發(fā)布時(shí)間：2024-05-15 06:03

　　第一部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、純化及鑒定目的:作為一種多能干細(xì)胞——骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),因其具有取材簡便、易于體外分離培養(yǎng)與擴(kuò)增、具有自我更新復(fù)制、多向分化的潛能以及自體移植無免疫排斥等優(yōu)點(diǎn)已成為常見的“種子細(xì)胞”,被廣泛應(yīng)用于組織工程研究。眾所周知,BMSCs并不屬于無限傳代的細(xì)胞系,因此在研究和應(yīng)用BMSCs時(shí),首先需要將BMSCs從供體中提取、分離,經(jīng)過培養(yǎng)、純化及鑒定后,方可用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究中。常見的關(guān)于BMSCs的分離方法包括有貼壁分離篩選法、梯度密度離心法、流式細(xì)胞儀或免疫磁珠分選法等。其中,貼壁分離篩選法操作簡便,且對細(xì)胞的損傷相對較小,是研究者常用的比較經(jīng)典的分離方法�；�于此,本研究首先采用貼壁分離篩選法對BMSCs進(jìn)行分離,經(jīng)培養(yǎng)、純化及擴(kuò)增后對細(xì)胞從以下三個(gè)方面進(jìn)行鑒定:(1)倒置相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞的生長特點(diǎn);(2)通過流式細(xì)胞術(shù)對所培養(yǎng)細(xì)胞表面分子CD29、CD90以及CD45的表達(dá)情況進(jìn)行聯(lián)合檢測;(3)對所培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo),使之定向向骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及軟骨細(xì)胞方向分化,鑒定其多向分化能力。方法:本研究所需的BMSCs均取自3周齡清...

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮寫
引言
第一部分 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、純化及鑒定
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 TGF-β1體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    附表
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三部分 外源基因TGF-β1轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過抑制Wnt/β-catenin信號通路啟動(dòng)心肌分化
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    附表
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
綜述 TGF-β1信號通路和Wnt信號通路對大鼠心肌梗死后梗死修復(fù)的影響
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3974014