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解毒益智方中多糖混合物對AD轉(zhuǎn)基因線蟲氧化應(yīng)激基因影響的研究

發(fā)布時間:2020-12-13 14:47
  目的:通過解毒益智方中提取的多糖混合物凍干粉對AD轉(zhuǎn)基因線蟲行為學(xué)和分子學(xué)方面的研究,探討不同濃度多糖混合物對Aβ聚集所導(dǎo)致線蟲癱瘓、死亡、氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因表達量的影響,從而明確多糖混合物是否能夠抑制線蟲的癱瘓、延長線蟲的壽命,以及是否可以減少氧化應(yīng)激的發(fā)生。方法:采用Aβ1-4 2誘導(dǎo)的線蟲CL4176作為實驗?zāi)P?線蟲經(jīng)同期化處理后隨機分為四組,分別是濃度為20μg/mL、40μg/mL、80μg/m L的給藥組和對照組。做癱瘓行為實驗和壽命實驗時,每組30只線蟲,先在16℃培養(yǎng)48h后轉(zhuǎn)移到25℃環(huán)境中誘導(dǎo)32h,觀察線蟲的癱瘓和死亡情況,并記錄數(shù)據(jù);氧化應(yīng)激基因表達實驗時,每組300只線蟲,在16℃培養(yǎng)96h后轉(zhuǎn)移到25℃誘導(dǎo)48h,將線蟲按試劑盒說明操作提取RNA進行實時定量PCR,檢測氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因表達情況。每個實驗重復(fù)3次。結(jié)果:1、癱瘓行為實驗:行為學(xué)實驗初步證實三個濃度的給藥組與對照組相比可以有效抑制AD線蟲癱瘓(P<0.05),其中80μg/mL給藥組抑制作用最明顯(P<0.01)。2、壽命實驗:三個濃度的給藥組與對照組相... 

【文章來源】:長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略語
引言
文獻綜述
    1 阿爾茨海默病
        1.1 AD的流行病學(xué)特點
        1.2 AD的發(fā)病機制
        1.3 Aβ毒性與氧化應(yīng)激反應(yīng)關(guān)系
        1.4 氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因概述
        1.5 AD的西藥治療
        1.6 中醫(yī)學(xué)對AD認識
    2 解毒益智方藥物組成及其有效成分概述
    3 中藥多糖活性研究概述
    4 秀麗隱桿線蟲作為AD模型的特點
    5 小結(jié)
第一章 解毒益智方中多糖混合物對AD轉(zhuǎn)基因線蟲癱瘓行為的影響
    1 實驗材料
        1.1 實驗?zāi)P?br>        1.2 主要實驗試劑及實驗儀器
        1.3 實驗試劑配制
        1.4 多糖混合物溶液制備
    2 實驗方法
        2.1 細菌的培養(yǎng)
        2.2 NGM培養(yǎng)基平板的制備
        2.3 線蟲的培養(yǎng)及傳代
        2.4 秀麗線蟲保存及復(fù)蘇
        2.5 線蟲的同步化處理
        2.6 實驗分組
        2.7 實驗內(nèi)容
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第二章 解毒益智方中多糖混合物對AD轉(zhuǎn)基因線蟲壽命的影響
    1 實驗材料
        1.1 實驗?zāi)P?br>        1.2 主要實驗試劑及實驗儀器
        1.3 實驗試劑配制
        1.4 多糖混合物溶液制備
    2 實驗方法
        2.1 細菌的培養(yǎng)
        2.2 NGM培養(yǎng)基平板的制備
        2.3 線蟲的培養(yǎng)及傳代
        2.4 秀麗線蟲保存及復(fù)蘇
        2.5 線蟲的同步化處理
        2.6 實驗分組
        2.7 實驗內(nèi)容
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 解毒益智方中多糖混合物對AD轉(zhuǎn)基因線蟲氧化應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因表達影響的研究
    1 實驗材料
        1.1 實驗?zāi)P?br>        1.2 主要實驗試劑及實驗儀器
        1.3 實驗試劑配制
        1.4 多糖混合物溶液制備
    2 實驗方法
        2.1 細菌的培養(yǎng)
        2.2 NGM培養(yǎng)基平板的制備
        2.3 線蟲的培養(yǎng)及傳代
        2.4 秀麗線蟲保存及復(fù)蘇
        2.5 線蟲的同步化處理
        2.6 實驗分組
        2.7 實驗內(nèi)容
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
討論
結(jié)論
本文創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
在學(xué)期間科研成果
個人簡歷


【參考文獻】:
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本文編號:2914716

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