SCN4B通過(guò)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖和侵襲
發(fā)布時(shí)間:2024-06-04 23:47
目的:(1)探究SCN4B(Voltage-gated sodium channelβ4 subunit)在前列腺癌(PCa)組織以及癌旁組織、細(xì)胞中的表達(dá)及臨床意義;(2)通過(guò)慢病毒調(diào)控SCN4B的表達(dá)后,前列腺癌的增殖、遷移和侵襲能力是否發(fā)生改變;(3)探索前列腺癌的EMT進(jìn)展中SCN4B的潛在影響機(jī)制。方法:(1)免疫組織化學(xué)(Elivision TMplus方法)染色檢測(cè)SCN4B在前列腺癌組織及相應(yīng)的癌旁組織(103例)中的表達(dá)情況,分析SCN4B表達(dá)水平與前列腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。(2)實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄-聚合鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)(RT-qPCR)和免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western blotting)檢測(cè)SCN4B在三種前列腺癌細(xì)胞系(DU145、PC-3、LNCAP)中mRNA和蛋白水平。(3)用慢病毒介導(dǎo)的外源性強(qiáng)制增強(qiáng)或抑制前列腺癌細(xì)胞DU145和LNCAP中SCN4B的表達(dá),并用RT-qPCR和Western blotting從mRNA和蛋白水平驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率,檢測(cè)調(diào)控前后SCN4B的表達(dá)差異。(4)構(gòu)建穩(wěn)定過(guò)表達(dá)SCN4B的DU145和敲低SCN4B的LNCAP前列腺癌細(xì)胞株...
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
1.材料
1.1 臨床標(biāo)本收集
1.2 細(xì)胞株
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.4 試劑
1.5 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.實(shí)驗(yàn)方法
3.統(tǒng)計(jì)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.免疫組化檢測(cè)SCN4B在前列腺癌組織中的表達(dá)
2.生存分析
3.各臨床病理參數(shù)與SCN4B蛋白的關(guān)系
4.SCN4B在前列腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)水平
5.穩(wěn)定敲低和過(guò)表達(dá)SCN4B前列腺癌細(xì)胞株的鑒定
6.CCK8增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞集落克隆
7.SCN4B的表達(dá)抑制前列腺癌細(xì)胞的遷移
8.SCN4B的表達(dá)抑制前列腺癌細(xì)胞的侵襲
9.裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)
10.免疫印跡檢測(cè)SCN4B對(duì) EMT相關(guān)蛋白的影響
11.免疫組化檢測(cè)SCN4B抑制前列腺癌的EMT轉(zhuǎn)化過(guò)程
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
附錄 A
附錄 B
附錄 C
附錄 D
附錄 E(綜述)
參考文獻(xiàn)
本文編號(hào):3989341
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
1.材料
1.1 臨床標(biāo)本收集
1.2 細(xì)胞株
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.4 試劑
1.5 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.實(shí)驗(yàn)方法
3.統(tǒng)計(jì)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.免疫組化檢測(cè)SCN4B在前列腺癌組織中的表達(dá)
2.生存分析
3.各臨床病理參數(shù)與SCN4B蛋白的關(guān)系
4.SCN4B在前列腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)水平
5.穩(wěn)定敲低和過(guò)表達(dá)SCN4B前列腺癌細(xì)胞株的鑒定
6.CCK8增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞集落克隆
7.SCN4B的表達(dá)抑制前列腺癌細(xì)胞的遷移
8.SCN4B的表達(dá)抑制前列腺癌細(xì)胞的侵襲
9.裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)
10.免疫印跡檢測(cè)SCN4B對(duì) EMT相關(guān)蛋白的影響
11.免疫組化檢測(cè)SCN4B抑制前列腺癌的EMT轉(zhuǎn)化過(guò)程
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
附錄 A
附錄 B
附錄 C
附錄 D
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本文編號(hào):3989341
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