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樹鼩免疫細胞交叉反應(yīng)性抗體篩選與表型分析

發(fā)布時間:2024-05-23 04:31
  目的:樹鼩是一種小型哺乳動物,屬攀鼩目、樹鼩科。樹鼩的親緣關(guān)系與靈長類很接近,其實驗研究結(jié)果易于應(yīng)用到人類的醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究當中?茖W(xué)家們成功地馴化和培育了一定數(shù)量的樹鼩,并廣泛用于疾病模型的建立。同時,還建立了一系列有關(guān)樹鼩作為實驗動物的標準。免疫系統(tǒng)在機體抵抗外界環(huán)境中各類微生物、毒素和致癌物質(zhì)等方面都起著非常重要的作用,免疫應(yīng)答的監(jiān)測是動物模型應(yīng)用中不可缺少的部分。而樹鼩免疫系統(tǒng)信息的缺乏,導(dǎo)致我們不能深入地研究疾病的致病機理,以及研究疾病的防治措施。因此,對于樹鼩的免疫系統(tǒng)的研究與分析顯得尤為重要,本文主要對樹鼩免疫細胞表型進行分析和研究。方法:1.比較四種試劑裂解樹鼩外周血紅細胞的效果,然后選取可以使細胞成群分布、分界明顯,而且紅細胞裂解更為完全的裂解液,對其進行優(yōu)化,包括裂解液與全血的體積比、單次裂解時間、裂解次數(shù)和外周血起始體積等。2.基于“針對某一種屬抗原的抗體可能存在與其它種屬的同類抗原的交叉反應(yīng)性”,我們從商業(yè)化的抗體中進行抗體篩選。通過流式細胞分析進行抗體的交叉反應(yīng)性分析,找出反應(yīng)性最強的抗體克隆。3.利用篩選出的具有交叉反應(yīng)性的抗體對樹鼩免疫細胞表型進行分析。通過...

【文章頁數(shù)】:117 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.樹齣研宄現(xiàn)狀與展望??Figure?1.?Progress?and?prospects?of?tree?shrew?research??

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神經(jīng)系統(tǒng)I7]、視覺系統(tǒng)[8]、動物模型和分類學(xué)[1G]等方面己經(jīng)進行了大量的研究,??并且有了較為全面和深入的了解,而在基因克隆和功能[u,12]以及感染和免疫學(xué)⑴]??等領(lǐng)域的還需要進一步深入研究(圖1)。近年來,對樹駒的研究呈現(xiàn)出較為全??面、快速的現(xiàn)象,可以預(yù)見樹駒將會在....


圖2.1樹齣組織細胞流式分析模式圖??Figure?1.3?Structure?diagram?of?cells?from?tree?shrew?analyzed?via?flow?cytometry??

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100?P1,一84ul(液)里加入16?ul抗體,然后從第一管樣品中取出50?ul加入第二管的50?ul稀??釋液中,接下來從第二管中取出50?ul加入至第三管的50?ul稀釋液中,最后從??第三管中取出50?y丨加入至第四管的50?p?1稀釋液中。最后向每個管中加入50?u?....


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在吉母薩染色實驗中,與未標記PE熒光抗體的樣品相比,磁珠分選后的??CD20+細胞樣品中,具有比例較高的高核質(zhì)比細胞,但磁珠分選出的樹駒CD20+??細胞較少(圖2.11)。??PE?DAPI?Merge??■■■??unstained!?;?.??Before?、?!?;?::....


圖2.10磁珠分選后免疫熒光檢測??Figure?2.10?Immunofluorescence?detection?after?magnetic?separation??注:a小鼠脾臟(20X),b樹駒脾臟(20X)

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*?*??圖2.11樹駒骨髓樣品磁珠分選后吉母薩分析??Figure?2.11?Gemma?staining?of?bone?marrow?sample?from?tree?threw?after?magnetic?separation??注:a.unstained?樣品(100....



本文編號:3981004

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