兔出血癥,又稱兔瘟,是由兔出血癥病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)引起的一種以急性、高度傳染性、大面積死亡為特征的兔傳染病。國際獸醫(yī)局將該病列為B類傳染病,我國農(nóng)業(yè)部第1125號公告頒布為二類疫病。目前該病的主要預(yù)防措施是使用組織滅活疫苗免疫,然而用于制作該疫苗的非免疫兔來源很不確定,同時(shí)存在由于滅活不完全而產(chǎn)生散毒的潛在危險(xiǎn),生物安全性差,需要探索新的疫苗生產(chǎn)途徑。本研究對利用重組兔出血癥病毒桿狀病毒制備的兔出血癥病毒桿狀病毒載體滅活疫苗開展研究,進(jìn)行生產(chǎn)工藝研究后中試生產(chǎn)10批次疫苗,并在農(nóng)業(yè)部行政審批許可后進(jìn)行了疫苗臨床試驗(yàn),完成中試產(chǎn)品安全試驗(yàn)、效力試驗(yàn)和生物安全試驗(yàn),最終兔出血癥病毒桿狀病毒載體滅活疫苗(BAC-VP60株)獲得一類新獸藥證書。對重組兔出血癥病毒桿狀病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)工藝研究。結(jié)果顯示,在中試生產(chǎn)和規(guī)�；a(chǎn)時(shí),培養(yǎng)條件控制在溫度27～28℃、pH值為6.0～6.2、轉(zhuǎn)速15 r/min。當(dāng)細(xì)胞濃度約為2×106個(gè)/mL時(shí)按總體積的1%接毒,以相同條件繼續(xù)培養(yǎng),連續(xù)觀察5日,待細(xì)胞病變達(dá)約85%以上時(shí),...

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【學(xué)位級別】：博士

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圖１?ｃｒｙｏＥＭ重建ＲＨＤＶ病毒粒子??

?兔出血癥病毒桿狀病毒載體滅活疫苗工藝技術(shù)研宄及臨床試驗(yàn)???＿擊??＾?４４?ｎｍ?＾??圖１?ｃｒｙｏＥＭ重建ＲＨＤＶ病毒粒子??截至２０１０年，所有的ＲＨＤ病毒（ＲＨＤＶ）分屬六個(gè)基因型（ＧＩ－ＧＶＩ），其中ＧＶＩ??是一個(gè)抗原亞型（ＲＨＤＶａ）?［１２＝１３］。在２０１０....

圖２ＲＨＤＶ基因組模式圖??

?第一篇文獻(xiàn)綜述???Ｇｅｎｏｍｉｃ?ＲＮＡ?（－７．４ｋｂ）??５，???．．．＂??????３，???，■守，?（Ａ）ｎ??（ｒａｎｓｌａｎ＇ｏｎ??［ｌｐ：Ｓ?［ｖｌＴａＭ?ｊ）２９?［ｙｐＴｆｉｌｉａｏ?￣￣ＭＲｐ?Ｆ?ＶＰ６０?１??ｐｉ＾?Ａ?▲?Ａ?ＡＪｋ?Ａ??（....

圖３?Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ系統(tǒng)：重組病毒的產(chǎn)生和目的基因的表達(dá)??３．６ＢＥＳ的優(yōu)勢??

?兔出血癥病毒桿狀病毒載體滅活疫苗工藝技術(shù)研究及臨床試驗(yàn)???奸料轉(zhuǎn)財(cái)成幽續(xù)．?％??科?ｖ?５?Ｉ??ｒ＿？Ｃ??ｒｆｆ兩財(cái)．?，－－—￣－＇—?－?—??????—?－＊？??？甚―ｉ汽ｅ??＾Ｓｆｃ．?？ｕｄ＾ｆ？８？ｆ?，??■?，?ｉ＞Ｎ＼?ｒ５３Ｔ７＾ｆ＾ｉｉｉｉ￣?....

圖１－２轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果??Ｆｉｇ．?ｌ－２Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｂｙ?ｒｏｌｌｅｒ?ｂｏｔｔｌｅｓ??

?兔出血癥病毒桿狀病毒載體滅活疫苗工藝技術(shù)研究及臨床試驗(yàn)???２．１．２不同初始濃度細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)??轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細(xì)胞計(jì)數(shù)也呈現(xiàn)與靜置培養(yǎng)結(jié)果類似的趨勢，起始濃度ｌ．〇ｘｌ〇６個(gè)／ｍＬ??和１．５ｘｌ〇６個(gè)／ｍＬ到達(dá)細(xì)胞濃度高峰的時(shí)間和最大細(xì)胞濃度均沒有明顯差異；在第４??日，幾個(gè)起始....

本文編號：3943173