RNF168在食管鱗癌中的表達(dá)與預(yù)后相關(guān)性及Wnt/β-catenin信號通路的實(shí)驗研究
發(fā)布時間:2024-06-07 00:53
背景:食管癌的發(fā)病率和死亡率較高,即使可以通過積極的治療其五年生存率仍然很低,目前我國關(guān)于食管癌的靶向藥物治療的研究發(fā)展越來越多,RNF168雖在部分其他腫瘤中報道,但食管鱗癌相關(guān)問題研究方法仍然很少。目的:探究RNF168在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)情況,和它的異常表達(dá)與臨床病理學(xué)特征之間的聯(lián)系,并通過敲減RNF168的表達(dá)進(jìn)一步觀察食管癌細(xì)胞惡性行為的變化。方法:1.通過加權(quán)共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)對TCGA數(shù)據(jù)庫的94例食管鱗癌樣本進(jìn)行分析,并篩選出樞紐基因。2.分析TCGA數(shù)據(jù)庫(癌癥基因組圖譜),探討RNF168在食管鱗癌與對應(yīng)正常組織中的表達(dá)并分析;3.甘肅省人民醫(yī)院食管鱗狀細(xì)胞癌患者的相應(yīng)的臨床數(shù)據(jù),癌組織和癌旁組織切片通過免疫組織化學(xué)方法,臨床病理的關(guān)系分析的結(jié)果染色收集活檢。4.利用慢病毒轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞構(gòu)建RNF168低表達(dá)組與實(shí)驗組,轉(zhuǎn)染成功并得到穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株后進(jìn)行功能試驗,CCK-8法驗證細(xì)胞增殖、細(xì)胞劃痕試驗與Transwell小室驗證細(xì)胞遷移、流式細(xì)胞術(shù)驗證細(xì)胞凋亡情況。5...
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
實(shí)驗材料
實(shí)驗方法
臨床資料與免疫組化
細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
實(shí)時定量PCR
WESTERN BLOT
CCK-8 細(xì)胞增殖試驗
細(xì)胞凋亡分析
細(xì)胞周期實(shí)驗
細(xì)胞遷移與細(xì)胞劃痕實(shí)驗
生物信息學(xué)分析
統(tǒng)計學(xué)處理
實(shí)驗結(jié)果
1.WGCNA篩選TCGA食管鱗癌樣本的樞紐基因
2.RNF168 高表達(dá)于多種腫瘤并且其高表達(dá)與病理分期相關(guān)
3.食管鱗癌當(dāng)中RNF168 的高表達(dá)與腫瘤大小,浸潤深度相關(guān)
4.RNF168 的敲減抑制了腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡以及細(xì)胞遷移運(yùn)動
5.RNF168 的敲減影響了WNT/Β-CATENIN信號通路
6.RNF168和WNT3A高表達(dá)影響食管鱗癌患者的生存時間
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間研究成果
致謝
本文編號:3990539
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
實(shí)驗材料
實(shí)驗方法
臨床資料與免疫組化
細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
實(shí)時定量PCR
WESTERN BLOT
CCK-8 細(xì)胞增殖試驗
細(xì)胞凋亡分析
細(xì)胞周期實(shí)驗
細(xì)胞遷移與細(xì)胞劃痕實(shí)驗
生物信息學(xué)分析
統(tǒng)計學(xué)處理
實(shí)驗結(jié)果
1.WGCNA篩選TCGA食管鱗癌樣本的樞紐基因
2.RNF168 高表達(dá)于多種腫瘤并且其高表達(dá)與病理分期相關(guān)
3.食管鱗癌當(dāng)中RNF168 的高表達(dá)與腫瘤大小,浸潤深度相關(guān)
4.RNF168 的敲減抑制了腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡以及細(xì)胞遷移運(yùn)動
5.RNF168 的敲減影響了WNT/Β-CATENIN信號通路
6.RNF168和WNT3A高表達(dá)影響食管鱗癌患者的生存時間
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
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攻讀學(xué)位期間研究成果
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