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柯薩奇病毒A組16型實(shí)驗(yàn)性減毒活疫苗關(guān)鍵工藝研究

發(fā)布時(shí)間:2024-06-12 02:05
  手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一種由多種腸道病毒引起的急性傳染病,主要感染5歲以下嬰幼兒,臨床表現(xiàn)為手、足、口等部位發(fā)生皮疹、皰疹,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致腦干腦炎、無菌性腦膜炎、肺水腫甚至死亡。腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯薩奇病毒 A 組 16 型(Coxsackievirus A16,CA16)為引起手足口病的兩種主要病原體。以往的報(bào)道顯示,手足口病的嚴(yán)重病例主要由EV71引起,但越來越多的流行病學(xué)調(diào)查表明,CA16引起的癥狀不再是溫和的,也可引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥,甚至導(dǎo)致死亡。目前CA16疫苗的研究還沒有取得突破性進(jìn)展,尚無進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的報(bào)導(dǎo),并且EV71疫苗對CA16感染也沒有保護(hù)作用。因此,CA16疫苗對手足口病的全面防控具有重要的意義。減毒活疫苗的研究是CA16疫苗研究的一個(gè)方向,而凍干劑型的是又是研究的重點(diǎn)。因此,本論文主要針對CA16減毒活疫苗生產(chǎn)的抽提純化工藝、凍干工藝等關(guān)鍵工藝進(jìn)行深入研究,并對抽提純化工藝和凍干工藝進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià),為今后凍干CA16減毒性疫苗的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。氯仿抽提純化工藝結(jié)...

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1病毒液與氯仿不同體積比PBS洗滌上清樣品病毒感染性滴度??1:?CA16病毒原液;2:氯仿抽提后上清液;3:?PBS洗滌第1次后上清液;4:?PBS洗滌第2次后??

圖1病毒液與氯仿不同體積比PBS洗滌上清樣品病毒感染性滴度??1:?CA16病毒原液;2:氯仿抽提后上清液;3:?PBS洗滌第1次后上清液;4:?PBS洗滌第2次后??

滌次數(shù)的增多,其病毒含量逐漸降低,但在洗滌第5次時(shí)上清樣中病毒感染性滴度仍??為4.25?lgCCID5〇/ml? ̄4.75?IgCC丨D50/ml,一抽五洗后混合液中的病毒感染性滴度為??7.125?IgCClDWm卜7.75?IgCCIDWml?(如圖1所示)。病毒液與氯仿按....


圖3氯仿一抽多洗樣品中蛋白含量的測定結(jié)果??1:氯仿抽提后上清;2:?:?PBS洗滌第1次后上清液;3:?PBS洗滌第2次后上清液;4:?PBS洗??

圖3氯仿一抽多洗樣品中蛋白含量的測定結(jié)果??1:氯仿抽提后上清;2:?:?PBS洗滌第1次后上清液;3:?PBS洗滌第2次后上清液;4:?PBS洗??

行一抽多洗后混合液中蛋白含量的檢測。蛋白含量結(jié)果顯示,氯仿抽提可以大大降??低殘余蛋白含量,PBS洗滌第2次的上清液中蛋白含量極低為51.13?yg/m丨?68.98?u??g/ml?(如圖3所示);而病毒液與氯仿三個(gè)不同體積比對蛋白去除率沒有明顯影響,??24??


圖6不同組分含明膠保護(hù)劑凍干產(chǎn)品圖

圖6不同組分含明膠保護(hù)劑凍干產(chǎn)品圖

■凍干前病毒感染性滴虔?■凍干后病毒感染性滴虔??Ettl?U?f?t??IE:?j??I::?■■■■■■_.??i?n?in?iv?v?vi?vn??圖5不同組分含明膠保護(hù)劑凍干樣品滴度降結(jié)果??Fig.5.?The?results?of?different?componen....


圖9不同組分無明膠保護(hù)劑凍干產(chǎn)品圖

圖9不同組分無明膠保護(hù)劑凍干產(chǎn)品圖

■凍干前病毒感染性滴度?■凍干后病毒感染性滴度??〇?2.75??E?9.00「|?I?3?13?”S?138??I8'00?r-n?^3?Pn?2〇〇??麵?lirnm??ABCDEFGH??圖8不同組分無明膠保護(hù)劑凍干后樣品的滴度降結(jié)果??Fig.8.?The?results....



本文編號:3993058

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