蠕形螨對共培養(yǎng)HaCaT細(xì)胞的TLR2以及炎癥相關(guān)基因表達(dá)的影響
【部分圖文】：
圖4顯示，目的基因qRT-PCR擴(kuò)增曲線平整呈“S型”，復(fù)孔重復(fù)性好，陰性對照無擴(kuò)增，表明加樣準(zhǔn)確且無污染;熔解曲線顯示各基因解鏈溫度在83～89℃之間，均為單峰，不存在引物二聚體或非特異性擴(kuò)增，說明產(chǎn)物特異性好，定量結(jié)果準(zhǔn)確。圖2 PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖
圖1 共培養(yǎng)前的Ha Ca T細(xì)胞形態(tài)(A)與共培養(yǎng)24 h后的螨蟲形態(tài)(B)qRT-PCR結(jié)果顯示(圖5、圖6和表2)，雖然六個目的基因的相對mRNA表達(dá)量在10只螨蟲組與空白組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但TLR2和KLK5表達(dá)量與蟲數(shù)呈正相關(guān)，相關(guān)性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.984和0.974,P<0.05)。30只螨蟲組TLR2表達(dá)量明顯高于10只螨蟲組和空白組(t=6.35和6.54,P<0.001);50只螨蟲組高于30只螨蟲組(t=4.31,P=0.003)。30只螨蟲組KLK5只高于空白組(t=3.31,P=0.011)，不高于10只組;但50只螨蟲組高于10只螨蟲組(t=2.79,P=0.024)。
炎癥相關(guān)因子IL-6、IL-8和CCL2表達(dá)量與蟲數(shù)也呈明顯正相關(guān)(r=0.970、0.984和0.985,P<0.05),IL-1β相關(guān)性不顯著(r=0.938,P>0.05)。在IL-6，表達(dá)量隨蟲數(shù)變化上調(diào)最明顯，50只螨蟲組、30只螨蟲組和10只螨蟲組兩兩之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在IL-8,50只螨蟲組和30只螨蟲組均明顯高于10只螨蟲組和空白組，但50只組和30只組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.64,P=0.139)。在CCL2,50只螨蟲組與10只螨蟲組和空白組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.09,P=0.015;t=4.03,P=0.04),30只螨蟲組與空白組差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.12,P=0.014)，但其他各組兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在IL-1β，隨蟲數(shù)增加表達(dá)量變化更小，只有50只螨蟲組與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.60,P=0.032)。圖4 qRT-PCR擴(kuò)增曲線(A-C,G-I)和熔解曲線(D-F,J-L)
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