皮膚異種移植及基因?qū)肽Ｐ偷慕?/H1>
發(fā)布時(shí)間：2020-11-07 07:47
目的:在研究皮膚疾病如銀屑病、皮膚腫瘤、傷口愈合及皮膚遺傳病時(shí),常通過構(gòu)建小鼠疾病模型,如銀屑病小鼠、小鼠鱗癌模型等進(jìn)行研究。然而小鼠和人之間遺傳背景差別較大,這些模型并不能很好地代表皮膚疾病的發(fā)生、發(fā)展等過程。本研究探討如何構(gòu)建較成功的人皮膚異種移植及基因?qū)氲男∈竽Ｐ?以期為人類皮膚疾病如皮膚腫瘤、傷口愈合、皮膚遺傳病等提供人源化的小鼠研究模型。方法:1收集的新生小黑鼠的皮膚將其依次浸沒于10%的消毒水,75%的乙醇及無菌的生理鹽水中進(jìn)行處理,用眼科剪和組織鑷進(jìn)行修剪呈約大小為1-1.5cm(盡量去掉脂肪),使真皮側(cè)平鋪并緊貼于培養(yǎng)皿蓋內(nèi)側(cè),腹腔注射濃度為4ul/g的水合氯醛麻醉裸鼠,用眼科剪在小鼠兩側(cè)腰部制造全層皮膚缺損創(chuàng)面約為1.5㎝×1㎝大小的傷口(即移植床),將新生小鼠的皮膚移于移植床中,并用繃帶包扎,約第14天后將開繃帶。2若裸鼠移植同種異基因移植的皮膚存活較好,說明該模型構(gòu)建成功,則把人的包皮依次浸沒于10%的消毒水,75%的乙醇及無菌的生理鹽水中進(jìn)行處理,用眼科剪和組織鑷進(jìn)行修剪呈約大小為1-1.5cm(盡量去掉脂肪),使真皮側(cè)平鋪并緊貼于培養(yǎng)皿蓋內(nèi)側(cè),腹腔注射濃度為4ul/g的水合氯醛麻醉裸鼠及NOD-scid小鼠,用眼科剪在小鼠兩側(cè)腰部制造全層皮膚缺損創(chuàng)面約為1.5㎝×1㎝大小的傷口(即移植床),將新生小鼠的皮膚移于移植床中,并用繃帶包扎,約第14天后將開繃帶。3若人的包皮存活較成功,大約第3周時(shí)通過皮內(nèi)注射帶有報(bào)告蛋白(GFP)的病毒的方式,建立人皮膚異種移植及基因?qū)肽Ｐ�。結(jié)果:2周后可觀察到1移植于裸鼠腰部的新生黑鼠的皮膚存活較好,毛發(fā)稠密,部分區(qū)域可見色素脫失見,該結(jié)果表明同種異基因模型構(gòu)建較成功,為構(gòu)建人皮膚異種移植小鼠模型提供了有力的依據(jù)。2移植于裸鼠的人的包皮存活較差,呈暗紅色,可見收縮及脫落現(xiàn)象3移植于裸鼠的包皮在NOD-scid小鼠腰部可以看到皮片成活較好,具有正常的皮膚組織結(jié)構(gòu),并在移植的包皮中檢測(cè)到報(bào)告蛋白(GFP)。結(jié)論:移植于裸鼠和NOD-scid小鼠后的人皮膚都保留了正常的組織結(jié)構(gòu),而移植于NOD-scid小鼠的皮瓣存活更好,并能夠感染上帶有報(bào)告蛋白的病毒,這為皮膚腫瘤、傷口愈合、皮膚遺傳病等提供了較好的研究模型。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R-332;R622.1
【部分圖文】：
17圖 7 移植后第 4 周可見人的皮膚成功移植到 NOD-scid 小鼠上，并成功感染上病毒（紅光代表的時(shí) involcrin，它是一種由人角質(zhì)細(xì)胞合成的蛋白，對(duì)角質(zhì)細(xì)胞具有保護(hù)作用，分布在細(xì)胞質(zhì)，可通過谷氨酰胺酶的作用，分泌到細(xì)胞外。）
圖 3 圖 4 4X10圖 3 移植后第 3 周，皮膚存活尚可，呈暗紅色，部分區(qū)域可見收縮及脫落現(xiàn)象圖 4 移植后第 3 周，圖片左側(cè)棘層較薄，真皮內(nèi)見大量毛囊結(jié)構(gòu)，交界處表皮完好，未見壞死，右側(cè)棘層較厚，真皮未見毛囊結(jié)構(gòu)3 皮膚異種移植的 NOD-scid 小鼠模型的構(gòu)建移植后第 3 周可見移植于 NOD-scid 小鼠的人的包皮存活較好，色澤鮮艷，未見明顯收縮及脫落現(xiàn)象（如圖 5）。病理結(jié)果可見視野左側(cè)棘層較厚，真皮未見毛囊結(jié)構(gòu)，交界處表皮完好，未見壞死，圖片右側(cè)棘層較薄，真皮內(nèi)見大量毛囊結(jié)構(gòu)（如圖 6）。
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前2條
1 叢文銘;;肝移植術(shù)后抗體介導(dǎo)性排異的病理診斷[J];實(shí)用器官移植電子雜志;2014年02期
2 李振宇,徐開林,潘秀英,鹿群先,何徐彭,孫海英,主鴻鵠;HIV-1慢病毒載體的構(gòu)建及結(jié)構(gòu)改造[J];中華血液學(xué)雜志;2004年09期
本文編號(hào)：2873654
本文鏈接：http://www.lk138.cn/xiyixuelunwen/2873654.html
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R-332;R622.1
【部分圖文】：
17圖 7 移植后第 4 周可見人的皮膚成功移植到 NOD-scid 小鼠上，并成功感染上病毒（紅光代表的時(shí) involcrin，它是一種由人角質(zhì)細(xì)胞合成的蛋白，對(duì)角質(zhì)細(xì)胞具有保護(hù)作用，分布在細(xì)胞質(zhì)，可通過谷氨酰胺酶的作用，分泌到細(xì)胞外。）
圖 3 圖 4 4X10圖 3 移植后第 3 周，皮膚存活尚可，呈暗紅色，部分區(qū)域可見收縮及脫落現(xiàn)象圖 4 移植后第 3 周，圖片左側(cè)棘層較薄，真皮內(nèi)見大量毛囊結(jié)構(gòu)，交界處表皮完好，未見壞死，右側(cè)棘層較厚，真皮未見毛囊結(jié)構(gòu)3 皮膚異種移植的 NOD-scid 小鼠模型的構(gòu)建移植后第 3 周可見移植于 NOD-scid 小鼠的人的包皮存活較好，色澤鮮艷，未見明顯收縮及脫落現(xiàn)象（如圖 5）。病理結(jié)果可見視野左側(cè)棘層較厚，真皮未見毛囊結(jié)構(gòu)，交界處表皮完好，未見壞死，圖片右側(cè)棘層較薄，真皮內(nèi)見大量毛囊結(jié)構(gòu)（如圖 6）。
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前2條
1 叢文銘;;肝移植術(shù)后抗體介導(dǎo)性排異的病理診斷[J];實(shí)用器官移植電子雜志;2014年02期
2 李振宇,徐開林,潘秀英,鹿群先,何徐彭,孫海英,主鴻鵠;HIV-1慢病毒載體的構(gòu)建及結(jié)構(gòu)改造[J];中華血液學(xué)雜志;2004年09期
本文編號(hào)：2873654
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