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節(jié)旋藻對(duì)溫度脅迫的生理響應(yīng)與差異表達(dá)基因分析

發(fā)布時(shí)間:2018-04-18 19:20

  本文選題:節(jié)旋藻 + 溫度脅迫。 參考:《天津商業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:為了提高規(guī);B(yǎng)殖節(jié)旋藻(螺旋藻)的生物量,雖然眾多學(xué)者根據(jù)生理生化指標(biāo)變化報(bào)道了溫度影響節(jié)旋藻生長(zhǎng)的作用機(jī)制,但采用轉(zhuǎn)錄組學(xué)方法進(jìn)行相關(guān)研究的報(bào)道很少。因此,本文以課題組分離純化的節(jié)旋藻藻株(Arthrospira sp.)TJSD091的單藻絲純培養(yǎng)物為對(duì)象,在45℃、15℃脅迫處理24 h后進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,經(jīng)過(guò)對(duì)差異表達(dá)基因的功能注釋,并采用qRT-PCR技術(shù)對(duì)顯著差異表達(dá)的基因進(jìn)行驗(yàn)證。同時(shí)測(cè)定相關(guān)生理指標(biāo)的變化,試圖全面揭示不同培養(yǎng)溫度對(duì)節(jié)旋藻代謝途徑的影響,為溫度脅迫下節(jié)旋藻生長(zhǎng)調(diào)控過(guò)程及抗逆機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.受到溫度脅迫的藻株,細(xì)胞內(nèi)主要脂肪酸的含量發(fā)生明顯變化。45℃培養(yǎng)時(shí),總飽和脂肪酸及硬脂酸含量升高,有助于維持膜的穩(wěn)定性;15℃培養(yǎng)時(shí)不飽和脂肪酸,尤其是主要成分α-亞麻酸的含量顯著提高,增強(qiáng)膜的流動(dòng)性以維持細(xì)胞正常生理代謝活動(dòng)。轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn):45℃時(shí),脂肪酸去飽和酶?9 des基因表達(dá)下調(diào)使得硬脂酸含量增加;15℃時(shí),3-;-[酰基載體蛋白]-還原酶基因和脂肪酸去飽和酶?9 des和?12 des基因的表達(dá)上調(diào),因此不飽和脂肪酸大量合成。2.受到溫度脅迫的藻株,光合色素如Chl a、PC和APC的含量顯著下降,光合作用受影響,相對(duì)生長(zhǎng)速率降低;Car在45℃培養(yǎng)時(shí)含量持續(xù)上升,不僅有助于高溫環(huán)境中光合作用的進(jìn)行,同時(shí)能夠有效清除細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的活性氧自由基,防止發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)。3.與35℃相比,45℃/15℃下差異表達(dá)基因總數(shù)分別為366/614個(gè),其中45℃培養(yǎng)時(shí)上/下調(diào)的分別有192/174個(gè),15℃培養(yǎng)時(shí)上/下調(diào)的分別有365/249個(gè)。溫度脅迫時(shí)差異表達(dá)基因顯著富集途徑主要是光合磷酸化和氧化磷酸化。另外,45℃培養(yǎng)時(shí)顯著富集途徑還包括核糖體蛋白亞基和HIF-1信號(hào);15℃培養(yǎng)時(shí)顯著富集途徑還包括氮代謝。4.無(wú)論是45℃還是15℃培養(yǎng),細(xì)胞內(nèi)一些基因表達(dá)水平的變化趨勢(shì)一致。如光合系統(tǒng)中PSⅡ的反應(yīng)中心D1蛋白(psbA)、D2蛋白(psbD)的基因表達(dá)水平上調(diào),以維持PSⅡ的正確構(gòu)象。色素蛋白cp43(psbC)基因的表達(dá)水平下調(diào),光合色素的合成過(guò)程受到抑制,影響了光能捕獲及傳遞效率,最終光反應(yīng)效率降低;又如氧化磷酸化過(guò)程中的NADH脫氫酶復(fù)合體,其蛋白亞基基因(NdhD)的表達(dá)水平上調(diào),影響了NADPH的脫氫反應(yīng),導(dǎo)致能量不足,影響了藻株的生長(zhǎng)繁殖。
[Abstract]:In order to improve the biomass of cultured spirulina (Spirulina), although many scholars have reported the effect of temperature on the growth of Spirulina according to the physiological and biochemical indexes, there are few reports on the transcriptome method.Therefore, the pure culture of Arthrospira sp.)TJSD091 isolated from Arthrospira sp.)TJSD091 was treated at 45 鈩,

本文編號(hào):1769706

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