国产伦乱,一曲二曲欧美日韩,AV在线不卡免费在线不卡免费,搞91AV视频

鮑曼不動桿菌UspA蛋白的克隆表達及生物信息學分析

發(fā)布時間:2020-12-09 15:11
  目的克隆表達及純化鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii)普遍應急蛋白A(Universal stress protein A,UspA),并進行生物學預測和分析。方法查詢鮑曼不動桿菌UspA基因序列,設(shè)計特異性PCR引物,以提取的鮑曼不動桿菌基因組DNA為模板,PCR擴增UspA片段;厥漳康钠,連接到質(zhì)粒pET28a,轉(zhuǎn)化大腸埃希菌,37℃培養(yǎng)后,進行PCR擴增并測序。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入表達菌,加入IPTG誘導重組UspA蛋白表達,并經(jīng)Ni2+親和層析純化。采用生物信息學軟件分析UspA蛋白的生物學特性。結(jié)果獲得全長為444bp的鮑曼不動桿菌UspA基因,且成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pET28a-UspA,得到純度較高的相對分子質(zhì)量17×103的重組UspA蛋白。該蛋白為細菌的胞質(zhì)蛋白,其α-螺旋占51%,延伸鏈占27%,無規(guī)卷曲的含量占31%。由2個同源UspA蛋白分子構(gòu)成二聚體。結(jié)論成功克隆表達了鮑曼不動桿菌UspA蛋白,該蛋白可能含B細胞表位,而具有免疫原性,為其生物學活性及耐藥機制研究提供了理論基礎(chǔ)。 

【文章來源】:中國病原生物學雜志. 2019年12期 第1365-1369頁 北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

鮑曼不動桿菌UspA蛋白的克隆表達及生物信息學分析


PCR擴增UspA基因

電泳圖,蛋白,電泳,層析


將重組質(zhì)粒pET28a-UspA轉(zhuǎn)化表達菌BL21后得到能夠表達重組UspA蛋白的重組菌。挑取單菌落到LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)過夜,將其接種到新培養(yǎng)基后用IPTG誘導目的蛋白的表達,使用Ni 2+親和層析柱純化重組UspA蛋白,SDS-PAGE電泳分析蛋白分子質(zhì)量及純度,結(jié)果見圖2。該蛋白相對分子質(zhì)量約17×103,與理論值相符。柱層析后的蛋白為單一電泳條帶,純度較高。3 UspA蛋白的理化特性

蛋白,信號肽,親水性


生物信息學分析UspA蛋白共有147個氨基酸,總原子數(shù)為2 267,理論相對分子質(zhì)量為15.8×103,理論pI是5.59。UspA蛋白的不穩(wěn)定系數(shù)為33.3,<閾值40,推測為穩(wěn)定蛋白。該蛋白的平均親水性值是0.271,為非親水性蛋白。在線軟件Phobius預測UspA蛋白定位在細菌細胞質(zhì),且無信號肽(圖3)。4 UspA蛋白的結(jié)構(gòu)

【參考文獻】:
期刊論文
[1]血流感染泛耐藥鮑曼不動桿菌耐藥和基因型分析[J]. 姜麗,賈萌,高飛,呂品,李江,朱尊民.  中國病原生物學雜志. 2018(04)



本文編號:2907062

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://lk138.cn/xiyixuelunwen/2907062.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶94974***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
麻豆只有精品| 这里只有精品一区二区三区| 日B播放视频| 久久午夜无码鲁丝片| 亚洲AV综合AV一区红太狼| 性色AV一区免费| 欧美成人国产日韩剧情| 天天日天天干三级| 久久精品免费精品视频| 夫妻视频一区二区| 很黄很色91视频| 九九精品一去| 日本久久久精| 关岭| 久久B区视频| 亚洲色婷综合久久| 亚洲免费永久精品国产鬼片| 手机在线观看不卡av电影| 欧美 国产 亚洲 另类 综合| 久久精品国产亚洲AV嫖农村妇女 | 日本乱伦不卡一区| 久到亚州美女诱惑| 欧美在线 大香蕉| 大香蕉国产精品国产| 欧美自拍视频日韩| 天天爽天天狠天天做| 日韩AV小说五月天| 亚洲无码av黄| 成人麻豆综合在线| 97视屏在线播放| 国产精品久久久久久无码黑人| 精品国产五月天| 夜夜艹夜夜爽| 一区二区三区国a| av操伊人| 丝袜日本伦理在线| 亚洲经典av在线播放| 色逼视频下载| 爱干网99| 国产精品久久久久无码AV色戒| 午夜理论电影 日本|