參與神經(jīng)修復(fù)的多種細(xì)胞的增殖和遷移（圖1-1）。神經(jīng)斷裂后的24小時內(nèi)，在細(xì)胞因子的作用下，所有遠(yuǎn)端....

圖2-1大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）的體外培養(yǎng)及傳代觀察

圖2-1大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）的體外培養(yǎng)及傳代觀察。A：全骨髓分離法大鼠BMSCs原代培養(yǎng)第6天（倒置顯微鏡×100）；B：大鼠BMSCs傳代至第3代第5天（倒置顯微鏡×100）。大鼠RFP-BMSCs在解凍接種4h后開始貼壁，24h后開始增殖，細(xì)胞集落增....

圖2-2表達(dá)紅色熒光蛋白大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞（RFP-BMSCs）的體外培養(yǎng)及傳代觀察

圖2-1大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞（BMSCs）的體外培養(yǎng)及傳代觀察。A：全骨髓分離法大鼠BMSCs原代培養(yǎng)第6天（倒置顯微鏡×100）；B：大鼠BMSCs傳代至第3代第5天（倒置顯微鏡×100）。大鼠RFP-BMSCs在解凍接種4h后開始貼壁，24h后開始增殖，細(xì)胞集落增....

圖2-3流式細(xì)胞儀（FCM）檢測BMSCs表面標(biāo)志物

第二章骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)、鑒定和CXCR4的表達(dá)2.4.2大鼠BMSCs/RPF-BMSCs的流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果流式細(xì)胞儀檢測BMSCs表面標(biāo)志，其中造血干細(xì)胞表面標(biāo)志物CD11b（2.43%）、CD45（1.64%）表達(dá)陰性，而基質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物CD....

本文編號：4056946