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ELA經(jīng)PI3K/AKT和MARK通路促進MSCs增殖和遷移

發(fā)布時間:2020-12-10 07:52
  目的:觀察ELABELA(ELA)對骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和遷移能力的影響,并探討可能調(diào)控機制。方法:將體外培養(yǎng)的MSCs分為Control組、ELA處理組(50 n M、500 n M、5μM、10μM)。MTS法檢測細胞增殖,Transwell法檢測細胞遷移。Western Blot法檢測Control組、5μM ELA、5μM ELA+LY294002(PI3K/AKT通路抑制劑)組、5μM ELA+U0126(MARK通路抑制劑)組中AKT、p-AKT、ERK1/2、p-ERK1/2、Cyclin D1的表達情況。結(jié)果:與Control組相比,ELA處理組(50 n M、500 n M、5μM)MSCs的增殖及遷移能力顯著增加(P<0.01),其中以5μM ELA處理MSCs增殖及遷移能力最佳;與Control組相比,5μMELA組p-AKT/AKT、p-ERK/ERK、Cyclin D1的蛋白水平顯著增加(均為P<0.01),然而此效應(yīng)可被LY294002及U0126阻斷。結(jié)論:5μM ELA處理M... 

【文章來源】:嶺南急診醫(yī)學雜志. 2020年01期 第30-33+42頁

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

ELA經(jīng)PI3K/AKT和MARK通路促進MSCs增殖和遷移


各組MSCs經(jīng)ELA干預(yù)后0 h,24 h,48 h,72 h的A490值。與Control組比較,*P<0.01;與5μM ELA組比較,#P<0.01

細胞,磷酸化,抑制劑,調(diào)節(jié)作用


本研究探討了不同濃度ELA對MSCs的調(diào)節(jié)作用。除了濃度10μM之外,不同濃度ELA均促進MSCs的增殖及遷移能力,且呈現(xiàn)濃度效應(yīng),其中以ELA濃度為5μM對MSCs的調(diào)節(jié)作用達到最佳。另外,此效應(yīng)能夠被PI3K/AKT通路抑制劑LY294002及MARK通路抑制劑U0126阻斷。鑒于此,我們推測ELA參與調(diào)節(jié)MSCs的增殖與遷移功能可能與AKT的磷酸化及ERK磷酸化有關(guān)。Western Blot結(jié)果顯示,與Control組相比,5μM ELA組中p-AKT/AKT、p-ERK/ERK水平顯著提高(P<0.01);與5μM ELA組相比,5μM ELA+LY294002組及5μM ELA+U0126組中p-AKT/AKT,p-ERK/ERK的表達水平顯著降低(P<0.01)。PI3K/AKT通路抑制劑LY294002及MARK通路抑制劑U0126分別抑制AKT磷酸化及ERK磷酸化后,ELA對MSCs的調(diào)節(jié)作用被阻斷,因此,我們認為,ELA促進MSCs增殖及遷移功能可能與激活A(yù)KT磷酸化及ERK磷酸化有關(guān)。圖3 各組MSCs磷酸化AKT/AKT水平。與Control組比較,*P<0.01;與ELA組比較,#P<0.01

磷酸化,細胞


圖2 各組MSCs經(jīng)ELA干預(yù)12 h后細胞遷移數(shù)量。以上實驗均獨立重復(fù)3次以上。與Control組比較,*P<0.01;與5μM ELA組比較,#P<0.01圖4 各組MSCs中磷酸化ERK/ERK水平。與Control組比較,*P<0.01;與ELA組比較,#P<0.01


本文編號:2908352

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