發(fā)布時(shí)間：2025-01-07 02:55

　　重組人生長(zhǎng)激素(hGH)被廣泛應(yīng)用于治療生長(zhǎng)激素缺乏癥,慢性腎功能不全和特納氏綜合癥等疾病。生長(zhǎng)激素拮抗劑(GHA)可通過阻止生長(zhǎng)激素與其受體(GHR)的結(jié)合,治療生長(zhǎng)激素過度分泌引起的肢端肥大癥等疾病。由于生長(zhǎng)激素和生長(zhǎng)激素拮抗劑的半衰期短,必須頻繁注射才能達(dá)到有效的血藥濃度。聚乙二醇(PEG)修飾和人血清白蛋白(HSA)修飾可延長(zhǎng)hGH和GHA的半衰期,但同時(shí)會(huì)顯著降低hGH和GHA的體外生物活性。為了解決上述問題,本論文探討了使用不同鏈長(zhǎng)的PEG定點(diǎn)單修飾GHA的N末端,尋找藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué)的平衡點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上,采用剛性苯環(huán)連接橋介導(dǎo)PEG形成相對(duì)致密的構(gòu)象,定點(diǎn)單修飾hGH,考察致密構(gòu)象的PEG對(duì)hGH藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)參數(shù)的影響。為了進(jìn)一步提高h(yuǎn)GH的藥效學(xué)參數(shù),本論文將PEG修飾和長(zhǎng)鏈脂肪烷修飾技術(shù)結(jié)合起來,定點(diǎn)單修飾hGH。本論文分為三個(gè)部分。第一部分采用分子量為20kDa和40kDa的PEG定點(diǎn)單修飾GHA的N末端,得到GHA的定點(diǎn)單修飾產(chǎn)物,并探討了修飾產(chǎn)物的藥代動(dòng)力學(xué)與藥效學(xué)間的平衡點(diǎn)。結(jié)果表明：PEG修飾能顯著增加GHA的流體力學(xué)體積,從而延長(zhǎng)了藥物的血漿半衰...

【文章頁(yè)數(shù)】：157 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．５?ＨＳＡ的射線結(jié)構(gòu)（左）和Ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ的結(jié)構(gòu)圖（右）??

圖２．１生長(zhǎng)激素和生長(zhǎng)激素括抗劑與受體結(jié)合模型［１６１］??

?ａｎｄ?ｐｅｇｖｉｓｏｍａｎｔ?（ｒｉｇｈｔ）??本章擬采用分子量為２０?ｋＤａ和４０?ｋＤａ的ＰＥＧ酸定點(diǎn)修飾ＧＨＡ的Ｎ末端的??ａ－氨基，如圖２．２所示，制備分子量均一的定點(diǎn)修飾Ｎ末端的ＰＥＧ化ＧＨＡ。使??最終修飾產(chǎn)物成分單一，易于分離純化，產(chǎn)物收率高，預(yù)期能減少ＧＨＡ生....

圖２．８修飾產(chǎn)物的犯Ｓ－ＰＡＧＥ電泳圖??Ｆｉ．?２．８?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?ａｎａｌｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＰＥＧｌａｔｅｄ?ＧＨＡｓ??

＇，?圖２．７?ＧＨＡ修飾樣品的純度分析??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．７?ＳＥＣ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＧＨＡ?ｓａｍｐｌｅｓ??２．４．２．２?ＳＤＳ－ＰＡＣＥ分析鑒定產(chǎn)物純度??采用犯Ｓ－ＰＡＧＥ進(jìn)一步分析ＧＨＡ修飾樣品。如圖２．８所示，ＧＨＡ為單一的??電泳條帶，分子量....

圖２．９?ＧＨＡ的總離子流圖??Ｆｉｇｕｉ＊ｅ．?２．９?Ｔｈｅ?ｔｏ化?１?Ｉｏｎ?Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｇｒａｐｈｙ?ｏｆ?ＧＨＡ??

２Ａ２．３修飾位點(diǎn)鑒定??在進(jìn)行酶解化圖分析前，將ＧＨＡ用族蛋白酶酶切，利用反相ＨＰＬＣ分離酶??解肋段，并通過電噴霧離子陷阱質(zhì)譜得到ＧＨＡ樣品的總離子流圖（如圖２．９所??示），通過分析確定狀段的分子量。對(duì)解析的每個(gè)肋段參照ＧＨＡ的一級(jí)氨基酸??序列進(jìn)行鑒定（表２．１）。??如....

本文編號(hào)：4024389