不同濃度降鈣素基因相關肽對小鼠海馬區(qū)長時程抑制的作用
【部分圖文】:
1.3.4 神經(jīng)元膜片鉗記錄記錄電極內液配方成分(mmol/L):Cs-gluconate 122.5,Cs Cl 17.5,EGTA 0.2,HEPES 10,Na Cl 8,Mg-ATP 2,Na-GTP 0.3,QX3145,pH 7.2,滲透壓280~290 mOsmol/L。在記錄EPSCs時,將刺激電極插入海馬CA3區(qū),將裝有電極內液的記錄電極(電阻約為2~4 MΩ)與海馬CA1區(qū)的突觸后神經(jīng)元進行封接破膜,然后通過刺激CA3區(qū)產(chǎn)生EPSCs。對照組外源性給予CNQX(20μmol/L),在-70 mV鉗制電壓并且無Mg2+條件下記錄NMDA受體介導的EPSCs。各組腦片的處理如下:在CGRP組ACSF中加入CGRP(200 nmol/L);在CGRP+CGRP8-37組ACSF中加入CGRP(200 nmol/L)和CGRP阻斷劑CGRP8-37(1μmol/L);在CGRP+APV組ACSF中加入CGRP(200 nmol/L)和NMDA受體阻斷劑APV(50μmol/L),給藥后均孵育20min,然后記錄NMDA受體介導的EPSCs。每組記錄4只小鼠,每只小鼠記錄2張腦片。
結果顯示,給予不同濃度的CGRP后,在各組小鼠海馬區(qū)LTD的誘發(fā)過程中,fEPSP斜率分別下降至(77.81±1.68)%(50 nmol/L CGRP組)、(77.84±3.01)%(100 nmol/L CGRP組)和(72.45±1.87)%(200nmol/L CGRP組)。與對照組相比,給予100 nmol/L和200 nmol/L CGRP易化了LTD的誘發(fā),差異具有顯著性(P<0.05,P<0.01)(圖1)。2.2 CGRP阻斷劑CGRP8-37及NMDA受體阻斷劑APV可阻斷CGRP對海馬區(qū)LTD誘發(fā)的易化作用
與對照組(198.20 pA±31.88 pA)比較,給予CGRP(200 nmol/L)可顯著增加小鼠海馬區(qū)NMDA受體介導的EPSCs的幅度(369.11 pA±53.65 pA)(P<0.01)。而給予CGRP阻斷劑CGRP8-37和NMDA受體阻斷劑APV后,NMDA受體介導的EPSCs顯著下降,與對照組沒有顯著性差異[對照組:(185.79±25.68)p A;CGRP+CGRP8-37組:(213.0±27.29)pA。對照組:163.39 pA;CGRP+APV組:(180.90±24.71)pA](圖3)。上述結果提示,CGRP是通過與其受體結合易化了NMDA受體依賴性LTD的誘發(fā)。3 討論
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