目的:(1)探究SCN4B(Voltage-gated sodium channelβ4 subunit)在前列腺癌(PCa)組織以及癌旁組織、細胞中的表達及臨床意義;(2)通過慢病毒調(diào)控SCN4B的表達后,前列腺癌的增殖、遷移和侵襲能力是否發(fā)生改變;(3)探索前列腺癌的EMT進展中SCN4B的潛在影響機制。方法:(1)免疫組織化學(xué)(Elivision TMplus方法)染色檢測SCN4B在前列腺癌組織及相應(yīng)的癌旁組織(103例)中的表達情況,分析SCN4B表達水平與前列腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。(2)實時逆轉(zhuǎn)錄-聚合鏈反應(yīng)實驗(RT-qPCR)和免疫印跡實驗(Western blotting)檢測SCN4B在三種前列腺癌細胞系(DU145、PC-3、LNCAP)中mRNA和蛋白水平。(3)用慢病毒介導(dǎo)的外源性強制增強或抑制前列腺癌細胞DU145和LNCAP中SCN4B的表達,并用RT-qPCR和Western blotting從mRNA和蛋白水平驗證轉(zhuǎn)染效率,檢測調(diào)控前后SCN4B的表達差異。(4)構(gòu)建穩(wěn)定過表達SCN4B的DU145和敲低SCN4B的LNCAP前列腺癌細胞株...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
實驗材料與方法
    1.材料
        1.1 臨床標本收集
        1.2 細胞株
        1.3 實驗動物
        1.4 試劑
        1.5 實驗設(shè)備
    2.實驗方法
    3.統(tǒng)計分析
實驗結(jié)果
    1.免疫組化檢測SCN4B在前列腺癌組織中的表達
    2.生存分析
    3.各臨床病理參數(shù)與SCN4B蛋白的關(guān)系
    4.SCN4B在前列腺癌細胞系中的表達水平
    5.穩(wěn)定敲低和過表達SCN4B前列腺癌細胞株的鑒定
    6.CCK8增殖實驗和細胞集落克隆
    7.SCN4B的表達抑制前列腺癌細胞的遷移
    8.SCN4B的表達抑制前列腺癌細胞的侵襲
    9.裸鼠成瘤實驗
    10.免疫印跡檢測SCN4B對 EMT相關(guān)蛋白的影響
    11.免疫組化檢測SCN4B抑制前列腺癌的EMT轉(zhuǎn)化過程
討論
結(jié)論
參考文獻
附錄
    附錄 A
    附錄 B
    附錄 C
    附錄 D
    附錄 E(綜述)
        參考文獻



本文編號：3989341