目的觀察PAPR-1/TNF-α信號通路在脊神經(jīng)結(jié)扎模型大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞內(nèi)的表達情況,并探究其與神經(jīng)病理性痛的發(fā)生發(fā)展關(guān)系。方法將大鼠第5腰神經(jīng)(L5)進行結(jié)扎構(gòu)建慢性神經(jīng)病理性痛模型,Von-Frey細絲檢測各組大鼠的機械性痛閾值,免疫組織化學(xué)染色和Western blot技術(shù)半定量和定量分析脊髓背角內(nèi)PAPR-1和TNF-α的表達情況。結(jié)果與正常組相比,假手術(shù)組大鼠疼痛閾值未見顯著改變(P>0.05),脊神經(jīng)結(jié)扎后大鼠的術(shù)側(cè)后足的疼痛閾值顯著降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且在術(shù)后2周內(nèi),疼痛閾值均保持在較低水平。免疫熒光組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,PAPR-1和TNF-α主要表達于脊髓背角內(nèi)星形膠質(zhì)細胞中,Western blot結(jié)果進一步顯示,造模后大鼠脊髓背角內(nèi)GFAP、PAPR-1及TNF-α水平顯著高于正常組和假手術(shù)組(P<0.05)。結(jié)論 PAPR-1/TNF-α信號通路主要表達于脊髓背角內(nèi)星形膠質(zhì)細胞中,且在慢性神經(jīng)病理性痛的維持階段保持較高表達水平,可能參與了慢性痛的發(fā)生和發(fā)展,臨床治療中具有一定的理論參考意義。

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圖1造模前、后大鼠的痛行為改變

與正常組相比，假手術(shù)組大鼠痛閾未見顯著改變（P>0.05），脊神經(jīng)結(jié)扎后大鼠的術(shù)側(cè)后足的痛閾顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），且在術(shù)后2周內(nèi)，疼痛閾值均保持在較低水平（圖1）。2.2大鼠脊髓背角內(nèi)PAPR-1/TNF-α的定位和定量分析

圖2大鼠脊髓背角內(nèi)PAPR-1/TNF-α的定位（A、B）和定量分析

免疫熒光組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，PAPR-1和TNF-α主要表達于脊髓背角內(nèi)星形膠質(zhì)細胞中（圖2A-A’’和B-B’’),Westernblot結(jié)果進一步顯示，造模后大鼠脊髓背角內(nèi)GFAP、PAPR-1及TNF-α水平顯著高于正常組和假手術(shù)組（P<0.05或P<0.01，圖2C-....

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