背景:食管癌的發(fā)病率和死亡率較高,即使可以通過積極的治療其五年生存率仍然很低,目前我國關(guān)于食管癌的靶向藥物治療的研究發(fā)展越來越多,RNF168雖在部分其他腫瘤中報(bào)道,但食管鱗癌相關(guān)問題研究方法仍然很少。目的:探究RNF168在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)情況,和它的異常表達(dá)與臨床病理學(xué)特征之間的聯(lián)系,并通過敲減RNF168的表達(dá)進(jìn)一步觀察食管癌細(xì)胞惡性行為的變化。方法:1.通過加權(quán)共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)對TCGA數(shù)據(jù)庫的94例食管鱗癌樣本進(jìn)行分析,并篩選出樞紐基因。2.分析TCGA數(shù)據(jù)庫(癌癥基因組圖譜),探討RNF168在食管鱗癌與對應(yīng)正常組織中的表達(dá)并分析;3.甘肅省人民醫(yī)院食管鱗狀細(xì)胞癌患者的相應(yīng)的臨床數(shù)據(jù),癌組織和癌旁組織切片通過免疫組織化學(xué)方法,臨床病理的關(guān)系分析的結(jié)果染色收集活檢。4.利用慢病毒轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞構(gòu)建RNF168低表達(dá)組與實(shí)驗(yàn)組,轉(zhuǎn)染成功并得到穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株后進(jìn)行功能試驗(yàn),CCK-8法驗(yàn)證細(xì)胞增殖、細(xì)胞劃痕試驗(yàn)與Transwell小室驗(yàn)證細(xì)胞遷移、流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證細(xì)胞凋亡情況。5...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)方法
    臨床資料與免疫組化
    細(xì)胞培養(yǎng)
    細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    實(shí)時定量PCR
    WESTERN BLOT
    CCK-8 細(xì)胞增殖試驗(yàn)
    細(xì)胞凋亡分析
    細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)
    細(xì)胞遷移與細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
    生物信息學(xué)分析
    統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.WGCNA篩選TCGA食管鱗癌樣本的樞紐基因
    2.RNF168 高表達(dá)于多種腫瘤并且其高表達(dá)與病理分期相關(guān)
    3.食管鱗癌當(dāng)中RNF168 的高表達(dá)與腫瘤大小,浸潤深度相關(guān)
    4.RNF168 的敲減抑制了腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡以及細(xì)胞遷移運(yùn)動
    5.RNF168 的敲減影響了WNT/Β-CATENIN信號通路
    6.RNF168和WNT3A高表達(dá)影響食管鱗癌患者的生存時間
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間研究成果
致謝



本文編號：3990539